张华亮
- 作品数:8 被引量:25H指数:3
- 供职机构:武警医学院附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体构建软骨组织工程支架被引量:9
- 2009年
- 背景:软骨组织工程的核心是利用少量的细胞经体外培养、扩增后,在一定环境下附着在三维多孔支架上,再将细胞/支架复合体移植到体内形成新的组织。目的:拟构建兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体,探讨该支架作为软骨组织工程支架的可行性。设计、时间及地点:细胞-支架学体外观察,于2008-03/2009-02在武警医学院生物化学教研室完成。材料:日本大耳白兔6只用于分离培养骨髓间充质干细胞。医用壳聚糖粉末为山东奥康生物科技有限公司产品。Ⅰ型胶原为Sigma公司产品。方法:取3%的壳聚糖和2%的胶原混合的醋酸溶液,倒入72孔板内,-20℃预冷冻10h,冻干机冷冻抽干24h制作成壳聚糖-胶原支架。取第3代兔骨髓间充质干细胞,以1×109L-1密度接种于支架内,构建细胞/支架复合体。主要观察指标:傅里叶红外光谱、扫描电镜、液体置换法测定支架的理化性质,观察三维培养后细胞在支架上的生长情况。结果:壳聚糖-胶原支架孔径为160~380μm,平均为270μm,孔相通性好,支架孔隙率为(86.00±5.12)%。傅里叶红外光谱仪测定数据表明复合支架组成物有典型的壳聚糖、胶原峰,未发现有聚乙二醇峰。细胞/支架共培养24,48,72h后,骨髓间充质干细胞可渗入支架多孔结构内,并黏附在支架上成簇生长,部分细胞已与支架融合。结论:壳聚糖-胶原支架基本符合软骨组织工程支架要求,能够作为种子细胞的承载体。
- 初殿伟王玮陈立军王文良张华亮杨亮李建鑫
- 关键词:骨髓间充质干细胞软骨组织工程
- 关节镜下治疗成人腘窝囊肿15例
- 目的:探讨关节镜下膝关节前入路术式治疗成人腘窝囊肿的方法及临床疗效.方法; 2004年10月至2006年10月,采用关节镜前入路术治疗成人腘窝囊肿15例,其中男5(33%)例,女10 (67%)例,年龄范围45-60岁,...
- 王文良张华亮刘英杰陈光
- 玻璃化保存法对肌腱形态学及生物力学影响被引量:3
- 2008年
- 目的:探讨玻璃化保存法对兔肌腱组织、细胞形态及力学性能的影响。方法:以18.64%二甲基亚砜(V/V)+13.37%乙酰胺(V/V)+9.17%1,2丙二醇(V/V)+0.10 mmol/L海藻糖+10%小牛血清为玻璃化冷冻保护剂,将新西兰纯种大白兔肌腱采用三步法预处理,-196℃液氮保存14 d作为玻璃化保存组;以15%二甲基亚砜+10%小牛血清作为冷冻保护剂,"两步法"处理后-196℃液氮冷冻保存14 d的新西兰纯种大白兔胫前肌肌腱作为对照组,透射电镜观察组间肌腱组织细胞的形态差异,并分别进行肌腱拉伸实验,检测肌腱破坏载荷峰值、最大载荷拉伸位移及杨氏弹性模量。结果:玻璃化保存组细胞的结构形态未见明显改变,对照组肌腱组织微观结构损伤明显。肌腱破坏荷载峰值:玻璃化保存组与对照组无统计学意义(P=0.256);最大载荷拉伸位移:玻璃化保存组与对照组间差异无统计学意义(P=0.065);杨氏弹性模量:玻璃化保存组与对照组间差异有统计学意义(P=0.006)。结论:与对照组肌腱相比,玻璃化保存法对肌腱组织细胞形态损伤较小,但两者在生物力学特性上无明显差异。
- 王文良刘英杰张华亮陈光
- 关键词:肌腱玻璃化冷冻保存
- 骨软骨组织工程支架的研究现状及发展趋势被引量:3
- 2009年
- 目前,随着骨软骨组织工程的发展,为临床上骨软骨缺损的修复带来了新希望。应用自体细胞、支架、生长因子可以修复骨、软骨的缺损;选取具有生物相容性和可吸收性的复合支架可为细胞提供暂时的支持、黏附、生长环境,促进骨软骨缺损的修复。就骨软骨组织工程支架的分类、特性、应用以及存在的问题和发展趋势作一综述。
- 初殿伟王玮张华亮王文良
- 关键词:骨软骨
- 关节镜下治疗成人胭窝囊肿15例
- 目的:探讨关节镜下膝关节前入路术式治疗成人腘窝囊肿的方法及临床疗效。方法:2004年10月至2006年10月,采用关节镜前入路术治疗成人腘窝囊肿15例,其中男5(33%)例,女10(67%)例,年龄范围45—60岁,平均...
