李金丽 作品数:21 被引量:67 H指数:5 供职机构: 武汉市第一医院 更多>> 发文基金: 湖南省卫生厅资助项目 湖南省自然科学基金 武汉市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
IGF-Ⅱ促进多囊卵巢综合症大鼠模型的卵泡发育的作用研究 刘莉 李金丽 邓小艳 肖庆Daxx研究进展 被引量:3 2006年 Daxx(death dom ain assoc iated prote in)是一种多功能的核蛋白,能与Fas死亡结构域结合,激活Jun氨基端激酶通路诱导细胞凋亡。Daxx也具有抗凋亡作用。Daxx与细胞内的转录因子和转录相关蛋白结合,发挥转录调控的作用。Daxx与多种病毒蛋白相互作用,调节病毒的复制周期和感染性。 李金丽 万艳平关键词:细胞凋亡 转录调控 HBVpreS2真核载体的构建及其表达 2006年 目的扩增乙型肝炎病毒(HBV)前S2基因(preS2),并构建其真核表达载体,为研究HBV树突状细胞疫苗奠定实验基础。方法从慢性乙型肝炎患者血清中提取HBVDNA,用聚合酶链反应技术扩增全长preS2基因,将其克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,经PCR、酶切和DNA测序鉴定筛选阳性克隆,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-preS2,并将其转染巨噬细胞48h后,ELISA检测细胞裂解液中preS2的表达。结果从慢性乙型肝炎患者血清抽提的DNA中扩增得到约860bp大小的目的片段,preS2基因片段正确插入pcDNA3.1(+)载体,得到HBVpreS2真核表达载体pcDNA3.1(+)-pre2。结论成功地构建了含preS2基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-preS2,并能在巨噬细胞中表达目的蛋白HBVpreS2。 陈熙 李金丽 王鑫 张明 詹利生 万艳平乙型肝炎病毒X蛋白与hDaxx相互作用及对HepG2细胞凋亡的影响 目的:应用酵母双杂交法检测乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)与hDaxx的相互作用,并初步探讨其相互作用后对细胞凋亡的影响,为进一步研究HBx在HBV慢性感染致癌机制中的作用提供一定的实验依据。
方法:
... 李金丽关键词:乙型肝炎病毒 X蛋白 HEPG2细胞 细胞凋亡 致癌机制 慢性感染 文献传递 hDaxx与乙型肝炎病毒X蛋白的相互作用 被引量:1 2008年 目的采用酵母双杂交法研究HBVX蛋白与hDaxx蛋白的相互作用,为探讨HBVX蛋白的致癌机制奠定实验基础。方法构建pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBX重组质粒,分四组转化酵母AHl09,A组为pGADT7和pGBKT7,B组为pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBX,C组为pGADT7-T和pG-BKT7-Lam,D组为pGADT7-T和pGBKT7-p53。将转化菌落接种于SD/-Tip-ku(二缺)固体平板,长出克隆后再接种于SD/-Tip-Leu-His(三缺)和SD/-Tip-Leu-His-Ade(四缺)平板,30℃培养36~72h。裂解酵母菌,提取蛋白,经SDS-PAGE、Western blot检测hDaxx和X蛋白在酵母中的表达。结果仅有共转化pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBx的AHl09可以在三缺及四缺平板上生长。Western blot检测到hDaxx和X蛋白均能在酵母中表达。结论HBV X蛋白与hDaxx能在酵母细胞内发生相互作用。 周艺 李金丽 万艳平关键词:HDAXX 乙型肝炎病毒X蛋白 酵母双杂交 HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响 被引量:1 2008年 目的:研究HPV16 E6(human papillomavirus type16 E6)蛋白与hDaxx(human death domain associated protein)的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响,为探索HPV16 E6蛋白的致癌机制提供实验依据。方法:构建pGADT7-E6和pGBKT7-hDaxx重组载体,利用酵母双杂交系统检测HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用,并用Western印迹法检测二者在酵母菌中的表达。