王春玲 作品数:5 被引量:19 H指数:2 供职机构: 南京农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 上海市科委重大科技攻关项目 江苏省农业科技自主创新基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
猪APOBEC3F基因真核表达载体的构建及其在MARC145细胞中的表达定位 被引量:2 2015年 载脂蛋白B m RNA编辑酶催化多肽3F(APOBEC3F)属固有免疫系统中的重要成员,对人免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)等多种病毒的复制具有广泛的抑制作用。为构建APOBEC3F基因的真核表达载体,并检测其在体外培养的MARC145细胞中的表达情况,通过RT-PCR从猪脾脏组织扩增APOBEC3F基因,定向克隆到表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体p EGFP-CMV中,构建p EGFP-APOBEC3F。PCR扩增及测序显示,APOBEC3F插入载体位置、方向及序列均正确。p EGFP-APOBEC3F经脂质体介导法转染MARC145细胞,转染后24 h APOBEC3F m RNA的水平升至最高。细胞免疫化学法检测发现APOBEC3F蛋白主要在MARC145细胞质中表达。研究结果为体外研究猪APOBEC3F基因在抗猪蓝耳病中的作用奠定了基础。 孟春花 王春玲 李静心 李隐侠 朱前明 曹少先关键词:真核表达载体 转染 荧光定量PCR 脂质体 湖羊、东湖杂交羊MC4R、POMC、CSN3、β-lg基因多态性及其与生长性状的相关性研究 本论文以湖羊和东湖杂交羊(东弗里升羊和湖羊的杂交一代)2个群体共298个个体为研究材料,在分析两个群体生产性能的基础上,采用DNA池PCR扩增引物测序,发现了MC4R、POMC、CSN3、β-lg基因的34个碱基突变位点... 王春玲关键词:杂交羊 生长性状 基因多态性 MC4R基因 文献传递 黄体生成素受体及其mRNA选择性剪接 被引量:2 2012年 黄体生成素受体是G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)超家族中的糖蛋白亚家族成员,1989年后在大鼠、猪、人、小鼠、绵羊、山羊、牛、兔、火鸡、狨猴中都成功克隆出LHR的mRNA。此外,在大鼠、火鸡、绵羊、牛、人、猪和狨猴中发现了LHR的选择性剪接体,但是几乎所有的选择性剪接体都不翻译,即使翻译也主要是在细胞质内。目前,LHR选择性剪接体的生物学作用仍不清楚。本文主要综述了LHR的结构类型、分布、生物学功能及其mRNA的选择性剪接。 王春玲 茆达干 惠锋明关键词:MRNA 选择性剪接 6个绵羊群体MC4R基因CRS-PCR多态性及其与湖羊、东湖杂交羊生长性状的关联分析 被引量:9 2014年 为了探讨黑素皮质素受体4(melanoeortin receptor-4,MC4R)基因在绵羊中的多态性以及多态位点对绵羊生长性状的影响,对湖羊MC4R基因进行扩增,测序后发现9个碱基置换,选择MC4R基因548位点处C/T的单碱基突变,建立CRSPCR-RFLP分析方法,并对6个绵羊群体(湖羊、东弗里生羊×湖羊(东湖杂交羊)、中国美利奴、Romney、中国美利奴×Romney和阿勒泰)共518个个体进行检测分析。结果表明:在阿勒泰、Romney、中国美利奴×Romney群体中仅检测到CC 1种基因型,在东湖杂交羊和中国美利奴的群体中检测到CC和CT 2种基因型,而在湖羊群体中检测到CC(0.865)、CT(0.126)和TT(0.009)3种基因型。湖羊群体CT基因型2月龄体质量显著高于TT基因型(P<0.05),4月龄体长显著高于CC型(P<0.05)和TT型(P<0.01);东湖杂交羊群体中CT基因型的4月龄体高显著高于CC基因型(P<0.05)。本研究初步表明6个绵羊群体中MC4R基因的CT基因型具有生长优势。 王春玲 茆达干 曹少先 张俊 孟晨玲 方永飞 朱冬冬关键词:绵羊 生长性状 湖羊、东湖杂种羊POMC基因外显子3单核苷酸多态性及其与生长性状的关联分析 被引量:5 2013年 阿黑皮素原(Pro-opiomelanocortin,POMC)在动物采食和能量平衡调控中发挥重要作用,文章对绵羊POMC基因外显子3进行扩增和测序,筛选多态性位点,并分析多态位点与湖羊和东弗里生×湖羊杂种羊生长性状的相关性。测序后发现湖羊POMC基因外显子3有2个单碱基突变(g.273T/C和g.456G/A),根据273位点处发生的T/C突变,建立PCR-RFLP分析方法,并对162只湖羊和130只东湖杂种羊进行检测分析。结果发现,在湖羊群体中检测到TT(0.469)、TC(0.438)和CC(0.093)3种基因型,而在东湖杂种羊群体中仅检测到TT(0.754)和TC(0.246)两种基因型。POMC基因外显子3的273位点多态性与生长性状的相关性研究结果显示:湖羊群体中CC基因型个体的2月龄断奶重、4月龄尻高及TC基因型个体4月龄体长和管围均显著高于TT型个体(P<0.05);CC基因型个体的4月龄重、6月龄重极显著高于TT和TC基因型个体(P<0.01);CC基因型个体的4月龄体高和体长极显著高于TT型个体(P<0.01),且显著高于TC基因型个体(P<0.05)。此外,CC型个体的管围极显著高于TT基因型个体(P<0.01)。东湖杂种羊群体中TC基因型个体的2月龄断奶重、4月龄重及4月龄体高、体长、胸深和管围都显著高于TT型个体(P<0.05),TC型个体的6月龄重极显著高于TT型个体(P<0.01)。研究结果表明,POMC基因外显子3与绵羊生长性状相关,C等位基因对体重及体尺性状的增加更有利。该结果为进一步探讨POMC基因作为绵羊生长性状的辅助选育标记奠定了基础。 王春玲 孟晨玲 曹少先 张俊 孟春花 王慧利 方永飞 朱冬冬 茆达干关键词:PCR-RFLP 生长性状