王仑山 作品数:41 被引量:407 H指数:14 供职机构: 兰州大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省自然科学基金 博士后科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
白兰瓜组织培养中染色体不稳定性的研究 被引量:1 1989年 白兰瓜体细胞染色体数为2n=2x=24.其子叶经诱导、活化、脱分化,分化形成了再生植株.对这一全过程进行了细胞学观察,结果表明:(1)外植体:2n=24的细胞达90%以上,有6.5%的多倍体;(2)诱导期:切口处大量细胞被启动,出现各种类型的无丝分裂;(3)脱分化期:细胞分裂活跃形成大量的愈伤组织,并伴随着各种类型的染色体数目和结构的变异,这时期畸变率达到最高峰;(4)分化期:愈伤组织上分化形成大量绿色芽点,其中正常二倍体细胞的比例明显增加,畸变率降低;(5)再生植株:二倍体细胞已接近80%,但存在17.5%的多倍体细胞. 王亚馥 高清祥 王仑山 刘彩云 杨汉民 吴大康 张勤关键词:白兰瓜 染色体 外植体 小麦耐盐变异体的筛选——Ⅰ.小麦体细胞胚性无性系的建立 被引量:6 1993年 利用春小麦11个品种,通过幼穗和幼胚离体培养,研究了基因型,外植体和培养基成分对愈伤组织诱导率和分化率的影响.结果表明,不同基因型的愈伤组织诱导率和分化率差异明显.幼穗长度以10~14mm 时接种为宜,幼胚以开花后11~14d 接种效果最好.诱导培养基的效果以 MB>MS>N_6>LS,2,4-D 以2mg/L 较为合适,不宜加6BA 和 NAA,但加适量甘氨酸和谷氨酰胺有利于愈伤组织的诱导.分化培养基中加少量6BA 和 NAA 是必要的,而且 ZT 的作用优于 KT.通过以上研究,从中筛选出了3个能长期保持较高再生植株潜力的体细胞胚性无性系. 王仑山 高清祥 王亚馥 张国柱关键词:小麦 无性系 育种 植物体细胞胚发生的同步控制──Ⅰ枸杞细胞悬浮培养系的建立 被引量:16 1994年 以枸杞幼茎和叶片为外植体,诱导出胚性愈伤组织。经振荡悬浮培养、过筛、分离得到单细胞和细胞聚集体悬浮液;适当降低大量元素浓度有利于细胞生长。生长曲线表明,悬浮培养第5天和第8天的细胞曲线较平缓且生长良好,可用于体细胞胚的同步化控制研究。 张国柱 王仑山 潘有福 赵力宏 孙玉 王亚馥关键词:枸杞 体细胞胚发生 同步控制 伊贝母组织培养中体细胞胚的形成及细胞组织学观察 被引量:26 1989年 伊贝母(Fritittariae pattidiftorae)鳞茎切块培养在附加NAA1.0毫克/升+KT0.5毫克/升或NAA1.0毫克/升+6—BA2.0毫克/升的MS培养基上可诱导产生胚性愈伤组织。经0—4℃低温处理4周转移到附加IAA0.1毫克/升+KT0.5毫克/升的MS培养基上30天后,通过体细胞胚途径形成了再生植株。在胚性愈伤组织分化过程中进行细胞组织学观察,发现了从单个胚性细胞到完整体细胞胚发育的各个阶段,说明伊贝母体细胞胚来源于单个胚性细胞。再生植株的根尖压片表明染色体数稳定为2n=2x=24, 王仑山 杨汉民 王亚馥 康文隽 贾廷跃关键词:伊贝母 愈伤组织 体细胞胚 多胺对宁夏枸杞愈伤组织器官发生和体细胞胚发生的影响 被引量:11 2001年 利用已建立的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)愈伤组织器官发生和体细胞胚发生体系,对多胺在其离体形态发生中的作用进行研究。通过检测内源多胺含量发现,在所研究的三种多胺中,Put是器官发生途径的主要多胺,而在体细胞胚发生途径Spd含量占优势。Put含量变化在两条途径中相似:在愈伤组织分化的早期迅速积累不久又下降,随着芽原基和球形胚的形成含量又进一步上升。器官发生中Spd最高含量仅在培养的第一天出现;而从诱导愈伤组织发生体细胞胚的第一天后,Spd含量才开始上升,到第十天时达到最高值。三种外源多胺的添加均能有效地促进两条离体分化途径的形态建成:Spd(100μmol/L)能显著增加不定芽数,而体细胞胚发生中Spd(10 μmol/L)或Put(100 μmol/L)的单独处理能最好地促进体细胞胚形成和进一步发育成苗;尽管Spm在离体形态发生中含量较低,但添加外源Spm也促进了不定芽形成和体细胞胚形成然后成苗。多胺生物合成抑制剂CHA处理阻碍不定芽形成和体细胞胚的进一步发育;但是MGBG对器官发生途径中的形态建成没有影响,却降低体细胞胚的发生频率及再生苗数。添加Spd(50μmol/L)能部分逆转CHA、MGBG的抑制效应。以上结果表明,多胺对宁夏枸杞器官发生和体细胞胚发生途径的离体形态建成有一定影响。 胡忠 王仑山 郭光沁 郑国锠关键词:宁夏枸杞 愈伤组织 器官发生 体细胞胚发生 多胺 中宁枸杞(Lycium barbarum L.)的核型分析 被引量:3 2000年 报道了中宁枸杞( Lycium barbarum L.)