- 王文良张华亮刘英杰陈光
- 文献传递
- 双层壳聚糖与HAP复合支架的初步研究被引量:10
- 2008年
- 目的探讨双层壳聚糖(chitosan,CS)/HAP复合支架作为骨软骨组织工程支架的可行性,并结合兔自体BMSCs修复骨软骨缺损。方法采用冻干法和烧结法制作双层CS/HAP复合支架,检测其理化特性。取日本大耳白兔骨髓4~6mL,全骨髓培养法分离纯化BMSCs,并鉴定。调整第2代BMSCs细胞密度为2×107个/mL,应用纤维蛋白胶种植技术,接种至双层CS/HAP复合支架,体外构建细胞-支架复合物。取36只日本大耳白兔,于右侧膝关节股骨下端外侧髁负重区,作一直径4mm、深3mm的圆柱形缺损,制备兔膝关节骨软骨缺损模型。根据缺损区植入物的不同,分为A、B、C3组(n=12)。A组:植入细胞-支架复合物;B组:植入双层CS/HAP复合支架;C组:不植入任何材料,作为空白对照组。术后6、12周取材,行大体及组织学观察,采用改良Wakitani法评分。结果双层CS/HAP支架CS层孔隙率为76.00%±5.01%,孔径为200~400μm,平均300μm,孔洞相通;HAP层孔隙率为72.00%±4.23%,孔径为200~500μm,平均350μm,孔洞相通,结合部结合好。全骨髓法培养BMSCs,第7天可见集落形成,14d传代;免疫组织化学检测示CD44(+)和CD45(—)。大体观察和组织学检测显示,A组基本修复软骨缺损,骨缺损修复不良,有骨小梁长入;B、C组骨、软骨缺损修复不良,组织学检测以纤维组织或无新生组织形成,软骨及骨缺损均明显存在。术后6、12周,A组改良Wakitani评分分别为(5.17±1.17)分和(3.20±0.75)分,均优于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双层CS/HAP复合支架可作为骨软骨组织工程支架,复合BMSCs可修复兔关节软骨与骨缺损,重建关节解剖结构。
- 张华亮王文良初殿伟刘英杰关静
- 关键词:BMSCS骨软骨缺损
- 双层壳聚糖/羟基磷灰石复合支架的制备及性能研究被引量:4
- 2008年
- 目的:探索制备一种壳聚糖(CS)/羟基磷灰石(HA)双层复合支架的方法,对支架的理化性质进行检测。方法:在3%(m/V)壳聚糖溶液中加入一定量的聚乙二醇,离心去除气泡。将HA支架放入模具中,取配好的壳聚糖溶液,倒入模具中,放入冰箱冷冻,在冷冻抽干机中冻干,制成HA/壳聚糖(CS)支架。采用外观、红外光谱、电镜、乙醇替代、生物力学测定等方法检测支架的材料、内部结构(孔径、孔相通性)、孔隙率、力学性能,考察将其作为骨软骨组织工程支架材料应用的可行性。结果:双层复合支架外观上模拟骨软骨组织学结构,材料为壳聚糖、羟基磷灰石,平均孔径分别为CS层300μm,HA层350μm,孔相通性好,CS孔隙率为(76.00±5.01)%,HA孔隙率为(72.00±4.23)%。CS支架弹性模量为(2.8±0.5)MPa,HA支架的弹性模量为(150±11)MPa。结论:壳聚糖(CS)/羟基磷灰石(HA)双层复合支架符合骨软骨组织工程支架要求,具有较好的应用前景。
- 张华亮王文良关静刘英杰初殿伟张西正
- 关键词:壳聚糖羟基磷灰石
- 玻璃化保存肌腱的生物力学观察
- 2008年
- 目的探讨玻璃化保存法对兔肌腱力学性能的影响。方法玻璃化保存组,6条新鲜胫前肌肌腱,以18.64%二甲基亚砜+13.37%乙酰胺+9.17%1,2丙二醇+浓度0.10mmol/L海藻糖+10%小牛血清为玻璃化冷冻保护剂,将新西兰纯种大白兔肌腱采用三步法预处理,-196℃液氮保存14d;"两步法"深低温冷冻保存组,6条新鲜胫前肌肌腱,以15%二甲基亚砜+10%小牛血清作为冷冻保护剂,"两步法"处理后-196℃液氮冷冻保存14d;对照组,6条新鲜新西兰纯种大白兔胫前肌肌腱。分别进行肌腱拉伸实验,检测肌腱破坏载荷峰值、最大载荷拉伸位移及杨氏弹性模量。结果肌腱破坏荷载峰值:新鲜肌腱组与玻璃化保存组及"两步法"深低温冷冻保存组间差异均有统计学意义(P=0.002),玻璃化保存组与"两步法"深低温冷冻保存组无统计学意义(P=0.256);最大载荷拉伸位移:新鲜肌腱组与玻璃化保存组及"两步法"深低温冷冻保存组3组间均无统计学意义(P=0.065);杨氏弹性模量:新鲜肌腱组与玻璃化保存组及"两步法"深低温冷冻保存组间差异均有统计学意义(P=0.006),玻璃化保存组与"两步法"深低温冷冻保存组差异无统计学意义(P=0.577)。结论玻璃化保存法保存肌腱具有良好的发展前景。
- 王文良刘英杰张华亮陈光张西正
- 关键词:肌腱生物力学玻璃化冷冻保存