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杨侠: 作品数：34 被引量：68H指数：4; 供职机构：山东省眼科研究所更多>>; 发文基金：山东省自然科学基金国家高技术研究发展计划青岛市科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>

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膜联蛋白A2在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制被引量：1: 2013年; 目的探讨膜联蛋白A2（ANXA2）在小鼠视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制。方法实验研究。将C57BL/6J小鼠分为4组：正常组（80只）、氧诱导视网膜病变（OIR）空白对照组（80只）、OIR阴性干扰组（50只）和OIR阳性干扰组（50只）。采用视网膜铺片法对比观察氧诱导视网膜新生血管形态学变化。实时荧光（real-time）PCR法检测正常组和OIR空白对照组12-30日龄小鼠视网膜组织中ANXA2mRNA的表达变化。取4组中17日龄小鼠视网膜行视网膜铺片。应用real-timePCR法及免疫印迹法检测4组17日龄小鼠视网膜组织中ANXA2、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9和组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）的mRNA和蛋白表达情况。应用单因素方差分析对4组结果进行比较，进一步的两两比较采用SNK-q检验。结果4组17日龄小鼠视网膜铺片结果发现，与正常组相比，OIR空白对照组视网膜新生血管迂曲、扩张，分布紊乱，渗漏严重，血管分层不清，大量异常交通支。ANXA2基因干扰后，OIR阳性干扰组视网膜新生血管迂曲现象减轻，血管渗漏较少，微血管瘤及新生血管芽数量减少，视网膜层次较明显，新生血管的危害减轻。不同日龄小鼠视网膜中ANXA2基因表达水平与新生血管生长密切相关，呈现出视网膜血管发育旺盛期高表达，而血管发育停滞期低表达的趋势。real-timePCR法检测结果显示，4组小鼠视网膜中ANXA2、VEGF-OL、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA表达水平的差异均有统计学意义（F=8．122-74．009，P值均〈0．05）。进一步两两比较结果显示，OIR空白对照组的VEGF-α（0．22±0．04）、MMP-2（11．08±1．28）、MMP-9（4．64±0．38）的基因表达水平较正常组（0．16±0．02、2．18±1．39、1．17±0．25）显著上调（SNK-q检验：P值均〈0．01），而OIR阳性干扰组的VEGF-α（0．02±0．01）、MMP; 王猛杨侠董晓光; 关键词：视网膜新生血管化膜联蛋白A2 血管内皮生长因子A 基质金属蛋白酶类

膜联蛋白A2在糖基化终末产物诱导的内皮细胞骨架重构及迁移中的作用初探: 毕超杨侠董晓光

高糖诱导人脐静脉内皮细胞中玻连蛋白的表达和细胞骨架重塑: 2012年; 目的观察高糖培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中玻连蛋白(vitronectin,VN)表达的变化、细胞微丝骨架的改变以及细胞迁移能力、成管能力的变化。方法建立高糖培养的HUVEC体外模型,并常规培养HUVEC作为正常对照,Western blot方法检测VN蛋白的表达,免疫荧光细胞化学法观察HUVEC中微丝骨架F-actin的变化,划痕法检测HUVEC迁移能力的改变,Matrigel法检测HUVEC的成管能力。结果培养24h时,正常组和高糖组中VN蛋白表达量分别为0.893±0.119、1.295±0.080,48h时分别为0.874±0.115、1.724±0.098,差异均有统计学意义(t=-4.857、-9.710,均为P<0.05)。免疫荧光细胞化学结果显示培养24h、48h时高糖组中都伴有更加明显的细胞微丝骨架结构改变。划痕法检测培养24h时正常组和高糖组中迁移到划痕内的细胞数分别为(198.000±15.880)个、(242.000±11.130)个,48h时分别为(293.000±8.681)个、(334.000±10.863)个,差异均有统计学意义(t=-5.495、-7.193,均为P<0.05)。Matrigel法发现培养6h时高糖组中形成的闭合管腔数目(120.000±9.813)个多于正常组(91.000±9.867)个,12h时形成的闭合管腔数目(19.000±3.209)个也多于正常组(8.000±3.011)个,差异均有统计学意义(t=-5.163、-5.659,均为P<0.05)。结论 VN可能在糖尿病视网膜病变中起一定作用,且VN功能的发挥可能涉及到细胞骨架重塑,但需要进一步干扰VN的表达以证实其作用。; 王玉风杨侠董晓光; 关键词：高糖人脐静脉内皮细胞细胞骨架细胞迁移

