吴斌
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
- 供职机构：上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市科技兴农重点攻关项目上海市科技兴农推广项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 精子载体法获得植酸酶转基因猪被引量：1
- 2013年
- 将带有植酸酶基因的重构质粒酶切纯化后,与去除精浆的猪新鲜精液按比例混合,17℃孵育处理使重构质粒结合到精子头部,通过人工授精对6头受体母猪进行配种,4头受孕,产仔38头。经PcR对特异性片段扩增,结果表明:有6头PcR结果为阳性,阳性率为15.8%。扩增片段经克隆、测序、比对,与阳性对照组序列相似率均在99%以上,说明目的基因已转入阳性个体体内。
- 吴斌戴建军张廷宇张树山吴彩凤顾晓龙陈会兰张德福
- 关键词：精子载体法植酸酶基因转基因猪
- 体细胞克隆小型猪主要性能指标的测定被引量：2
- 2013年
- 通过与普通巴马小型猪的生长发育规律、繁殖性能、生理生化指标和屠宰肉质性能等的比较,了解小型克隆猪的主要性能指标,以期为克隆猪安全性评估及其产业化健康发展提供借鉴。结果表明,体细胞克隆巴马小型猪与普通猪的各项性能指标差异不显著。这种相似性在一定程度上说明了体细胞克隆猪的产业健康性和安全性。
- 张德福陈会兰顾晓龙戴建军张廷宇张树山吴彩凤吴斌
- 关键词：克隆猪性能指标安全性
- 纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物对猪精子介导基因转移效率的影响被引量：3
- 2013年
- 为优化猪精子介导的基因转移(SMGT)技术,提高转基因效率,本试验利用纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)为载体介导猪精子转染外源DNA,经原位杂交检测其阳性率,体外受精(IVF)分析外源基因的表达。结果显示,0.5μg线状质粒DNA中加入PAMAM-D(质量比20∶1)阳性率最高(P<0.05);孵育时间为90、120min时,阳性率显著高于30、60min组(19.94%、18.57%与8.50%、13.87%;P<0.05);以此条件处理精子,阳性率显著高于无载体和脂质体处理组(23.93%与7.25%、13.25%;P<0.05)。各处理精子经IVF后,PAMAM-D组EGFP表达率显著高于其他2组(9.19%与4.81%、3.43%;P<0.05),各组绿色荧光胚胎经基因组PCR分析均能检测到EGFP基因。结果表明,PAMAM-D可有效介导猪精子转染外源DNA,并通过体外受精将外源基因导入胚胎中。
- 吴斌戴建军张廷宇张树山吴彩凤顾晓龙陈会兰张德福马恒东
- 关键词：精子
- 新生死亡克隆猪的组织病理学观察被引量：3
- 2014年
- 对1例新生死亡的体细胞克隆猪的5种组织进行详细的组织病理学观察,结果发现:体细胞克隆猪肺脏表现为典型的肺不张,肺泡壁有明显充血;肝脏的肝细胞形态异常,肝索紊乱,无典型肝小叶结构;肾脏的肾小球处于不同发育阶段,肾小管管腔尚未形成,仅有肾小管轮廓。
- 陈会兰戴建军吴彩凤张廷宇张树山顾晓龙吴斌
- 关键词：体细胞核移植病理学
- 纳米聚合物PAMAM-D在猪精子介导转基因中的应用研究
- 为优化猪精子介导转基因(SMGT)技术,提高转基因效率,开展了以下研究： (1)将纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)应用于猪精子转染pEGFP基因,经原位杂交检测精子阳性率,体外受精(IVF)分析pEGFP...
- 吴斌
- 关键词：体外受精卵胞质内单精子注射
- 文献传递
- H19和IGF2R基因在体细胞克隆猪各组织中的甲基化状态被引量：6
- 2012年
- 为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发现,H19基因DMR在克隆猪肺脏中表现为超甲基化,极显著高于正常猪(95.20%vs 46.80%P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(4～9位、12～S17位),而在其他组织中甲基化差异不显著(P>0.05);IGF2R基因DMR在肝脏中处于超甲基化状态,显著高于正常猪(80.00%vs 39.41%P<0.05),而在肺脏中为去甲基化状态,极显著低于正常猪(14.71%vs 66.47%P<0.01),在其他组织差异不显著(P>0.05)。结果说明,在死亡克隆猪中,H19基因DMR在肺脏和IGF2R基因在肝脏与肺脏中存在不完全的DNA甲基化重编程,这可能是导致克隆动物死亡的因素之一。
- 吴志强谢一妮戴建军张廷宇吴彩凤张树山顾晓龙刘亮吴斌陈慧兰张德福马恒东
- 关键词：DNA甲基化体细胞克隆
- 体细胞克隆巴马小型猪部分生理生化指标的初步测定被引量：1
- 2011年
- 目的探讨体细胞克隆巴马小型猪的生理生化指标特性。方法采用全自动血球计数仪和全自动生化仪，对体细胞克隆巴马小型猪血液的部分生理和生化指标进行测定和分析。结果体细胞克隆巴马小型猪生理生化指标和同期普通巴马小型猪没有显著差异，与人类大部分指标接近。结论体细胞克隆巴马小型猪和人类的生理生化特性有一定的相似性。
- 陈会兰张德福吴彩凤戴建军张廷宇张树山顾晓龙吴斌
- 关键词：体细胞克隆巴马小型猪生理指标生化指标
- 小型猪克隆胚的构建及胚胎移植研究
- 2011年
- 目的建立小型猪的体细胞核移植技术，为开展转基因小型猪动物模型研究提供技术支撑。方法应用体细胞核移植技术，以小型猪胎儿成纤维细胞和枫泾猪耳成纤维细胞作为供体细胞进行体细胞核移植，并将两种重构胚混合后进行胚胎移植。结果两种供体细胞在体外发育能力上无显著差异（P〉0．05）；电融合后进行化学激活能部分提高囊胚发育率，但差异不显著（P〉0．05）。两种方法生产的小型猪和枫泾猪克隆胚胎混合后，经胚胎移植均能顺利产下4只健康后代。经微卫星亲缘关系鉴定，克隆猪lOO％与供体细胞相同，与代孕母猪无关。结论建立的克隆平台能够用于克隆猪的生产。
- 戴建军李垚顾晓龙张廷宇吴彩凤张树山吴斌陈会兰陈学进张德福
- 关键词：体细胞核移植克隆小型猪化学激活
- 纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物对猪精子介导基因转移效率的影响
- 为优化猪精子介导的基因转移(SMGT)技术,提高转基因效率,本试验利用纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)为载体介导猪精子转染外源DNA,经原位杂交检测其阳性率,体外受精(IVF)分析外源基因的表达.结果表明...
- 吴斌戴建军张廷宇张树山吴彩凤顾晓龙陈会兰张德福马恒东
- 鹅VIP基因cDNA、DNA和PHI编码序列克隆的方法
- 本发明公开了一种鹅VIP基因cDNA、DNA和PHI编码序列克隆的方法，用于扩展鹅VIP基因编码区部分序列的特异性引物为VIP1/VIP2，扩增鹅VIP基因cDNA5′序列的特异性巢式引物为GSP2和GSP3，3′端的特...
- 何大乾刘毅王惠影吴斌吴华莉
- 文献传递
