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张晓楠: 作品数：83 被引量：413H指数：11; 供职机构：第四军医大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学政治法律更多>>

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兔抗Red蛋白抗血清的纯化及MC3T3细胞中Red蛋白表达时相的分析被引量：3: 2006年; 为了纯化兔抗Red蛋白的3种多克隆抗体,并用其研究Red蛋白在真核细胞中的表达时相,首先于30℃培养了不含目的基因的空载体(pDH2)大肠菌,经彻底裂菌后用丙酮沉淀全菌蛋白,用其在不同时间吸附3种待纯化的Red抗体,然后用间接 ELISA法及Western-blot法检测了3种抗体的效价和特异性。最后用纯化后的3种Red抗体检测三顺反子表达载体pCMV-gIbIx的3 种蛋白表达产物在MC3T3细胞中的表达时相。ELISA及Western-blot检测结果表明:3种抗血清经纯化后特异性好且效价没有受到影响,随后用纯化的抗体成功地研究了Red基因在真核细胞中的表达时相,此结果为Red重组系统在真核生物基因功能的研究中提供了必要的条件。; 张晓楠黄勇陈苏民陈南春王涛赵伟钦; 关键词：多克隆抗体

重组人骨形成蛋白-4的大规模制备被引量：1: 2006年; 含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽(recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP- 4m)质粒的工程菌株,导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体, PAGE电泳后光密度扫描表明hBMP-4m占细菌总蛋白量的42％。悬浮所收集的菌体,裂菌,洗涤4次后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的83．2％。预先取少量样品进行探索实验后,全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上SP-Sepharose FF阳离子柱,以0.35 mol NaCl洗脱,获得纯度为96％的hBMP-4m。其收获量为1．34g/L发酵液;收得率为36．4％。结果表明:使用这套工艺流程大规模制备hBMP-4m,能够得到较好的收得率、较高的收获量和纯度。; 王涛陈苏民陈南春赵伟钦张晓楠; 关键词：蛋白质纯化

重组人Era蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定被引量：2: 2008年; 目的:为了得到可溶性表达的人Era(hEra)蛋白,并检测其生物学活性。方法:把人era的cDNA基因从pUC19质粒亚克隆入表达质粒pMAL-p2x中。pMAL-hEra转化大肠杆菌TB1,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:pMAL-hEra载体表达的融合蛋白是以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的23.9%。再利用直链淀粉亲和色谱柱对表达的融合蛋白进行纯化,接着用因子X将融合部分切除,但切除后的hEra蛋白不稳定,随着时间的延长而被降解。活性测定结果表明人Era蛋白能与GTP结合,并具有GTP酶的活性。结论:可溶性表达了人Era蛋白,并用体外实验证实人Era蛋白是一种G蛋白,这对人era基因的功能研究具有重要意义。; 吴元明张晓楠邢小红张俊杰陈南春陈苏民; 关键词：人ERA 可溶性表达生物活性测定

陕南地区汉族人群9个STR基因座遗传多态性研究被引量：1: 2008年; 目的：调查陕南地区汉族人群9个STR基因座（D3S1358,vWA,FGA,D8S1179,D21S11,D18S51,D5S818,D13S317,D7S820）的遗传多态性分布.方法：采用ABI-310分析仪对Profiler Plus系统的9个STR基因座的复合扩增产物进行电泳分离和四色荧光自动分析检测.结果：在449名无关个体中,共检测到104个等位基因,基因频率分布在0.0011-0.3579之间.9个STR基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P〉0.05）.9个STR基因座的多态信息量均大于0.6765,杂合度均大于0.7248,个体识别力均大于0.8751,非父排除率均大于0.4589,随机个体相同表型的偶合率在0.0405-0.1294之间.结论：获得了陕西地区汉族人群9个STR座位的多态性分布资料;陕西汉族人群的9个STR座位具有较高的遗传多态性,可用于法医亲子鉴定、个体识别和人类群体遗传学等研究领域.; 吴元明张晓楠邹游王晓斌陈志阳; 关键词：STR基因座多态现象汉族基因频率

