张静茹
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 供职机构:广西大学化学化工学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 一种康氏木霉内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质被引量:2
- 2015年
- 为获得康氏木霉(Trichodermakoningii)内切β-葡聚糖苷酶组分,并研究其酶学性质,通过硫酸铵盐析、DEAE Sepharose FF阴离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析对康氏木霉GIMP3.444纤维素酶主要组分进行分离纯化,SDS-PAGE电泳检测蛋白质纯度和分子量,MALDI-TOFMS鉴定蛋白质种类。结果显示,从康氏木霉所产的纤维素酶系中分离纯化获得一种内切β-葡聚糖苷酶组分,相对分子质量为44 600,酶的比活力为19.65 U/mg。该内切酶的最适反应p H值为4.5,最适反应温度为55℃。以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为底物时,酶的米氏常数(Km)为7.22 mg/ml。不同金属离子对酶活性影响不同,其中Ca2+(0.3 mmol/L)对酶的抑制作用较强,抑制了近35%的活力。通过MALDI-TOFMS鉴定及数据库分析,确定该酶为一种新的内切β-葡聚糖苷酶组分。
- 叶锦张静茹覃益民刘幽燕
- 关键词:康氏木霉内切Β-葡聚糖苷酶分离纯化酶学性质
- 产纤维素酶辅助蛋白菌种筛选及蛋白增效作用条件研究被引量:1
- 2012年
- [目的]筛选产纤维素酶辅助蛋白的菌种,测定该辅助蛋白作用条件。[方法]从纤维素降解菌的生存环境中,寻找到产纤维素酶辅助蛋白的菌株,通过Sephadex-G75分子筛层析对产纤维素酶辅助蛋白菌株胞外培养液进行蛋白分离纯化,分析辅助蛋白的增效作用,并进一步探讨其增效作用适宜的温度及pH条件。[结果]从纤维素降解菌的生长环境中分离得到80余株菌株,经液体培养、胞外蛋白检测筛选出3株产纤维素酶辅助蛋白的菌株,分别命名为BAP1、BAP2、BAP3。经Sephadex-G75分子筛层析纯化,获得了最大增效率分别为35%,27%及47%的辅助蛋白。测定其中辅助增效作用最明显的BAP3峰2蛋白增效作用条件为温度40~60℃、pH 4.0~6.0。[结论]该研究为通过菌体诱变和培养条件优化等手段获得高效纤维素酶辅助蛋白提供了较好的原始菌株资源。
- 陶恒覃益民郑丽珍张静茹
- 关键词:纤维素酶
- 康氏木霉内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质
- 纤维素的资源化利用很大程度上取决于高效的纤维素酶,因此开展纤维素酶的分离纯化和酶学性质研究,对于促进纤维素的资源化利用具有重要意义。 本文是关于康氏木霉纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及其酶学性质的研究。通过硫...
- 张静茹
- 关键词:康氏木霉分离纯化酶学性质动力学模型
- 文献传递
- 康氏木霉内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质被引量:1
- 2015年
- 康氏木霉GIMP3.444经摇瓶发酵,获得分泌到胞外的纤维素酶,粗酶液经(NH4)2SO4分级沉淀、Sephacryl S200凝胶过滤层析、DEAE Sepharose FF离子交换层析及Octrl Separose CL-4B疏水层析分离纯化出一种内切型的β-葡聚糖苷酶,SDS-PAGE电泳鉴定为单一条带,BIO-RAD分析相对分子量为61.8 ku。该内切β-葡聚糖苷酶的最适反应温度为55℃,最适反应p H值为4.4,作用于羧甲基纤维素钠时,Lineweaver-Burk法求得Km、Vmax分别为4.81 mg/m L、2.48 mg/(min·m L)。
- 覃益民张静茹叶锦甘冠萍覃振央
- 关键词:康氏木霉内切Β-葡聚糖苷酶分离纯化酶学性质