叶菁
- 作品数：138 被引量：394H指数：10
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 超抗原SEA的基因克隆、原核表达与鉴定被引量：7
- 2002年
- 目的 构建pRSET SEA重组表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,诱导表达超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcalenterotoxinA ,SEA) ,进行分离、纯化及westernblot鉴定。方法 采用PCR技术 ,从产SEA的葡萄球菌标准菌株FRI1 0 0基因组DNA中获得SEA全长序列 ,克隆入pUC1 9中 ,进行测序 ,构建pRSET SEA表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,通过异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (isopropyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达 ,分离、纯化及westernblot鉴定。结果 PCR获得超抗原SEA基因片段 ,DNA测序结果与文献报道一致 ;构建了pRSET SEA表达质粒 ,并成功地诱导表达出32 0 0 0u的蛋白 ;Westernblot鉴定所得蛋白能够与SEA单克隆抗体特异性结合。结论 本研究成功地克隆了SEA全长 ,并进行了原核表达和分离、纯化 ,获得了SEA蛋白。
- 叶菁隋延仿李增山陈广生张秀敏曹云新
- 关键词：葡萄球菌肠毒素A超抗原原核表达PCR
- 软组织肉瘤患者Th1/Th2亚群漂移研究被引量：5
- 2000年
- 目的 :观察软组织肉瘤患者T淋巴细胞亚群中Th1/Th2的变化 ,为细胞因子免疫治疗提供依据。方法 :应用放射免疫分析法以及酶联免疫分析法检测 10例软组织肉瘤患者及 10例健康志愿者血清中IL 2、IL 4、IL 6、IL 10、IL 12的含量 ,检测外周血单个核细胞培养上清中IL 2、IL 4含量。结果 :软组织肉瘤患者血清及培养上清中IL 2、IL 12减少 ,而IL 10、IL 4、IL 6含量增加。经过植物血凝素刺激的培养淋巴细胞上清液中的IL 4含量显著增加 ,而IL 2显著降低。结论 :软组织肉瘤患者体内存在Th1/Th2平衡失调 ,其中Th1亚群功能抑制 。
- 郭爱林隋延仿范清宇张盈华殷缨叶菁
- 关键词：软组织肉瘤漂移TH1/TH2亚群免疫疗法
- HNF4α-PPARα相互调节在NAFLD中的意义
- 目的 1.研究人体NAFLD各个阶段组织PPARα和HNF4α的表达变化;2.明确HNF4 α和PPARα对脂代谢的相互作用方式;3.明确PPAR α和HNF4 α对细胞内TG含量和脂滴数量的影响.方法 1.选取人体正常...
- 黎瑶童南伟叶菁邱平
- 应用Photoshop软件合成FISH HER-2多色荧光图像被引量：1
- 2013年
- 人类表皮生长因子受体-2（HER-2/neu,erbB-2）是一种相对分子质量185 kDa的跨膜受体,在25%～30%的原发性乳腺癌中HER-2/neu基因过表达。赫塞丁（Herceptin）是一种重组DNA衍生的人源化抗p185HER2嵌合抗体,可特异性结合p185HER2。由于赫塞丁治疗是以HER-2为靶点的靶向性治疗,因此只有HER-2过表达的患者应用该药才可能有效[1-3]。
- 王文勇赵一龄王伯沄叶菁张素珍黄晓峰
- 关键词：PHOTOSHOP软件FISH
- 肝癌靶向性超抗原基因疫苗的设计和预测被引量：6
- 2003年
- 目的 :探讨AFP顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原疫苗 (SEA(D2 2 7A) Linker CD80tm)设计的合理性。方法 :应用核酸和蛋白质分析软件GeneConstructionKit2 .0、ANTHERPRO5 .0、JAMBW1 1和www .expasy .com网站提供的方案 ,分析重组体的开放读框以及融合蛋白的可及性、柔性、抗原性和疏水性 ,并作了跨膜区和二级结构模拟。结果 :重组体的转录受AFP顺式作用元件调控 ,Linker所在部位柔性高 ,可及性弱 ,不改变两侧蛋白分子的抗原性和疏水性。融合蛋白表达后 ,被CD80tm锚定于肝癌细胞表面 ,超抗原部分 (SEA)表达在细胞膜外 ,二级结构预测Linker不改变蛋白结构 ,完全符合作者设计疫苗的初衷。结论 :重组疫苗设计合理 ,特异性高 ,融合蛋白有很大可能保留了SEA和CD80tm的理化特性 ,为进一步的实践操作提供了可靠的理论基础。
- 禄韶英隋延仿李增山潘承恩武文叶菁
- 关键词：肝癌
- 以CpG-ODN为佐剂的MAGE-n蛋白疫苗的免疫学作用及抗肿瘤效应被引量：2
- 2006年
