王圆圆
- 作品数：6 被引量：25H指数：2
- 供职机构：暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生经济管理更多>>
- 坍塌反应调节蛋白5促进海马神经元突起生长
- 2014年
- 目的探讨坍塌反应调节蛋白5(CRMP5)对神经元突起生长的作用。方法构建CRMP5真核表达载体,采用基因转染、实时定量PCR和免疫印迹技术评估CRMP5基因表达;以空载体为对照组,设3个复孔,用时差成像技术和突起提取技术观察和检测原代培养海马神经元突起的生长。结果成功构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签蛋白的CRMP5的真核表达载体。脂质体转染技术可成功把CRMP5基因导入细胞,转染的细胞CRMP5表达高于空载体对照组;CRMP5蛋白表达于神经元的胞体和突起,尤其是胞体、突起起始处和突起末端高表达。过表达CRMP5可明显促进突起生长,主要表现为突起的生长,并形成丰富的侧枝;定量结果显示,CRMP5过表达的细胞突起的长度逐渐延长,而且较空载体转染细胞增多,差异显著(P<0.01)。导入CRMP5的细胞突起提取液的吸光度较对照细胞明显升高(P<0.01)。结论 CRMP5能促进神经元突起及其分支的生长。
- 陈克恩王圆圆张吉凤李斌郭国庆
- 关键词：神经元突起基因转染真核表达免疫印迹法
- 大鼠海马神经元neurobasal无血清的原代培养方法被引量：13
- 2008年
- 目的：建立纯度和活力较高的无血清原代培养海马神经元的方法。方法：新生SD大鼠海马，用neurobasal培养基培养，免疫荧光鉴定神经元纯度，MTT法检测其活力。结果：神经元接种12～24h后贴壁，并长出细小突起，3d具有典型神经元形态特征，4d突起形成稀疏的神经纤维网络，8d后神经元5～10个聚集成团，突起密集，生长稳定，12d后出现细胞碎片。Tubulin荧光染色显示清晰的神经元，突起绵长且相互交织，占细胞总数的66．7％；GFAP荧光染色的细胞数量少，突起短粗，占33．7％。培养1～5d MTT代谢率逐渐上升，6～11d处于平台期，11d后下降。结论：neurobasal无血清培养获得的神经元纯度大于60％，6～11d的细胞适于细胞学实验。
- 王圆圆张文斌龚晓兵郭国庆陈静辛莉沈伟哉原林
- 关键词：神经元原代培养海马
- 大鼠海马发育过程中CRMPs家族mRNA的表达
- 2009年
- 目的:探讨大鼠海马发育过程中坍塌反应调节蛋白(CRMPs)家族mRNA的表达规律。方法:用RT-PCR方法检测大鼠发育不同阶段CRMPs家族mRNA的表达。结果:RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合。内参照β-actin电泳条带在发育各时期灰度无明显差异。CRMP-1 mRNA以新生鼠和幼年鼠表达最多,成年大鼠弱表达(P<0.05)。CRMP-2从胚胎鼠至幼年鼠呈现逐渐增加的趋势,成年鼠相对较低(P<0.05)。CRMP-3以幼鼠和成年大鼠表达较多,其中幼鼠表达最多(P<0.05),新生鼠表达最少(P<0.05)。CRMP-4在胎鼠、新生鼠和幼年鼠表达量接近,成年鼠表达相对较低(P<0.05)。CRMP-5在各个阶段均呈较高表达,以新生鼠和成年鼠表达较多,其中成年大鼠表达最多(P<0.05),胎鼠表达最弱(P<0.05)。结论:从胚胎期至幼年期,CRMPs家族除CRMP-4稳定于高表达水平外,其余成员表达量均逐渐增多,其中CRMP-3和CRMP-5区别于其他成员,在成年期表达量继续增高。
- 李斌王圆圆张吉凤龚晓兵郭国庆沈伟哉
- 关键词：基因发育海马
- 丹酚酸B促进胎鼠大脑皮质神经干细胞增殖、突起生长和分化被引量：12
- 2009年
- 丹参是一种常用于治疗脑卒中的传统中草药,丹酚酸B是其有效成份之一.但人们对丹酚酸B如何影响神经干细胞的生长还了解甚少.本研究用MTT、流式细胞术、免疫荧光和RT-PCR技术检测丹酚酸B对胎鼠大脑皮质神经干细胞增殖、突起生长和分化的作用.结果显示,20和40μg/mL丹酚酸B对促进神经干细胞增殖的作用相似,适量的丹酚酸B可促进神经干细胞增殖并形成较多的神经干细胞球,其促增殖作用通过提高G2/S期细胞的数量而实现.丹酚酸B还可促进神经干细胞球发出较多的突起并分化出较多的成熟神经元.分化开始时,tau,GFAP和nestin mRNA均有表达.但分化后的细胞与对照组比较,tau mRNA表达增多,而GFAP mRNA表达减少.说明外源性的丹酚酸B具有促进神经干细胞增殖并向神经元分化的作用,有望成为一种获取更多神经干细胞和促进神经干细胞分化的药物.
- 郭国庆李斌王圆圆山爱景沈伟哉原林钟世镇
- 关键词：丹酚酸B增殖分化突起生长神经干细胞大脑皮质胎鼠
- 现行药品价格管制的研究——以广州市为例
- 近年来，药品价格的攀升和医疗费用的过快增长给患者及医疗保险制度带来了沉重的负担，成为广大群众关心的一个热点问题，同时也是我国各级政府一直努力解决的重大问题。 药品是一种特殊的商品，药品价格牵涉到各个方面的切身利益，与经济...
- 王圆圆
- 关键词：药品价格价格管制政府职能
- CRMP-5-pEGFP-C2真核表达载体的构建及促神经元突起生长作用
- 目的:构建CRMP-5-pEGFP-C2真核表达载体,探讨坍塌反应调节蛋白-5(Collapsinresponse mediator protein-5,CRMP-5)过表达情况下对大鼠海马神经元突起生长的影响。材料和方...
- 王圆圆
- 关键词：真核表达载体突起细胞骨架神经元
- 文献传递