特发性黄斑裂孔手术前后OCT分析: 目的:对比研究特发性黄斑裂孔(IMH)手术前、后黄斑区视网膜形态的变化及相关性,指导预后。方法:选取2004 年4月至2005年11月特发性黄斑裂孔31例共33眼,年龄 60岁至73岁,(3ass分期为Ⅲ、Ⅳ期,均行玻璃...; 杨侠董晓光; 文献传递

视网膜盖膜与特发性黄斑裂孔手术预后: 目的:探讨特发性黄斑裂孔(IMH)中视网膜盖膜的存在与视力预后的关系。方法:选取2004年4月至2005年11月特发性黄斑裂孔42例共44眼,年龄60岁至73岁,Gass分期为Ⅲ、Ⅳ期,均行玻璃体切除联合内界膜剥除术,术...; 杨侠董晓光; 文献传递

低氧对小鼠RGC-5细胞中膜联蛋白A2表达的抑制作用: 2015年; 背景研究已证实，缺氧是诱导视网膜新生血管形成的主要因素，与多种眼科病变的发生有关，且低氧与视网膜神经节细胞（RGCs）的变性也密切关联，但对视网膜神经组织病变的研究较少。目的观察低氧对RGCs中ANXA2表达的影响，探讨低氧对RGCs的损伤机制。方法用含体积分数10％胎牛血清的高糖培养液对小鼠RGC-5细胞株进行培养，采用免疫荧光技术检测RGCs特异表面抗原Thy-1的表达。分别采用含CoCl2终质量浓度为50、100、200、300μmol／L的培养液培养RGC-5细胞，并分别于培养后12、24、48h采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞吸光度（A）值，以不含CoCl2培养液培养RGC-5细胞作为正常对照。以含终浓度为100μmol／LCoCl2培养液培养RGC-5细胞以建立低氧细胞模型，将模型细胞分为低氧3h组、低氧6h组、低氧12h组、低氧24h组，正常培养的细胞作为正常对照组。各组细胞行Hoeehst 33342荧光染色，观察RGC-5细胞核形态的变化；采用实时定量逆转录PCR检测各组细胞中ANXA2 mRNA的相对表达量；采用Western blot法检测细胞中ANXA2蛋白的相对表达量；采用免疫荧光法观察ANXA2在细胞中表达的分布。结果体外培养的RGC-5细胞呈梭形或多边形，Thy-1反应阳性。与正常对照组比较，50和100μmol／LCoCl2组各时间点细胞A值的差异均无统计学意义（均P〉0．05）；200和300μmol／L CoCl2组各时间点细胞A值均明显低于正常对照组，差异有统计学意义（均P〈0．05）。正常对照组细胞核Hoeehst 33342染色未见致密的亮蓝色荧光，低氧3h组、低氧6h组、低氧12组和低氧24组细胞核内均可见致密的亮蓝色强荧光。低氧3h组、低氧6h组、低氧12h组和低氧24h组RGC-5细胞中ANXA2 mRNA的相对表达量分别为0．80±0．14、0．67±0．33、0．49±0．17、0．39±0．02，均明显低于正常对照组，总体比较差异有统计学意义（F=434．354�; 闫琳杨侠王龙梅董晓光徐海峰; 关键词：膜联蛋白A2 视网膜神经节细胞