- 目的制备人黑色素瘤抗原-n(MAGE-n)蛋白疫苗,研究含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合MAGE-n蛋白疫苗,诱导小鼠产生的免疫应答,及在肿瘤免疫治疗中的作用。方法对含有MAGE-n原核表达质粒pGEX-MAGE-n的大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化,作为MAGE-n蛋白疫苗,人工合成CpG-ODN作为佐剂,以C57BL/6小鼠为实验动物进行免疫接种;采用ELISPOT、LDH释放试验、血清ELISA法检测小鼠的细胞免疫和体液免疫反应;通过观察瘤体积和生存期了解疫苗的抗肿瘤效果。结果联合应用CpG-ODN和纯化的MAGE-n蛋白,能诱发C57BL/6小鼠产生较强的MAGE-n特异性的细胞和体液免疫应答;在MAGE-n阳性的B16肿瘤的免疫治疗中,可以减缓肿瘤的生长速度,延长荷瘤鼠的生存期。结论以CpG-ODN作为佐剂的MAGE-n蛋白疫苗,可以诱导C57BL/6小鼠产生MAGE-n特异性的免疫应答,对荷瘤鼠有较好的抗肿瘤效果,为肿瘤免疫治疗提供了一条新的途径。
- 黄亚渝童卫马加海叶菁陈广生隋延仿
- 关键词：CPG岛寡脱氧核糖核苷酸类
- 诊断超声提高脂质体介导血管内皮生长因子基因转染的体外实验被引量：1
- 2004年
- 目的 研究超声破坏微泡造影剂的方法提高脂质体介导的血管内皮生长因子 (VEGF)基因在内皮细胞中转染率的可行性。方法 脂质体介导VEGF基因转染 1h后 ,将 6孔板中的内皮细胞每孔加入造影剂 10μl或 10 0 μl或 5 0 0 μl,然后置于水槽中 ,暴露在超声下 3 0s、60s、90s。 2d后 ,用荧光显微镜观察标记基因增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的表达。结果 超声照射细胞 3 0s和 60s ,EGFP基因表达显著提高 ,照射 90s时杀死了大多数细胞。每孔加入微泡造影剂 10 0 μl时 ,其在超声作用下产生的空化作用提高了基因转染效率 ,造影剂为 5 0 0 μl时 ,细胞死亡率较高。 结论 超声破坏微泡造影剂可以提高脂质体介导的基因细胞转染效率 。
- 于铭钱蕴秋杜永峰万明习禄韶英孙晖叶菁隋延仿
- 关键词：脂质体介导超声血管内皮生长因子基因转染EGFP增强型绿色荧光蛋白
- 共表达MAGE-1与EGFP基因的小鼠黑色素瘤细胞系的建立
- 2004年
- 目的 :构建黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)基因的真核表达载体 ,并在小鼠黑色素瘤B16细胞中进行表达。方法 :采用分子生物学的手段 ,构建了MAGE 1与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因共表达的质粒pIRES2 EGFP MAGE 1,通过脂质体以共表达质粒转染B16细胞 ,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达 ,用免疫组化染色法检测细胞中MAGE 1的表达。结果 :成功地构建了真核表达载体pIRES2 EGFP MAGE 1。以其转染B16细胞后 ,经荧光显微镜及免疫组化染色法检测 ,可见细胞内有EGFP及MAGE 1的表达。结论 :成功地建立了可共表达MAGE 1与EGFP基因的B16细胞 ,为MAGE 1在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了研究基础。
- 陈广生叶菁宋宏萍张秀敏黄亚渝马加海隋延仿
- 关键词：黑色素瘤抗原-1增强型绿色荧光蛋白黑色素瘤
- MAGE-1、结核杆菌HSP70与MAGE-3融合基因的构建、原核表达及分离纯化
- 目的构建结核杆菌 HSP70与肿瘤抗原 MAGE-1、MAGE-3的融合基因,在大肠杆菌中进行表达,并进行分离纯化。方法：通过 PCR 方法扩增 MAGE-3基因片断583-945bp 和 MAGE-1中间片断280-5...
- 陈广生隋延仿司少艳胡沛臻宋宏萍叶菁李航张秀敏王文勇
- 文献传递
- 人MAGE-1基因的克隆、原核表达及其抗体的制备被引量：1
- 2004年
- 目的 获得MAGE 1蛋白 ,制备其多克隆抗体。方法 采用RT PCR方法从人肝细胞癌HepG2中克隆MAGE 1基因 ,构建其原核表达质粒 ,并进行原核表达与蛋白分离纯化。免疫动物 ,制备MAGE 1的抗血清。经固化GST蛋白的Sepharose 4B交叉吸收后 ,采用琼脂双扩实验和ELISA方法检测其效价和特异性。结果 所得MAGE 1cDNA序列与GeneBank中公布的一致。构建了MAGE 1194 - 30 9aa片段的原核表达质粒pGEX MAGE 1,经诱导及分离纯化 ,得到一Mr 约 4 2 0 0 0的融合蛋白。免疫动物 ,分离血清 ,经交叉吸收后 ,琼脂双扩及ELISA实验结果显示多克隆抗体能够与MAGE 1蛋白特异性结合。结论 本研究成功地获得MAGE 1蛋白 ,制备的抗MAGE 1多克隆抗体 ,经交叉吸收后能够特异性地与MAGE 1蛋白结合 ,为研究MAGE
- 叶菁陈广生黄亚渝宋宏萍张秀敏隋延仿
- 关键词：黑色素瘤抗原-1克隆原核表达
