王丽华
- 作品数：10 被引量：59H指数：5
- 供职机构：华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程电子电信化学工程更多>>
- 广东地区鱼源大肠埃希菌ESBLs和PMQR流行分布调查被引量：7
- 2012年
- 从广东地区食用鱼肠道分离鉴定了218株大肠埃希菌,用琼脂稀释法测定218株大肠埃希菌对17种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法调查ESBLs和PMQR基因的流行分布情况.对10株β-内酰胺酶(包括ESBLs)和/或PMQR阳性菌株进行了接合转移试验,探讨ESBLs和PMQR基因的传播机制.敏感性测定结果显示:218株大肠埃希菌对17种抗菌药物的耐药率为0.5%～72.5%.在112株氨苄西林耐药菌株中,检测出2种ESBLs基因,分别为blaCTX-M-79和blaCTX-M-14,2株菌中还检测到β-内酰胺酶基因blaLEN-4和blaLEN-17.在80株环丙沙星耐药菌株中,检测到59株为PMQR阳性,分别为qnrB(33株),qnrD(5株),qnrS(21株),aac(6')-Ib-cr(6株).接合转移试验结果表明,ESBLs和/或PMQR基因可同时存在于一个质粒上进行转移.
- 汤电张小华付晓平王丽华郭玉芳李健纪雪薇蒋红霞
- 关键词：耐药性ESBLSPMQR
- 食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变被引量：5
- 2012年
- 从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株blaCTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细菌的亲缘关系;通过接合转移试验、复制子分型和blaCTX-M-14上下游插入元件的检测,分析产CTX-M-14大肠杆菌的传播分子机制。PCR检测结果表明,16株食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌大多属于系统发育组A组,其次为B1和D组,没有B2组;PFGE分型结果表明,同一时间内不同动物间存在产CTX-M-14共生型大肠杆菌克隆的扩散传播,但养殖场内CTX-M-14主要是随质粒或其他元件进行水平传播;质粒复制子分型结果表明,携带blaCTX-M-14的质粒属于IncK(3/14)、IncF(5/14)、IncHI2(1/14)、IncFIB和IncF(1/14)、IncHI1和IncN(2/14)、IncI1(2/14)等,且随着时间推移,复制子的种类呈增多趋势。2002-2007年的菌株blaCTX-M基因的上下游均检测到ISEcp1和IS903;但2009年菌株除了部分在上下游都可以检测到ISEcp1和IS903外,还有的只检测到上游的ISEcp1或下游的IS903;2002-2009年的菌均未检测到ISCR1。16株产CTX-M-14大肠杆菌除了携带其他ESBLs编码基因,如blaCTX-M79和blaTEM-135外,还携带其他重要抗生素耐药基因,如oqxA、floR、aac(6′)-1b-cr及rmtB,而且2002-2009年大肠杆菌携带耐药基因的种类和数量逐年增多;接合转移试验发现,2002-2005年的菌株,blaCTX-M-14往往发生单独转移,而2009年分离菌blaCTX-M-14往往和floR或rmtB位于同一质粒上发生共同转移。这说明养殖场使用氨基糖苷类或氟苯尼考等任何一种抗生素,都可以筛选出产CTX-M-14大肠杆菌并促进其扩散,所以动物养殖过程中要慎用这些抗生素。
- 甄盼盼汤电任艳娜郭玉芳王丽华裘宗平蒋红霞
- 关键词：CTX-M-14
- 2002和2009年食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制比较
- 【目的】通过比较和分析2002年和2009年产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的特点,推测产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变趋势,进而为bla传播机制及其变化规律的研究提供参考。【方法】从本实验室保存的20...