将E6与hDaxx的真核表达载体共转染HeLa细胞,用5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡,FCM法检测凋亡率。结果:E6蛋白与hDaxx在细胞内存在相互作用。共转染pcDNA3.1(-)/E6和pcDNA3.1(-)/hDaxx的HeLa细胞,随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加凋亡率上升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HPV16 E6蛋白与hDaxx在细胞内相互作用,hDaxx过表达可提高表达E6蛋白的HeLa细胞对5-FU的敏感性,且这种关系存在剂量依赖性。E6蛋白可能通过和hDaxx的相互作用抑制细胞凋亡。 王鑫 朱翠明 刘安元 尹卫国 李金丽 蔡恒玲 万艳平关键词:HELA细胞 双杂交系统技术 细胞凋亡 多囊卵巢综合症大鼠血清性激素、卵巢形态及卵巢组织中IGF-1、IGF-2的表达情况 刘莉 熊露 胡雅君 李金丽Glycodelin-A与IVF-ET的子宫内膜容受性及妊娠结局的关系 被引量:5 2021年 目的探讨Glycodelin-A表达与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的子宫内膜容受性及妊娠结局的关系。方法回顾性选择2016年8月至2018年1月武汉市第一医院生殖医学中心接诊的拟行IVF-ET治疗患者71例,分析人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)日抽血检测性激素[黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和孕酮(P)]和Glycodelin-A,经阴道超声检查子宫内膜厚度,分析不同子宫内膜厚度组Glycodelin-A、LH、E2和P,根据妊娠结局分为妊娠组(31例)和非妊娠组(40例),对比两组患者Glycodelin-A、LH、E2和P。分析Glycodelin-A与宫内膜厚度、性激素及妊娠结局的关系。结果血清Glycodelin-A和E2水平随着子宫内膜厚度的增加而增加(P<0.05),妊娠组血清Glycodelin-A和E2高于非妊娠组(P<0.05),LH、P在不同子宫内膜厚度和不同妊娠结局组差异均无统计学意义(P>0.05)。Glycodelin-A与子宫内膜厚度、E2和临床妊娠呈正相关(r=0.405、0.269和0.596,P<0.05),与LH、P无关(r=0.131、0.191,P>0.05)。结论Glycodelin-A与IVF-ET周期的子宫内膜厚度和妊娠结局均存在密切关系,可作为IVF-ET周期的子宫内膜厚度监测,IVF-E妊娠结局预测的有效指标。 邓小艳 刘莉 李金丽 胡雅君关键词:体外受精-胚胎移植 子宫内膜容受性 乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建及表达 被引量:3 2006年 目的构建含乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因的真核表达载体,为探讨HBV X基因与慢性乙型肝炎及肝癌发生的关系提供实验依据。方法用PCR方法扩增含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的X基因序列,对pcDNA3.1(+)载体及X基因PCR产物双酶切,用连接酶将两者连接并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定,构建HBV X基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx。用梭华-SofastTM基因转染试剂将其质粒转染THP-1巨噬细胞,细胞裂解液经SDS-PAGE及转硝酸纤维素膜后做Western blotting,鉴定目的蛋白。结果双酶切pcDNA3.1(+)-HBx后,琼脂糖电泳可分别见到大小约为5.4 kb和465 bp片断,说明X亚克隆入pcDNA3.1(+),经序列测定其含有完整的X基因片段;Western blotting结果显示pcDNA3.1(+)-HBx能在THP-1巨噬细胞中表达X蛋白。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx,并能在THP-1巨噬细胞中表达X蛋白。 王静 蒋永林 李金丽 蔡恒玲 万艳平关键词:X基因 X蛋白 真核表达 慢性阻塞性肺疾病患者血清中MFG-E8的检测及意义 目的检测慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructirepulmonary disease,COPD)患者血清中的乳脂管表皮生长因子Ⅷ(milk fat globule EGF factorⅧ,MFG-E8)浓度... 崔天盆 李金丽 郑承红