张雨良
- 作品数：117 被引量：329H指数：8
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 嗜线虫致病杆菌拒食蛋白质及其基因序列和该拒食蛋白及其基因的用途
- 一种嗜线虫致病杆菌拒食蛋白质，其中，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明所述的嗜线虫致病杆菌拒食蛋白质在制备抑制农作物害虫幼虫生长的药物中的应用。一种编码如本发明所述的嗜线虫致病杆菌拒食蛋白质的基因，其中，其...
- 邱德文杨怀文杨秀芬曾洪梅张雨良袁京京毛建军尹富仕
- 文献传递
- 番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建被引量：1
- 2015年
- 为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区域和挑选出海南PRSV典型株系的代表样品。以p UCCRNAi为骨架质粒,利用代表样品的CP、NIb、Hc-Pro基因片断保守序列构建RNAi发夹结构,将发夹结构导入p CAMBIA2300-35S-OCS植物表达载体,构建出抗PRSV植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS、p CAMBIA230035S-Hc-Pro-RNAi-OCS、p CAMBIA2300-35S-NIb-RNAi-OCS。实验将PRSV不同株系保守序列的分析与RNAi的高效抗病设计理念相结合,可用于创造高效、广谱抗PRSV病毒病的新种质。
- 赵辉张雨良孔华贾瑞宗朱芸郭安平曾会才彭明
- 关键词：番木瓜番木瓜环斑病毒RNA沉默基因转化
- 海南番木瓜PRSV和PLDMV病毒发生情况及分子鉴定被引量：12
- 2013年
- 对海南昌江、乐东、澄迈、文昌和三亚5个主要番木瓜产区的病毒病发生情况进行调查。对76份番木瓜疑似病毒样品进行检测,检测结果表明海南番木瓜病毒病主要有2种:由番木瓜环斑病毒(Papaya ring spot virus,PRSV)引起的番木瓜环斑病毒病和由番木瓜畸形花叶病毒(Papaya leaf-distortion mosaic virus,PLDMV)引起的番木瓜畸形花叶病毒病。其中,番木瓜环斑病毒病最为常见,检出率达77.63%,是影响海南地区番木瓜产业健康发展的主要病毒病;畸形花叶病毒病发生率很低,仅检出2例番木瓜畸形花叶病毒病样品。以PRSV病毒基因组P1和Hc-Pro作为靶标基因进行分子克隆、测序,结果表明海南地区PRSV病毒可明显分为2个株系:HNPRSV-1株系和HN-PRSV-2株系。此外,基于CP基因的系统进化树分析结果表明在海南新发现的PLDMV病毒可能源于台湾和日本。本研究可为开展番木瓜花叶病的防控和创制抗花叶病毒番木瓜新种质提供数据参考。
- 张雨良黄启星郭安平曾会才赵辉孔华刘志昕
- 关键词：番木瓜PRSV分子鉴定系统进化树
- 海南甘蔗病毒病的调查及其病原分子鉴定被引量：1
- 2014年
- 海南是我国重要的甘蔗生产省份之一，但其甘蔗主要种植区感染病毒的种类和数量尚不十分清楚，且海南甘蔗花叶病病原病毒缺乏分子水平的系统鉴定。为明确海南甘蔗病毒病的种类、数量、分布及危害情况，本研究拟建立较为完整的甘蔗病毒病检测技术体系，对海南甘蔗病毒病展开调查，为甘蔗抗病毒基因工程及健康种苗发展提供参考。
- 王洪星张雨良余乃通罗志文王建华杨文君刘志昕
- 关键词：甘蔗生产分子鉴定病原病毒抗病毒基因工程甘蔗花叶病分子水平
- 棉花纤维特异表达GhCesA4启动子的克隆及序列分析
- 2009年
- 以新疆陆地棉品种新陆早19的DNA为模板,克隆了棉花纤维特异启动子GhCesA4,GenBank登录号:EU183119,将启动子基因序列克隆到pMD19-T载体中,由载体通用引物M13-47、RV-M经PCR鉴定获得pMD19-T/GhCesA4重组载体。测序和序列分析表明,该启动子序列由1503 bp核苷酸组成,与GenBank中GhCesA4基因启动子序列同源性高达98%。分别用限制性内切酶ClaⅠ和BamHⅠ双酶切重组质粒pMD19-T/GhCesA4和双元植物表达载体pBI121,分别回收pMD19-T/GhCesA4重组质粒中的GhCesA4小片段和pBI121植物表达载体中缺失Ca MV35S组成型启动子的大片段,经连接、转化、酶切及测序鉴定,获得由GhCesA4驱动报告基因GUS的新型植物表达载体,命名为pBI-GhCesA4。