- 郭玉芳甄盼盼汤电王丽华付晓平任君玉张文慧刘志杰赵秋云蒋红霞
- 关键词：CTX-M-14复制子
- 文献传递
- 广东地区患病食品动物源大肠杆菌ESBLs和AmpC酶流行分布调查被引量：19
- 2012年
- 质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶广泛传播和扩散,导致全球范围内肠杆菌科细菌对超广谱头孢菌素类的耐药性发展迅速,引起人们高度重视。食品动物源大肠杆菌可作为耐药基因储库,对细菌耐药性在动物、环境和人之间的传播起着非常重要的作用。本研究从2009年患病的食品动物,包括鸡、鸭、鹅和猪,分离鉴定了315株大肠杆菌,调查ESBLs和AmpC酶在患病食品动物中的流行分布。经双纸片协同扩散实验筛选出61株ESBL阳性菌株,PCR检测共检测出8种blaCTX-M基因,分别为blaCTX-M-14/14b、blaCTX-M-79、blaCTX-M-65、blaCTX-M-27、blaCTX-M-15、blaCTX-M-24、blaCTX-M-98和blaCTX-M-13,其中检出率最高的为blaCTX-M-79,其次为blaCTX-M-14/14b。本研究还检测出1株新的SHV型酶,命名为SHV-135;PCR共检测出5株大肠杆菌携带质粒源CMY-型AmpC酶,其中2株鹅源大肠杆菌携带1个新型CMY酶,命名为CMY-64。本研究表明患病动物分离的大肠杆菌中ESBLs和AmpC酶存在复杂性和多样性,而且新型β-内酰胺酶检出日益增多,提示兽医临床应慎用β-内酰胺类抗生素。
- 汤电张浩吉纪雪薇刘继郭玉芳王丽华付晓平张小华孙永学蒋红霞
- 关键词：耐药性ESBLSAMPC酶质粒
- 食品动物源大肠杆菌多重耐药性监测被引量：12
- 2011年
- 为掌握畜禽源大肠杆菌的耐药情况,了解其对各种抗菌药物的敏感程度,自广东地区临床分离鉴定出294株食品动物源大肠杆菌,采用琼脂稀释法测定294株大肠杆菌对14种抗菌药物的敏感性。结果显示,食品动物源大肠杆菌对各抗菌药的敏感性不同,且多重耐药现象较严重;受试大肠杆菌对四环素和复方新诺明的耐药率较高,均达到80%以上;对第3代头孢菌素类耐药率相对较低。
- 汤电郭玉芳王丽华付晓平张小华纪雪薇周云雷刘继蒋红霞
- 关键词：大肠杆菌多重耐药性耐药率
- 动物源金黄色葡萄球菌耐氟喹诺酮类药物分子特征调查
- 目的了解喹诺酮耐药决定区(Quinolone-resistance determining region,QRDR)突变和质粒介导的喹诺酮类(PMQR)耐药基因对氟喹诺酮类耐药金黄色葡萄球菌耐药表型的影响,追根溯源,预防...
- 王丽华褚福鑫张荟蒋红霞
- 关键词：GYRA突变MLST
- 2002和2009年食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制比较
- [目的]通过比较和分析2002年和2009年产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的特点,推测产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变趋势,进而为blaCTX-M-(H)传播机制及其变化规律的研究提供参考.
- 郭玉芳蒋红霞甄盼盼汤电王丽华付晓平任君玉张文慧刘志杰赵秋云
- 关键词：CTX-M-14复制子
- 文献传递
- 广东省动物源沙门菌PMQR和ESBLs基因流行分布调查
- 目的检测分离自广东省散养型养殖场的动物源沙门菌(猪、鸡、鸭)中质粒介导喹诺酮类耐药基因(PMQR)和超广谱β-内酰胺酶基因(ESBLs)的流行情况。方法采用沙门菌专用培养基(胆硫乳琼脂、亚硫酸铋琼脂)和分子生物学方法(i...
