朱春芳
- 作品数：21 被引量：54H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- LonP1表达与线粒体稳态以及精子活力的关联性研究被引量：3
- 2018年
- 目的探究线粒体lon蛋白水解酶(LonP1)对精子线粒体稳态的维持调节作用及其可能存在的调节机制。方法收集2016年6月至2017年6月于温州医科大学附属第一医院生殖中心进行精液常规检查的120名男性精液标本,根据精子活力分为正常活力精子(NS)和弱精子症精子(AS)两组,采用计算机辅助精液分析系统(CASA)检测各组精子运动参数,通过免疫荧光法和免疫蛋白印迹法检测精子中LonP1的蛋白表达水平,流式细胞术检测各组精子的线粒体膜电位强度(MMP,以绿色荧光强度/红色荧光强度比值表示,比值越小代表膜电位越高)和线粒体内活性氧(mROS)水平,比较两组各指标参数差异,并分析LonP1表达水平和精子活力及精子线粒体功能相关指标(MMP,mROS)的关联性。另外,NS组精液经密度梯度离心法处理后,沉淀精子加入培养液重悬,以LonP1功能抑制剂CDDO-ME 2.5μmoL/L和5μmol/L为终浓度进行体外培养,同时设置空白对照组(0μmol/L),比较各组精子运动参数、LonP1表达水平以及精子线粒体功能相关指标。结果 (1)人类成熟精子中存在LonP1的表达,且稳定表达于精子中段的线粒体鞘部;(2)NS组和AS组精子LonP1表达水平(0.52vs.0.22)与精子活力(69.89%vs.26.10%)、MMP(4.72%vs.12.73%)呈正相关(P<0.05),与mROS含量呈负相关(418.85vs.460.52)(P<0.05);(3)经LonP1功能抑制剂CDDO-ME处理后,与空白对照组比较,CDDO-ME药物处理组的LonP1蛋白表达水平随CDDO-ME作用浓度增加而显著降低(P<0.05),5μmol/L浓度组的MMP水平显著下降(78.81%vs.7.34%)、mROS含量增加(640.68vs.462.26),差异均有统计学意义(P<0.05);(4)CDDO-ME处理后,除精子活率(PR+NP)外,精子运动参数平均路径(VAP)和曲线速率(VSL)均随CDDO-ME作用浓度增加而下降(P<0.05),与空白对照组相比,5μmol/L浓度组的精子活力(PR)(52.08%vs.65.15%)、曲线速率(VCL)(48.28μm/s vs.78.78μm/s)、侧摆幅度(ALH)(1.28μm vs.1.93μm)、直线性(LIN)(38.83%v
- 张家燕王晓娜李金晶黄小圆朱春芳费前进葛红山
- 关键词：精子线粒体
- COH和IVM过程对卵母细胞线粒体的功能与分布的影响
- <正>过高的卵子损失率仍是当前人类辅助生殖技术(ART)所面临的最大问题。细胞质成熟是卵子正常受精和发育的关键,细胞质成熟不全或滞后于核的成熟被认为是ART周期卵子发育潜能低下的重要原因。在卵子成熟过程中,胞浆中线粒体发...
- 葛红山张帆陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 文献传递
- 第3天冷冻胚胎提前解冻培养至第5天移植的临床结局观察
- 目的 近年来,辅助生殖技术发展迅速,囊胚培养技术日趋成熟完善,由于囊胚通过了基因激活的步骤,具有较好的发育潜能,进行囊胚移植通常意味着较高的临床妊娠率.出于某种担心或历史原因,许多中心并未将所有的胚胎培养至囊胚进行移植或...