- 袁辉罗淑萍张雨良马德英
- 关键词：棉花克隆
- 甘蔗黄叶病毒CP蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化被引量：4
- 2011年
- 为提高甘蔗抗病性,本研究根据甘蔗黄叶病毒海南分离物ScYLV-CHN-HN1全基因组序列(GenBank no.HQ342888),利用病毒CP蛋白介导的RNAi技术,针对病毒外壳蛋白CP,设计两对含有酶切位点的特异性引物,CPsf1/CPsr1和CPasf1/CPasr1,以构建好的pMD19-T/CP质粒为模板,pRNAi1017为中间载体,分别合成构建干扰载体的正反向片段pRNAi-CP-F-R,将CP正反向片段分别插入表达载体pCAMBIA2300的相应位置,构建含有发卡结构的RNAi载体p2300-CP-F-R,经过PstⅠ酶切鉴定,证明载体构建成功。通过农杆菌介导的方法,以干扰表达载体p2300-CP-F-R转化烟草,经过PCR检测,得到12株阳性转基因植株,Southern blot杂交和半定量RT-PCR对其检测,证明干扰片段已经整合烟草基因组中并进行了转录,该结果为RNAi介导抗病毒甘蔗育种研究奠定基础。
- 张雨良熊国如王健华张树珍官梅花杨文君刘志昕
- 关键词：甘蔗黄叶病毒RNA干扰烟草转化
- 新牧一号杂花苜蓿MvNHX1基因的表达分析和提高烟草耐盐性的研究被引量：5
- 2011年
- 提取新牧一号杂花苜蓿的总RNA,用特异引物RT-PCR扩增后的cDNA片段连接入pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行序列分析,新牧一号苜蓿NHX1(MvNHX1)全长1 626 bp,Genbank登录号为:EU375310。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析表明,在盐胁迫下MvNHX1基因的表达均上调。构建重组植物表达载体pBI121-MvNHX1后,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,转基因烟草在盐胁迫下发芽率和生物量均高于非转基因烟草,表明MvNHX1能够提高转基因烟草的耐盐性。
- 张桦张富春张雨良张博陈全家
- 关键词：克隆耐盐性
- 海南蔗区甘蔗害虫发生情况及防治对策被引量：21
- 2010年
- 通过一年对海南甘蔗产区9个县(市)30个乡镇进行害虫调查,发现海南甘蔗害虫共有7目36科58种,其中蜚蠊目1科1种,等翅目1科1种,直翅目5科12种,缨翅目1科1种,半翅目11科14种,鞘翅目8科14种,鳞翅目9科15种。木蠹蛾、条螟、蔗根锯天牛、蔗根象、红尾白螟和异岐蔗蝗对海南甘蔗生产具有潜在威胁的害虫种类。总结了甘蔗苗期、生长中期及后期对各类害虫的防治对策,对指导海南蔗区甘蔗生产具有重要意义。
- 熊国如李增平冯翠莲蔡文伟王俊刚伍苏然杨本鹏王文治赵婷婷张雨良张树珍
- 关键词：甘蔗害虫
- 等位基因特异扩增在水稻香味遗传改良中的应用价值被引量：2
- 2014年
- 常规育种方法培育香型水稻除了育种年限长,且在后代材料选择过程中,香味基因往往容易丢失。而通过回交转育手段将香味性状导入优良的非香型水稻品种中,则要寻找出一种高效的分子检测手段加以辅助鉴定。本研究以稻花香2号、金禾香稻、南韩长粒香、黑香米,以及8个非香稻品种(品系)为试验材料,利用等位基因特异扩增方法对水稻香味基因进行鉴定。结果表明,南韩长粒香、黑香米及非香稻获得长度为585bp和355bp的两条带,而稻花香2号、金禾香稻仅获得长度为577bp的一条带,供试材料的分子检测结果与香味基因型不完全一致,这在一定程度上限制了等位基因特异扩增法在水稻香味遗传改良中的应用。
- 李洪亮柴永山张雨良孙玉友魏才强解忠张巍巍赵云彤
- 关键词：水稻香味基因
- 甘蔗黄叶病毒实时荧光RT-PCR检测体系研究
- 甘蔗黄叶综合症(yellow leaf syndrome,YLS后称甘蔗黄叶病)是由甘蔗黄叶病毒(sugarcaneyellow leaf virus,ScYLV)引起的一种重要的甘蔗病害,为更快、更准确的检测ScYLV...
- 王洪星龚殿张雨良王健华刘志昕
- 关键词：甘蔗聚合酶链式反应
- 文献传递