- 任君玉付晓平郭玉芳王丽华蒋红霞
- 关键词：沙门菌PMQRESBLS耐药基因
- 质粒介导的喹诺酮耐药基因在动物源金黄色葡萄球菌的流行分布被引量：13
- 2014年
- 为了解广东省动物源金黄色葡萄球菌耐药现状、分析耐喹诺酮类金黄色葡萄球菌耐药分子特征,本研究从2010—2011年广东33个养殖场的不同动物来源的样本中分离鉴定出46株金黄色葡萄球菌,采用二倍琼脂稀释法测定对14种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链式反应（PCR）检测耐喹诺酮金黄色葡萄球菌grlA、grlB、gyrA、gyrB基因在喹诺酮耐药决定区（QRDR）的突变特征、质粒介导喹诺酮类耐药（PMQR）基因（qnr、aac6′-Ib-cr、oqxA和qepA）的流行分布特征,同时还检测了β-内酰胺酶编码基因（blaCTX-M、blaCMY和blaSHV）、质粒介导金黄色葡萄球菌耐氟苯尼考的基因（cfr和fexA）和万古霉素耐药基因（vanA、vanB和vanC）。结果表明,46株金黄色葡萄球菌对克林霉素耐药率最高为67%,对环丙沙星和氟苯尼考耐药率为52%,对青霉素、氨苄西林、庆大霉素、红霉素、四环素和复方新诺明的耐药率在40%-50%之间,对苯唑西林和氯霉素耐药率为28%,对妥布霉素耐药率为13%,对头孢噻肟的耐药率在10%左右,有2株耐万古霉素。20株耐环丙沙星金黄色葡萄球菌的grlA和gyrA基因的QRDR发生了碱基突变并导致编码的氨基酸发生改变,GrlA氨基酸只有1种突变模式,Ser80→Phe,而GyrA氨基酸存在3种突变模式：Ser84→Leu,Ala或Phe。PMQR基因中,oqxA检出率最高（80%）,其次是aac6′-Ib-cr占13%,qnrS1检出3株、qnrD检出2株。检测到2株菌株携带超广谱β-内酰胺酶编码基因blaSHV-12;23株氟苯尼考耐药菌株全部携带fexA基因,其中3株同时携带cfr基因;2株耐万古霉素菌株未检测到相关耐药基因。广东省动物源金黄色葡萄球菌多重耐药现象较为普遍,本研究首次在动物源金黄色葡萄球菌中检测到超广谱质粒编码的喹诺酮耐药基因流行分布广泛,大多数菌株同时携带2种以上质粒编码的耐药基因,提示养殖过程或治疗过程中使用任何一种药物（尤�
- 王丽华吕殿红张荟杨彪魏文康蒋红霞
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性PMQR
- 喹诺酮类耐药决定区、外排泵负调控基因对大肠杆菌氟喹诺酮高水平耐药分子机制的影响被引量：6
- 2012年
- 为了探讨耐喹诺酮类决定区(QRDR)、外排泵负调控基因(acrR、marR和soxR)突变对临床分离株氟喹诺酮(FQs)高水平耐药的影响,本研究对临床分离的18株FQs耐药大肠杆菌(E.coli),采用PCR方法检测QRDR、acrR、marR和soxR的突变情况;通过RT-PCR的方法检测外排泵及膜孔蛋白相关基因的表达水平。结果显示,QRDR的突变主要集中在常规突变GyrA(Ser83Leu和Asp87Asn)和ParC(Ser80Ile),同时也检测出稀有突变ParC Glu84Gly、Glu84Lys、Glu84Val和Glu84Ala,ParE Ser458Ala等。ED28在acrR基因存在777bp插入序列;12株菌(包括ATCC25922)在MarR存在Gly103Ser和Tyr137His双突变,其中EP26和EG42存在插入片段;ED40在SoxR存在Thr38Ser、Gly74Arg氨基酸替换。在多突变药菌株中,AcrAB的表达水平明显升高,OmpC和OmpF表达量降低、甚至缺失。
- 任艳娜甄盼盼李健郭玉芳王丽华任君玉张文慧蒋红霞
- 关键词：MARR耐药氟喹诺酮
