刘永锋
- 作品数：348 被引量：1,835H指数：25
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 生防菌Bs-916脂肽类粗提物对水稻抗性诱导作用
- 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Bs-916能有效控制水稻纹枯病和稻曲病,具有抗菌谱广,生长快,能产生抗生素,对水稻具有诱导抗性作用,是一种能在水稻病害防治中发挥作用的生物防治因子。过氧化物酶(POD)...
- 张荣胜刘永锋陈志谊
- 文献传递
- 黏质沙雷氏菌C8-8几丁质酶基因的克隆与表达被引量：2
- 2012年
- 利用PCR方法从黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)C8-8中克隆到编码几丁质酶的chiA基因,大小为1 692 bp,推测其编码一条长563个氨基酸的多肽链,分子量约为60 900。同源分析研究结果表明从C8-8中克隆的chiA基因序列与黏质沙雷氏菌株141(DQ 990373.1)和14041菌株(DQ 493896.1)的chiA基因序列相似性最高,达到99%。结构域分析结果表明从C8-8中克隆的chiA基因N末端(23 AA)存在典型的信号肽序列,C端存在另外两个结构域,即PKD区(73 AA)和几丁质酶催化区(387 AA)。采用大肠杆菌表达系统重组表达chiA基因,结果表明重组菌株在几丁质诱导培养基上能产生透明的水解圈。采用SDS-PAGE电泳分析,结果表明chiA重组表达产物的相对分子质量约为60 000,与预测分子量大小基本一致。初步提纯后,生物活性试验结果表明该重组表达产物能水解几丁质,在几丁质培养基上产生透明的水解圈。
- 刘邮洲罗楚平刘永锋陈志谊
- 关键词：黏质沙雷氏菌克隆
- 稻曲病病菌Zn_(2)(Ⅱ)Cys6型转录因子UvZC1基因的克隆及功能分析被引量：3
- 2021年
- 为明确Zn_(2)(Ⅱ)Cys6型转录因子UvZC1在稻曲病病菌中的功能,利用CRISPR-Cas9结合同源片段双交换的方法,诱导野生型菌株Jt209发生UvZC1基因缺失突变。结果显示,与Jt209相比,UvZC1基因缺失突变体的生长速率和分生孢子量均显著下降,且突变体中部分与稻曲病病菌其他产分生孢子相关基因表达量发生变化;此外,该基因的缺失导致突变体对十二烷基硫酸钠(SDS)更敏感,而对氧化胁迫的耐受性增强;在稻曲病病菌接种水稻后24 h、48 h的侵染早期,UvZC1基因的表达量明显上升,但基因缺失突变体接种水稻后形成的稻曲球数量与野生型之间没有差异。综上所述,UvZC1基因参与稻曲病病菌营养生长、分生孢子产生和侵染水稻过程,还与稻曲病病菌细胞壁的完整性和响应氧化胁迫相关。
- 俞咪娜于俊杰曹慧娟潘夏艳宋天巧刘永锋
- 关键词：基因敲除基因功能
- 假隔链格孢SF-193产孢初步研究
- 空心莲子草是国家环保总局列入公布的"中国第一批外来入侵生物名单"的恶性杂草。假隔链格孢SF-193是空心莲子草的强致病菌,能使空心莲子草的叶片和茎杆发病,导致植株叶片黄化、脱落,能有效地抑制空心莲子草的种群优势,具有开发...
- 聂亚锋陈志谊刘永锋刘邮洲罗楚平
- 关键词：空心莲子草
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌Bs-916草酸脱羧酶基因Bacisubin的克隆、原核表达及其表达产物的酶活性分析被引量：3
- 2012年
- 为明确枯草芽孢杆菌生防菌株Bs-916的抑菌蛋白质Bacisubin的编码基因,并初步解析Bacisubin的抑菌机理,根据该蛋白质的部分序列设计简并引物,获得了编码基因的部分序列,参考基因组数据库克隆了Bacisubin基因全序列。将Bacisubin基因克隆至PET28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达获得His标签融合蛋白质,并利用次甲基蓝-重铬酸钾法初步检测了该融合蛋白质的酶催化活性。克隆获得Bacisubin基因开放阅读框序列共1 161 bp,G+C含量为51.3%,可编码386个氨基酸,编码蛋白质与Bs-168菌株的草酸脱羧酶Yvrk蛋白质的氨基酸相似度为87%,与其他多种细菌和真菌的草酸脱羧酶的N端和C端Cupin活性中心区域和Mn2+结合区域高度保守。预测Bacisubin分子量为43 600,等电点为5.18,是较稳定的可溶性草酸脱羧酶,其催化最适pH为6.0左右,最适温度为30℃左右。说明枯草芽孢杆菌Bs-916的抑菌蛋白质Bacisubin为草酸脱羧酶,抑菌作用可能与其降解草酸的能力有关。
