吴云华
- 作品数:36 被引量:19H指数:3
- 供职机构:中南民族大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生理学化学工程更多>>
- 重组家蝇细胞色素P450 6A1的大肠杆菌对艾氏剂的生物降解作用被引量:2
- 2012年
- 以大肠杆菌为宿主表达家蝇细胞色素P450 6A1(CYP6A1)酶,在CYP6A1基因后面加入人细胞色素P450还原酶CPR基因,验证了CPR酶对CYP6A1酶催化功能的影响,和CYP6A1酶、重组大肠杆菌对艾氏剂的代谢能力.结果表明:CYP6A1蛋白对艾氏剂有环氧化作用,在CYP6A1对艾氏剂催化中起关键作用.将5μmol/L艾氏剂加入重组大肠杆菌菌液8 h可检测到163.36nmol/L艾氏剂环氧化产物狄氏剂,说明CYP6A1-CPR宿主菌对艾氏剂具有代谢能力,可用于艾氏剂污染的土壤的生物降解.
- 吴云华杨帆
- 关键词:艾氏剂生物降解重组大肠杆菌
- 重组拟南芥细胞色素P450 707A3在大肠杆菌中的原核表达被引量:4
- 2017年
- 拟南芥细胞色素P450 707a基因是编辑脱落酸8-羟化酶的基因,克隆其中的cyp707a3基因并构建表达载体p CWori(+)-cyp707a3,在E.coli Rosseta菌株中原核表达并得到了具有活性的酶蛋白.结果显示:大部分酶蛋白定位于大肠杆菌细胞膜.
- 吴云华肖虔
- 关键词:原核表达重组大肠杆菌膜蛋白
- 一种用于microRNA定量分析的纸基检测系统及其制备方法和检测方法
- 本发明涉及生物医学分析领域,尤其涉及一种用于microRNA定量分析的纸基检测系统及其制备方法和检测方法,所述纸基检测系统整合了靶标microRNA分子的特异性识别、滚环扩增和生物发光共振能量转移传感过程,仅利用智能手机...
- 李勇吴云华
- 一种基于片段化萤光素酶-DNA嵌合体互补的发光体系、构建方法及其应用
- 本发明提供了一种基于片段化萤光素酶‑DNA嵌合体互补的发光体系、构建方法及其应用。所述发光体系由萤光素酶大亚基‑DNA嵌合体、萤光素酶小亚基‑DNA嵌合体和实现上述两种嵌合体互补发光的单链DNA模板组成。本技术方案提供的...
- 李勇吴云华
- 文献传递
- 一种基于转录激活子样效应因子的生物发光检测探针及其构建方法及应用
- 本发明提供了一种基于转录激活子样效应因子的生物发光检测探针,所述探针无需化学标记即可实现对microRNA(miRNA)的生物发光检测,该探针为一种单体蛋白质,包括以下三个部分:1)可特异性识别DNA‑miRNA杂合链的...
- 李勇吴云华
- 文献传递
- 一种用于免疫印迹分析的生物发光探针及其应用
- 本发明提供了一种用于免疫印迹分析的生物发光探针,所述探针的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,包括:可结合一级抗体的串联Z结构域;具有生物发光功能的萤光素酶结构域;上述两个结构域的连接区。本发明同时还提供了上述探针的...
- 李勇吴云华
- 文献传递
- 细胞色素P45055B1的直接电化学及对一氧化氮的电催化检测被引量:1
- 2020年
- 采用戊二醛(GA)交联法将细胞色素P45055B1(CYP55B1)固定在热解石墨电极(PGE)表面,牛血清白蛋白(BSA)封闭多余活性位点,构建了一种新型一氧化氮(NO)生物传感器.并考察了电化学生物传感器的选择性与稳定性.结果表明:CYP55B1实现了直接电子传递,氧化还原峰电位位于-0.355 V和-0.385 V,CYP55B1对NO具有电催化活性,其催化还原峰位于-0.85 V.NO的检测线性范围为14.4~108μmol·L^-1,检测限为10.47μmol·L^-1,且该生物传感器具有良好的稳定性及选择性.
- 姜楠吴云华
- 关键词:一氧化氮电化学传感器
- 细胞色素P4502C9毕赤酵母表达及其直接电化学研究
- 了细胞色素P4502C9在毕赤酵母中的表达条件,成功表达了CYP2C9.利用聚丙烯酰胺固定CYP2C9于热裂解石墨电极表面,实现了CYP2C9的直接电化学.研究了CYP2C9的直接电化学行为及对双酚A的催化氧化,获得了双...
- 孙鹏宇吴云华
- 关键词:毕赤酵母细胞色素电化学行为米氏常数
- 重组人细胞色素P450 2C9在毕赤酵母中的胞内表达被引量:2
- 2013年
- 以含有CYP2C9基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板,并在人细胞色素P4502C9的5'端插入kozak序列及3'端6×His标签进行PCR扩增,克隆至真核表达载体pPIC3.5K,利用电激法将经Sal I线性化的重组质粒pPIC3.5K-2C9转化至毕赤酵母GS115中,通过抗性、表型和PCR筛选多拷贝整合株,甲醇诱导毕赤酵母GS115/pPIC3.5K-2C9的表达,SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定表达产物.结果表明:含有重组质粒的重组pPIC3.5K-2C9表达了大小为55KD的目的蛋白,与预期大小相符,说明人细胞色素CYP2C9可在毕赤酵母的胞内表达.
- 吴云华孙鹏宇
- 关键词:毕赤酵母胞内表达
- 细胞分裂素氧化酶OsCKX 3表面展示体系及其构建方法和应用
- 本发明首先根据已经发表的OsCKX 3基因序,提取日本晴的RNA,逆转录得到cDNA,并以此为模板通过聚合酶链式反应(PCR)扩增OsCKX 3。PCR扩增引物对包括上游引物和下游引物。紧接着,本发明提供了上述细胞分裂素...
- 吴云华李勇龚斌
- 文献传递