rhBMP-2m大规模制备纯化过程中使用尿素的分析被引量：2: 2006年; 为大规模制备rhBMP-2m,将高表达rhBMP-2m的工程菌株进行高密度发酵、温度诱导表达,收集菌体,经裂菌和超声洗涤得到并纯化的包涵体。洗涤后的包涵体中,rhBMP-2m占蛋白量的75．1％。为获得高纯度的rhBMP-2m,采用尿素作变性剂将包涵体溶解,经SP-Sepharose FF柱和Q-Sepharose FF柱两步纯化。rhBMP-2m包涵体经pH6．5尿素溶解后,经SP-Sepharose FF柱纯化,蛋白纯度为91％;若rhBMP-2m在碱性尿素中作用时间超过48 h,再经Q-Sepharose FF柱纯化后,纯化产物中在还原性SDS- PAGE中会出现少量与rhBMP-2m二聚体大小接近的蛋白带,显示出碱性尿素对rhBMP-2m的共价修饰作用,会严重地影响 rhBMP-2m的纯化效果和活性:若24 h内完成分离纯化则影响较小,纯化后rhBMP-2m单体的纯度达98％以上。本研究表明尿素适合rhBMP-2m包涵体的大规模纯化。文章对使用尿素的利弊进行了讨论,提出大规模制备蛋白质时最好避免在碱性环境使用高浓度尿素。; 赵玮钦陈苏民陈南春王涛秦云关露媛张晓楠; 关键词：高密度发酵尿素

提高临床医学实验技术人员素质培养探讨被引量：2: 2010年; 医学实验技术队伍是高等医学院校中一支重要技术力量,现代医学技术的发展对临床医学实验技术人员提出了更高的要求。要建立一支结构合理、高水平的临床实验技术队伍,临床医学实验技术员不但需要具备良好的思想素质和职业道德素质,还应该扎实掌握临床医学知识及其与临床相关需要的实验知识技能,才能更好地为临床教学服务,成为医学教学中一支不可缺少的师资力量。; 李娟费舟张晓楠章翔霍军丽

硒性白内障α-晶体蛋白的分子伴侣特性被引量：1: 2001年; 目的:研究硒性白内障α-晶体蛋白的分子伴侣特性。方法:制作SD大鼠亚硒酸钠性白内障模型,分离纯化正常和白内障晶状体α-晶体蛋白。观察α-晶体蛋白对过氧化氢酶（CAT）热凝聚的抑制作用。结果:正常和硒性白内障幼鼠晶状体α-晶体蛋白与对照蛋白比较,具有特异性抑制CAT热凝聚的作用;αH较αL-晶体蛋白伴侣功能降低;硒性白内障α-晶体蛋白的抑制作用下降,正常和白内障晶状体αH和αL-晶体蛋白伴侣功能两者之间分别比较均有显著性差异。结论:硒性白内障α-晶体蛋白抑制CAT热凝聚的分子伴侣活性下降是导致白内障形成的重要环节。眼科学报2001;17:78～81。; 严宏惠延年李明勇张晓楠张延凤武丽华; 关键词：Α-晶体蛋白分子伴侣硒性白内障过氧化氢酶

α-晶状体蛋白分子伴娘功能的初步研究被引量：3: 2004年; α-晶状体蛋白作为晶状体的主要结构蛋白,具有分子伴娘特性,对长期维持晶状体的透明具有重要意义[1,2].为探讨其作用机制,我们对比观察了透明晶状体皮质和核、年龄相关性白内障不同年龄患者晶状体和不同混浊程度晶状体中α-晶状体蛋白对过氧化氢酶热凝聚的抑制作用.; 严宏惠延年李明勇张延凤张晓楠武丽华; 关键词：Α-晶状体蛋白过氧化氢酶白内障

液相色谱二步法纯化人中性粒细胞防御素被引量：4: 1997年; 建立人中性粒细胞（PMN）防御素（HNP）的制备级纯化方法，以便更深入研究防御素的生物学活性．方法：采用Superdex30凝胶色谱法对PMN提取物进行初步分离，再用C18反相液相色谱法进一步纯化，得到HNP纯品并对其进行鉴定．结果：纯化的HNPMr为3400，纯度为91．6％，具有抗微生物活性．结论：应用两步色谱法纯化HNP，是从人的PMN中纯化HNP的较为理想的方法．; 刘文超刘智广张晓楠张学庸胡家露彭道荣徐修礼孙怡群; 关键词：中性粒细胞防御素液相色谱

用酚-氯仿直接从克隆中提取质粒DNA被引量：2: 2007年; 目的:对用酚-氯仿直接从克隆中提取质粒DNA的方法进行了研究。方法:采用不同次数的酚-氯仿抽提,在不同RNaseA作用温度及作用时间下提取了三种质粒。结果:用酚-氯仿抽提2次,RNase A45℃作用8min,质粒纯度(OD260/OD280)为1.85左右、产量大于0.8μg/克隆。结论:本法不但快速,且所提质粒均能满足后续实验如酶切鉴定、测序等方面的需要。对于大批量重组克隆的筛选尤为适合。; 张晓楠黄勇张延凤张秀敏; 关键词：克隆质粒DNA

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