- 于俊杰陈志谊胡建坤俞咪娜聂亚锋尹小乐刘永锋
- 关键词：枯草芽孢杆菌草酸脱羧酶基因克隆酶活性
- 解淀粉芽胞杆菌Lx-11防治水稻细菌性条斑病应用技术研究被引量：10
- 2013年
- 解淀粉芽胞杆菌Lx 11能够有效防治水稻细菌性条斑病,研究生防菌Lx 11田间高效使用技术对保证生防效果至关重要。本文针对生防菌Lx 11初步研究了其最适使用时期、使用浓度及使用次数,结果表明,生防菌Lx 11最适喷施时期为水稻细菌条斑病初发病期,喷施生防菌Lx 11的浓度(菌含量)不低于1×107cfu·mL 1,防治间隔期为10 d。按照此使用技术,生防菌Lx 11对水稻细菌性条斑病的防治效果大于60%,显著高于化学药剂叶枯唑。
- 张荣胜陈思宇王晓宇罗楚平刘永锋陈志谊
- 关键词：水稻细菌性条斑病生物防治技术
- 江苏淮安蒲菜种群特征及优质生产技术要点被引量：4
- 2015年
- 淮安蒲菜具有喜水喜肥喜光喜温特性。对淮安蒲菜株高、叶、叶鞘、匍匐茎、花形态特征进行了描述。淮安蒲菜栽培技术要点是选择合适种植地块、施足基肥、合理密植、科学管理。
- 柳凯张霞孙玉东刘永锋张杰柳巽图
- 关键词：蒲菜种群特征
- 水稻稻瘟病菌拮抗细菌的筛选与鉴定被引量：22
- 2011年
- 采用平板测定法和盆栽试验结合筛选对稻瘟病菌具有高效抑菌活性的拮抗细菌,结果表明:从江苏省南京市、丰县、泗阳县等地的50份稻田水稻根际土壤样品中,得到1 015个细菌分离物,共获得45株对稻瘟病菌具有高效抑菌活性的拮抗细菌,其中10株对稻瘟病菌、水稻纹枯病菌和水稻稻曲病菌、水稻细菌性条斑病菌及水稻白叶枯病菌均表现出较强的广谱抗菌活性(对5种水稻病原菌平均抑制率在45%以上)。水稻苗瘟的盆栽防治效果表明:拮抗细菌T429和T392具有较好的防治效果,分别达到69.4%和61.1%。结合理化特性和16S rDNA鉴定,T429为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),T392隶属伯克霍尔德菌属(Burkholderia)。
- 张芬刘邮洲于俊杰聂亚锋陆凡刘永锋
- 关键词：稻瘟病菌拮抗细菌
- 江苏省水稻主栽品种对稻瘟病的抗性评价被引量：3
- 2000年
- 通过江苏省主栽品种对水稻稻瘟病的抗性鉴定 ,明确我省主栽品种的抗性现状。结果表明 ,不同类型的水稻品种对稻瘟病抗性不同 ,其中杂交籼稻和杂交粳稻的抗性较好 ,全抗率均为10 0 % ,中粳稻的抗性相对较差 ,全抗率为 2 0 .0 % ;参试品种对中G1和中F1小种的感病率较高。
- 刘永锋陆凡陈志谊陈志德陈毓苓
- 关键词：水稻主栽品种稻瘟病抗性评价
- 莲子草假隔链格孢对空心莲子草活性氧代谢的影响被引量：5
- 2013年
- 为了明确活性氧(ROS)在莲子草假隔链格孢Nimbya alternantherae侵染空心莲子草过程中的作用,采用氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光化学还原法、二氨基联苯胺(DAB)组织染色法和分光光度法测定了莲子草假隔链格孢SF-193侵染空心莲子草后超氧阴离子(O2﹒-)产生速率、过氧化氢(H2O2)含量、抗氧化酶体系(超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD))活性和丙二醛(MDA)含量。结果显示,接种莲子草假隔链格孢SF-193的叶片经NBT和DAB染色后检测到ROS的大量累积。叶片内的O2﹒-产生速率和H2O2含量随接种时间显著升高,接种后48 h均达到峰值,分别为2.33 nmol.min-1.g-1FW和11.78μmol.g-1FW,是对照的2.1倍和2.5倍;SOD、CAT和POD活性均在接种后8 h达到峰值,分别为277.75、23.47和444.92 U.min-1.g-1FW,之后逐渐下降;MDA含量随接种时间持续上升,72 h时达到峰值,为5.20μmol.g-1FW。表明莲子草假隔链格孢侵染空心莲子草打破了ROS产生与清除之间的平衡,导致植物细胞内的ROS迅速上升,对叶片细胞造成严重破坏。
- 聂亚锋刘长河陈志谊刘永锋刘邮洲
- 关键词：空心莲子草活性氧抗氧化酶
