周建光
- 作品数：123 被引量：191H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划军队科研计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- PC-1解除S6K对AKT信号通路的负反馈抑制
- 2014年
- 目的:通过建立过表达PC-1的前列腺癌LNCaP细胞系及敲低PC-1表达的C4-2细胞系,探究PC-1激活AKT信号通路的分子机制。方法:将PC-1基因及针对PC-1的siRNA序列,分别克隆至慢病毒表达载体pCDH-EF1-Myc-MCS-T2A-Puro及干扰载体pSIH1-H1-Puro,包装成慢病毒后分别感染前列腺癌LNCaP及C4-2细胞,通过Western印迹鉴定PC-1过表达及敲低效果,并检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白S6K、AKT的磷酸化水平。结果:PC-1过表达时,S6K磷酸化水平下降,而AKT的磷酸化水平上升。结论:PC-1可以通过抑制S6K激酶活性,解除其对AKT的负反馈抑制作用,从而激活AKT激酶的活性。
- 张晓清王健王洪涛李山虎王芃黄芳洪鎏邓楚中周建光
- 关键词：前列腺癌AKT信号通路
- 一种重组质粒及应用其制备的重组溶瘤腺病毒
- 本发明公开了一种重组质粒及应用其制备的重组溶瘤腺病毒。本发明中，将DNA片段甲(自上游至下游包括两个元件：U6启动子元件、1504-siRNA编码元件)和DNA片段乙(TERTp启动子元件、E1A基因元件、E1B55K-...
- 周建光赵亚丽
- 文献传递
- EphA3受体截短突变体variant b在前列腺癌细胞中的分泌表达
- 2010年
- 目的:验证EphA3受体截短突变体variant b是否是一种分泌蛋白,并探索其内源分泌的特点,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质。方法:构建EphA3 variant b真核表达载体,应用标签抗体、特异性抗体和Western印迹检测前列腺癌细胞培养液中EphA3 variant b的表达,用RT-PCR方法分析EphA3 variant b在8种细胞系中的表达谱和对雄激素刺激的应答。结果:验证了EphA3 variant b是一种分泌蛋白,在雄激素受体阳性的前列腺癌细胞系中特异性表达,雄激素以剂量依赖方式诱导EphA3 variant b表达。结论:EphA3 variant b是一种分泌蛋白,其表达与雄激素受体信号通路相关,有作为前列腺癌血清标志物的潜质。
- 钱晓龙庞博施庆国武瑞琴俞岚李山虎周建光
- 关键词：前列腺癌血清标志物分泌蛋白
- 布鲁氏菌104M疫苗株敲除Omp25基因的重组菌及应用
- 本发明公开了一种布鲁氏菌104M疫苗株敲除Omp25基因的重组菌及应用。本发明提供了重组菌，为降低和/或抑制布鲁氏菌104M中Omp25蛋白活性得到的菌。上述重组菌中，所述降低和/或抑制布鲁氏菌104M中Omp25蛋白活...
- 李山虎王秉翔周建光王莹
- 文献传递
- 重组酶Exo、Beta和Gam在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：1
- 2010年
- 目的:构建exo、beta和gam基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达、制备重组酶Exo、Beta和Gam。方法:将exo、beta和gam基因分别构建在原核表达载体pEGKG和pET28a上,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)和DH5α,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中获得可溶性表达蛋白,用柱层析方法纯化蛋白。结果:构建了原核表达质粒pET28a-exo、pET28a-beta、pET28a-gam和pEGKG-exo、pEGKG-beta、pEGKG-gam;SDS-PAGE结果表明重组酶融合蛋白His-Exo、GST-Exo、His-Beta、GST-Beta、His-Gam、GST-Gam得到可溶性表达;用His标签抗体和GST标签抗体通过Western印迹方法检测到纯化后的融合蛋白。结论:在大肠杆菌中诱导表达了λ噬菌体重组酶,并纯化获得了一定量的纯度较好的蛋白,为下一步制备检测用多克隆抗体奠定了基础。