- 习海涛吕杰强葛红山陈华陈益鲁池海虹朱春芳
- 精子的氧化损伤与线粒体解偶联蛋白2(UCP2)表达的关联性被引量：3
- 2017年
- 目的通过研究过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)处理对精子活性氧的(reactive oxygen species,ROS)产生,精子运动参数,精子DNA碎片化程度及UCP2蛋白表达的影响,探讨精子的氧化损伤与UCP2蛋白表达的相关性。方法采用密度梯度离心法处理精液,选取离心后的沉淀精子为研究对象,以终浓度分别为50μmol/L,100μmol/L和200μmol/L的过氧化氢处理精子~1H,同时设立对照组(0μmol/L)。流式细胞仪检测各组精子活性氧(ROS)含量;计算机辅助精液分析系统(CASA)分析各组精子运动参数;精子染色质结构分析试验(SCSA)检测精子DNA碎片化程度;Western blot法检测各组UCP2蛋白的表达情况。分析精子的氧化损伤与UCP2表达的关联性。结果随着过氧化氢作用浓度的增加,各处理组的ROS含量,DNA碎片化程度和UCP2蛋白的表达均存在增加,且与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);同时各处理组精子运动参数等均呈下降趋势,尤其是100μmol/L和200μmol/L组,除侧摆幅度参数外,其他参数与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论过氧化氢作用后对精子造成氧化损伤(ROS升高),导致精子运动参数下降和DNA碎片化程度增加,对应的UCP2蛋白表达的增加,证明精子的氧化损伤与UCP2蛋白的表达存在关联性,提示UCP2可能参与精子体内的抗氧化作用。
- 王晓娜朱春芳张家燕朱楠陈华张帆葛红山
- 关键词：精子过氧化氢
- 线粒体OXPHOS和DNA复制对卵子质量及发育潜能的影响
- <正>目的在卵子成熟过程中,胞浆线粒体发生了剧烈变化。而胞浆线粒体则与卵子的成熟、受精和发育潜能密切相关。但迄今对于线粒体是以何种机制影响卵子的质量和发育潜能的仍存在争议。有研究认为,线粒体的数量或DNA(mtDNA)拷...
- 葛红山张帆陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 文献传递
- 两种不同胚胎培养模式对体外胚胎发育和妊娠结局的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:比较2种胚胎培养模式对胚胎质量和妊娠结局的影响。方法:收集首次行IVF-ET治疗、年龄<38岁、采用长方案促排卵、常规IVF授精、正常受精卵数>3枚且第3日有新鲜胚胎移植的518个周期的临床资料,根据正常受精卵采用的培养模式分成单胚胎培养组(n=254)和胚胎群组培养组(n=264)。分析患者的基本资料、胚胎发育情况以及妊娠结局。结果:患者的年龄、不孕年限、基础卵泡刺激素(FSH)、Gn用量、h CG注射日内膜厚度以及各种不孕因素的比例等参数组间差异均无统计学意义(P>0.05);平均获卵数、成熟率、2PN率等指标组间也均无统计学差异(P>0.05),但胚胎群组培养组的卵裂率、第3日优质胚胎率、剩余胚胎可利用囊胚形成率均明显高于单胚胎培养组,差异有统计学意义(P<0.05);胚胎群组培养组的种植率和临床妊娠率高于单胚胎培养组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用胚胎群组培养模式可以得到更多的优质胚胎和更高的囊胚形成率,推荐可用于日常IVF治疗周期中的胚胎培养。
- 朱春芳葛红山陈华习海涛张帆黄检英吕杰强
- 关键词：胚胎质量
- 控制性超促排卵对小鼠卵母细胞线粒体数目和功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨控制性超促排卵（COH）对小鼠卵母细胞胞质内线粒体数目、分布、氧化磷酸化（OXPHOS）活性以及活性氧生成的影响,进而分析COH来源的卯母细胞高损失率的可能机制.方法 将实验小鼠随机分为COH组（20只）和对照组（40只）,采用实时定量PCR技术、免疫荧光和荧光素-荧光素酶反应发光法分别检测两组小鼠卵母细胞线粒体DNA （mtDNA）拷贝数、线粒体膜电位（△Ψm）强度、三磷酸腺苷（ATP）含量、线粒体分布和胞质内活性氧水平.结果 卵母细胞mtDNA平均拷贝数对照组为（2.16±0.19）× 105,COH组（1.15±0.10） ×105,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;COH组卵母细胞的平均△Ψm强度和ATP平均含量分别为0.34±0.03和（241±20）fmol/枚,对照组分别为0.82±0.07和（325±11） fmol/枚,两组分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.两组间线粒体呈均匀分布的卵母细胞比率[COH组76.5％（78/102）、对照组82.1％（69/84）]比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.卵母细胞胞质内活性氧水平COH组为1.07±0.07,对照组为0.93±0.08,两组比较,差异也无统计学意义（P＞0.05）.结论 非生理性的COH过程抑制了卵母细胞线粒体DNA复制和OXPHOS活性,继而可能影响卵母细胞细胞质的成熟进程,这可能是COH周期卵母细胞高损失率的发生机制.
