胡双芳 作品数:13 被引量:40 H指数:4 供职机构: 华南理工大学 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 理学 更多>>
一种用于检测腐败酵母菌核苷酸片段的引物、探针及检测方法和试剂盒 一种用于检测腐败酵母菌核苷酸片段的引物、探针及检测方法和试剂盒,所述的引物由上游引物Yeast?F1和下游引物Fungus?R1组成,所述的上游引物Yeast?F1的碱基序列为GAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAA... 肖性龙 万松华 余以刚 吴晖 李晓凤 胡双芳文献传递 SD-PMA-qPCR快速检测冷冻肉制品中活性沙门氏菌的研究 被引量:5 2017年 为实现冷冻肉制品中活性沙门氏菌的快速检测与控制,本文利用PMA(叠氮溴化丙锭)和SD(脱氧胆酸钠)消除死菌和损伤菌的影响,建立了运用SD-PMA-qPCR法检测活性沙门氏菌的反应体系和反应条件,并进行人工染菌样品检测试验。SD的最佳浓度确定为0.1%,最佳孵育时间为20 min。对-20℃低温冷冻处理3~4 d的沙门氏菌处理液,使用平板计数法、qPCR、PMA-qPCR和SD-PMA-qPCR进行计数,结果发现qPCR与PMA-qPCR二者检测值接近且明显高于平板计数值,而SD-PMA-qPCR检测值与平板计数值相近,这表明SD和PMA的联合使用能有效的消除死菌和损伤菌的影响。人工染菌样品试验表明,沙门氏菌检出限在10~2CFU/g,同时10~6 CFU/g大肠杆菌O157:H7的存在不会影响检测结果。本研究所建立的SD-PMA-qPCR检测方法特异性好、灵敏度高,有望成为快速检测冷冻肉制品中活性沙门氏菌的新方法,具有很好的研究价值和应用前景。 庄平 余以刚 周冬根 李亚茹 胡双芳 肖性龙一种检测阪崎克罗诺杆菌的方法及引物、探针和试剂盒 本发明公开了一种检测阪崎克罗诺杆菌的方法及引物、探针和试剂盒,针对阪崎克罗诺杆菌基因组的保守序列设计了用于荧光定量PCR检测的引物及探针,建立了阪崎克罗诺杆菌荧光定量PCR检测技术,反应结束即可根据扩增曲线判定是否有阪崎... 胡双芳 肖性龙 李蓉 余以刚 庄平文献传递 通用型酵母菌实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:3 2014年 为建立一种快速检测鉴定食品中酵母污染菌实时荧光PCR法,根据酵母基因序列设计出通用型探针和引物,建立了运用实时荧光PCR法检测酵母的反应体系和反应条件,进而对该方法进行特异性验证,灵敏度分析及稳定性评价,并应用于产品样本的检测。特异性试验表明,酵母菌检测结果均为阳性,而细菌、霉菌均为阴性,荧光PCR检测结果的特异性为100%。灵敏度试验表明,酵母菌检出限在760 cfu/m L。稳定性试验表明,酵母菌组内实验CV在0.62-0.81%之间波动,而组间实验在0.43-0.77%之间波动。通过样品增菌检测发现在培养12 h后能检出阳性。本研究所建立的实时荧光PCR法特异性好、灵敏度高、稳定性好,具有快速、简便的特点,为快速检测食品中酵母污染提供新的方法和途径,具有很好的研究价值和应用前景。 余以刚 万松华 胡双芳 肖性龙 吴晖关键词:酵母菌 荧光定量PCR 流式细胞术检测单增李斯特菌与酿酒酵母 被引量:5 2014年 为探讨流式细胞术对单增李斯特菌和酿酒酵母的活菌与热灭活菌的检出效果,本文采用荧光染色试剂SYTO-9和碘化乙锭(PI)对单增李斯特菌和酿酒酵母的活菌与热灭活菌的细胞悬液进行染色,采用流式细胞仪同时测量红色荧光与绿色荧光从而得出细胞悬液中的细菌和酵母的含量。结果表明经核酸荧光染料染色后,再结合流式细胞术对细菌与酵母菌进行检测,步骤简单、耗时短。该法不仅简化了测量步骤且分辨率高,对单增李斯特菌和酿酒酵母均具有良好的检出结果,能分辨同一体系中同一菌种的活细胞与热灭活细胞和同一体系中的细菌与酵母活细胞;该法检出限低,将单增李斯特菌稀释后,最低检出限可达1.2×104 cells/mL,将酿酒酵母稀释后,最低检出限可达6×103 cells/mL,因此能大大缩短增菌时间或者避免繁复的增菌步骤。 黄生权 付萌 唐青涛 黄韵 胡双芳 余以刚 肖性龙关键词:流式细胞术 荧光 李斯特菌 酿酒酵母 高分辨率溶解曲线检测9种食源性致病菌方法的建立 被引量:3 2016年 当今食源性疾病已成为一个全球关注的食品卫生问题,常见的细菌性食物中毒的病原菌有:致病性大肠杆菌(特别是出血性大肠杆菌O157:H7)、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性弧菌(包括霍乱弧菌和副溶血弧菌)、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、空肠弯曲菌以及阪崎克罗诺杆菌等。单独检测一种致病菌已无法满足现今社会对同时高效检测多种致病菌的要求,为建立一种同时对上述9种食品中常见致病菌的检测方法,本研究分别以上述9种菌的特异性基因为靶基因,创新性地结合一对通用引物,建立能同时检测多种食源性致病菌的多重HRM-real time PCR检测体系。结果表明该多重HRM-real time PCR检测体系通过两管PCR反应可对上述9种食品中常见致病菌进行有效的检测与区分,且具有良好的特异性和灵敏度。 胡双芳 余以刚 李蓉 庄平 夏杏洲 肖性龙 杨慧宁关键词:致病菌 多重PCR 一种用于检测大肠菌群的试剂盒及应用 本发明公开了一种用于检测大肠菌群的试剂盒及应用。该试剂盒包括引物序列和探针序列;其中:引物序列由上游引物F1130a、上游引物F1130b和下游引物R1264组成;探针序列为探针Pb1156A。该试剂盒具有良好的灵敏度、... 胡双芳 肖性龙 李蓉 余以刚 吴晖文献传递 配方奶粉中致病菌的快速检测与逆境应答机制研究 婴幼儿配方奶粉(PIF)作为除母乳之外,婴幼儿这一特殊人群的主要膳食营养来源,确保其产品质量与消费安全意义非凡。PIF产品中的微生物量超标甚至出现致病菌的现象,是导致其质量安全问题的重要原因之一,因此对PIF中的微生物污... 胡双芳关键词:肠炎沙门氏菌 文献传递 一种同时检测沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的试剂盒和方法 本发明公开了一种同时检测沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的试剂盒和方法,试剂盒包括上述三种菌的上、下游引物,具体为沙门氏菌的上、下游引物分别为Seq No.4、5,单增李斯特菌的上、下游引物分别为Seq No.6、... 肖性龙 章丽 李蓉 余以刚 吴晖 李晓凤 胡双芳文献传递 一种用于检测腐败酵母菌核苷酸片段的引物、探针及检测方法和试剂盒 一种用于检测腐败酵母菌核苷酸片段的引物、探针及检测方法和试剂盒,所述的引物由上游引物Yeast F1和下游引物Fungus R1组成,所述的上游引物Yeast F1的碱基序列为GAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAA... 肖性龙 万松华 余以刚 吴晖 李晓凤 胡双芳文献传递