- 施庆国李山虎钱晓龙周建光
- 关键词：重组酶BETAGAM纯化
- Red体内同源重组介导的egfp、kan基因融合和重组质粒构建
- 2007年
- 重组工程是近年来建立的一种基于高效率体内同源重组的新型遗传工程技术,可应用于靶DNA序列的敲入、敲除和基因克隆等。在应用重组工程技术进行基因亚克隆时发现,体外重叠PCR法难以获得高质量的目的DNA打靶片段,严重影响重组效率。为了解决上述问题,根据Red重组酶介导的体内同源重组工作原理进行了技术改进。先用PCR方法合成egfp和kan两条末端互补的线性DNA片段,然后将其电击共转化进入携带Red重组酶和pcDNA3.1载体DNA的大肠杆菌DY331菌株内,经体内同源重组直接产生的pcDNA3.1-egfp-kan环状重组质粒DNA分子可通过抗生素标记筛选获得,阳性率可达到45%,瞬时转染pcDNA3.1-egfp-kan可获得绿色荧光蛋白在293细胞中的表达。
- 吴洋李山虎施庆国刘党生周建光
- 不同年龄组人群IFABP基因外显子54A/T频率分布的研究被引量：2
- 2005年
- 目的:通过分析不同年龄组人群肠脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein, IFABP)基因外显子(exon)Ⅱ54位点编码丙氨酸或苏氨酸(A/T)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)频率分布,探讨年龄变化与54A/T IFABP基因频率分布的关系.方法:将研究对象按年龄随机分为3组:14～30岁年龄组(Ⅰ组,n=30),35～55岁年龄组(Ⅱ组,n=32),60～85岁年龄组(Ⅲ组,n=34).利用聚合酶链反应(PCR)、HhaⅠ内切酶酶切和基因测序等技术检测各组研究对象的IFABP基因型.结果:各年龄组54A/T IFABP基因型频率分布为,Ⅰ组:A/A 60%,A/T 36.7%,T/T 3.3%;Ⅱ组:A/A 53.1%,A/T 37.5%,T/T 9.4%;Ⅲ组:A/A 29.4%,A/T 44.1%,T/T 26.5%.突变型54T基因频率分别为:22.2%(Ⅰ组),28.2%(Ⅱ组),48.5%(Ⅲ组).与Ⅲ组比较,Ⅰ组和Ⅱ组54T型基因分布频率差别有统计学意义(分别为χ2=10.51, P＜0.01;χ2=6.19, P＜0.05).结论:在不同年龄组,人类IFABP基因外显子Ⅱ54A/T多态性分布存在较大差别,突变型54T随年龄的增长,出现频率升高.
- 王振辉侯小平李桂喜常晓彤王健周建光
- 关键词：肠脂肪酸结合蛋白基因多态性单核苷酸年龄基因频率
- 活菌疫苗载体的研究与应用被引量：2
- 2005年
- 目前在疫苗研究中,要求新型疫苗不仅能够激发高效持久的免疫应答,而且应易于接种、生产费用低。减毒或无毒的活微生物作为疫苗载体能够激起持久的系统和黏膜免疫反应,批量制备成本较低,且具有良好的安全性,近年来已成为疫苗研究领域的热点。本文综述了几种活菌疫苗载体,包括沙门氏菌、卡介苗、耶尔森菌等的研究状况及其在疫苗载体方面的应用。
- 李山虎周建光黄翠芬
- 关键词：黏膜免疫疫苗
- SPON2的新用途
- 本发明公开了SPON2的新用途。该新用途是抗脊椎蛋白2的抗体在制备用于辅助诊断前列腺癌的试剂盒中的应用。实验证明，用检测SPON2的酶联免疫试剂盒或用检测SPON2的免疫组化试剂盒对前列腺癌进行诊断，诊断结果更精确和准确...
- 周建光钱晓龙
- 文献传递
- PC-1分子在细胞内定位的深入探讨被引量：1
- 2004年
- 为了寻找影响PC 1分子进入细胞核的序列 ,将该分子不同区段分别与EGFP融合表达 ,通过观察绿色荧光蛋白在细胞内的分布 ,发现PC 1分子的第 112～ 190区段是一独立的功能区 ,缺失这一区段后 ,分子的其余部分能够进入细胞核并在其中积累 ,这一区段使PC 1分子被排斥于细胞核之外 ,并在细胞质中浓缩成许多点状结构 .运用以SOS恢复系统为基础的酵母双杂交方法 ,发现PC 1分子能够定位于细胞膜上 ,通过缺失突变发现该分子的第 112～ 190区段是一独立的细胞膜定位信号序列 ,这一序列将其定位于细胞的胞膜上 .
- 张浩周建光李杰之黄翠芬
- 关键词：分子细胞核亚细胞定位基因