的核型.核型公式为K(2n)=2 X=24=2 2 m(4 SAT)+2 sm.核型类型为1A,为较原始的对称核型,并与前人的报道结果进行了对比分 析. 赵东利 徐红梅 胡忠 王仑山关键词:染色体 核型分析 Fusion Expression of Raphanus sativus-Antifungal Protein 1 (Rs-AFP1) in Escherichia coli and Its Antifungal Activity on Verticillium dahliae 被引量:6 2000年 The Raphanus sativus L. antifungal protein 1 (Rs_AFP1) gene was isolated by polymerase chain reaction (PCR). The complete open reading frame and the fragment encoding the putative mature protein were inserted into the prokaryotic expression vector pET_32b(+), respectively. Subsequent expression showed that the Rs_AFP1 was produced in E. coli as a 27 kD fusion protein only when the N_terminal signal peptide was removed. After treatment with thrombin to remove part of the N_terminal His.tag sequence, the bacterially expressed Rs_AFP1 was used for fungal growth inhibition assay which was conducted on Verticillium dahliae Kleb., a soil_born fungus causing the cotton wilt disease. Results showed that, in the liquid medium, the Rs_AFP1 fusion protein at a concentration of 0.3 g/L clearly inhibited the growth of V. dahliae and the germination of spores. Thus the bacterially expressed fusion protein had the antifungal activity against V. dahliae. 周向军 王仑山 林芝萍 贾军伟 卢山 储昭庆 陈晓亚关键词:FUNGUS 枸杞组织培养中过氧化物酶和可溶性蛋白质的变化 被引量:59 1989年 枸杞(Lycium barbarum L.)叶组织切块接种在附加6-BA 0.5毫克/升和NAA 0.5毫克/升的MS固体培养基上可大量诱导产生愈伤组??织,培养至30天分化出芽,到50天长成小苗。过氧化物酶活性和可溶性蛋白质的含量分别在大量分生细胞团形成和芽形成时出现两个峰值,酸性蛋白质的种类也在这两个时期迅速增加。过氧化物酶同工酶阳极端出现的四条酶带中,A_2、A_3较稳定,A_1、A_4则在不同发育时期呈现规律性的变化。 王亚馥 王仑山 陆卫 逯斌 安黎哲关键词:枸杞 蛋白 伊贝母愈伤组织在继代培养过程中的染色体变异和分化频率的研究 被引量:18 1990年 本文报道了伊贝母愈伤组织在不同培养基上继代培养的的染色体变异和分化频率。结果表明,随着继代培养的进程,二倍体细胞频率逐渐减少。亚二倍体和超二倍体细胞频率迅速增加。同时还观察到比率不等的亚单倍体、单倍体,超三倍体和超四倍体细胞。于是培养物最终变成为只有少量整倍体而多数为非整倍体染色体数的混倍体细胞群体。不同培养基对染色体变异的效应是2,4-D+KT>IAA+KT>NAA+KT。分化频率随继代次数的增加而下降。同时还观察到了各种类型的染色体结构变异和有丝分裂异常。根据试验结果,对继代培养中染色体变异的原因以及与分化频率的关系进行了讨论。 王仑山 丁惠宾 王亚馥 杨汉民 康文隽关键词:伊贝母 继代培养 染色体 愈伤组织 伊贝母组织培养中贝母碱含量变化的研究Ⅱ.EMS对伊贝母愈伤组织培养中贝母碱蓄积量的影响 1991年 近年来,利用植物组织培养生产天然产物是一个十分活跃的研究领域。据报道,目前用组织或细胞培养产生的次生代谢产物已达50多种。有的已进入中试阶段,有的已实现了工业化生产。但由于组织或细胞培养产生的次生代谢产物产量低、成本高,有的作者已通过使用物理或化学诱变剂处理培养的组织或细胞。 丁惠宾 王仑山 唐庆国关键词:伊贝母 百合科