- 葛红山张帆李晓和陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 关键词：排卵诱导卵母细胞氧化磷酸化活性氧
- 线粒体能量代谢和DNA复制对小鼠卵子体外成熟、受精及发育的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨胞质线粒体的氧化磷酸化(OXPHOS)活性或线粒体DNA复制在卵子成熟、受精和胚胎发育过程中的作用。方法通过在小鼠体外成熟培养液中引入不同浓度的羰基氰4-(三氟甲氧基)苯腙(FCCP,10 nmol/L和100nmol/L)或2',3'-双脱氧胞苷(ddC,10μmol/L和100μmol/L),抑制线粒体OXPHOS活性或线粒体DNA复制,统计分析各组卵子的体外生发泡破裂(GVBD)率、核成熟率、受精率及囊胚形成率,以分析线粒体功能抑制对卵子成熟、受精和胚胎发育的影响。结果线粒体OXPHOS活性和DNA复制功能在卵子和胚胎中所发挥的作用并不完全相同。FCCP抑制线粒体OXPHOS活性可显著降低卵子的核成熟率和囊胚形成率;但对卵子的GVBD的发生率和受精率无显著影响。而ddC抑制线粒体DNA复制不影响卵子的体外成熟和受精,但可显著抑制囊胚的形成。结论 OXPHOS活性主要影响卵子成熟及胚胎发育;线粒体DNA复制则主要影响胚胎发育;而线粒体功能抑制不影响卵子的成熟启动和体外受精。
- 葛红山李晓和张帆陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 关键词：线粒体能量代谢发育潜能
- 卵子体外成熟对胞质线粒体DNA拷贝和功能的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究卵子体外成熟(IVM)过程对胞质内线粒体的数目、功能及卵子质量的影响,进而探讨IVM卵子低发育潜能的可能机制。方法实验小鼠随机分为IVM组和体内成熟(IVO)组;应用Real-time-PCR、免疫荧光和荧光-荧光素酶测定法,分别检测IVM和IVO来源卵子的线粒体DNA(mtDNA)拷贝数、线粒体膜电位强度、ATP含量、线粒体分布、胞质ROS水平、卵子骨架和染色体结构。结果相对于IVO卵子,IVM卵子的mtDNA拷贝数显著降低;而胞质ROS生成和纺锤体及染色体结构异常率则显著增加。胞质线粒体分布模型和氧化磷酸化活性在IVM和IVO卵子间差异无显著意义。结论非生理性IVM过程显著抑制了胞质mtDNA的复制,并增加了ROS生成和纺锤体和染色体结构异常,继而可能影响卵子细胞质的成熟进程,这可部分解释IVM卵子低发育潜能的机制。
- 葛红山李晓和张帆陈华习海涛黄检英朱春芳吕杰强
- 关键词：卵子线粒体细胞骨架体外成熟免疫荧光
- 卵巢过度刺激综合征患者全胚冷冻后首次冻融移植的临床结局分析
- [目的]探讨卵巢过度刺激综合征患者全胚冷冻后首次冻融移植周期行D3卵裂胚与D5囊胚的临床结局分析。[方法]2012年5月至2013年3月在温州医科大学附属第二医院生殖中心行IVF/ICSI治疗因卵巢过度刺激行全胚冷冻的患...
- 陈华葛红山习海涛朱春芳黄检英张帆吕杰强
- 文献传递
