赵明辉
- 作品数:25 被引量:54H指数:5
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津分子核医学重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人血清瘦素放射免疫分析方法的建立
- 韩佩珍赵明辉张春明王德芝潘学继
- 主要内容:用纯化的重组人瘦素作为免疫原,免疫家兔,得到高度特异性的抗血清。建立瘦素放免法,与国外同类产品(Linco公司的RIAkit)做全面的比较,在特异性、灵敏度、精密度和准确性方面均可与之相媲美,而且测定值基本符合...
- 关键词:
- 关键词:放射免疫分析方法肥胖内分泌腺疾病糖尿病
- 人瘦素放射免疫分析法的建立及初步临床应用
- 瘦素是由肥胖基因编码,由脂肪细胞合成和分泌的一种亲水性激素蛋白.分子量16KD,是脂肪分解和合戍代谢的主要调节因子.本文用高纯的重组人瘦素(leptin,LEP)抗原免疫家兔,得到高效价的兔抗人瘦素多克隆抗体,氯胺-T法...
- 赵明辉张春明王德芝王彦韩佩珍
- 关键词:瘦素多克隆抗体放射免疫分析
- 文献传递
- 抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单克隆抗体的体内外溶栓效果的研究被引量:5
- 1998年
- 目的研究抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞(变异株)与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合,获得分泌双特异性单抗(bsMcAbs)杂交-杂交瘤细胞。采用ELISA法检测该bsMcAbs与纤维蛋白和尿激酶的结合力。用131I血浆-血浆凝块溶解率法测定体外溶栓效力。用兔血栓模型测定体内溶栓效力。结果获得8株分泌抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单抗的杂交-杂交瘤细胞。ELISA实验证明bsMcAbs与纤维蛋白和尿激酶均有很强的结合力。体外溶栓实验证明bsMcAbs可使尿激酶的溶栓效力增强15.5%。体内溶栓实验证明bsMcAbs的溶栓效力为尿激酶的1.6~2.1倍。结论单抗导向溶栓剂具有高度特异性和局部溶栓效力强等优点,值得进一步研究。
- 袁洪卫林汉朱锡霞张一泉张一泉褚丽萍张晓蓉赵明辉武怀珠
- 关键词:尿激酶双特异性单克隆抗体纤维蛋白
- 瘦素在黄体功能不足患者子宫内膜中的表达被引量:7
- 2005年
- 目的测定黄体功能不足患者黄体中期血清瘦素值和子宫内膜瘦素表达水平,探讨黄体功能不足和体内瘦素水平异常的关系。方法48例黄体功能不足患者,年龄(35.0±5.3)岁,体重指数(BMI)(23.2±3.2)kg/m2。分别做黄体中期的血清瘦素放射免疫测定和子宫内膜瘦素免疫组化染色。51例正常对照组,年龄(37.0±4.1)岁,体重指数(BMI)(22.8±2.6)kg/m2。结果黄体功能不足患者组血清瘦素值(8.49±3.72)ng/ml;正常对照组为(7.43±4.02)ng/ml。两组数据经t检验,无统计学意义(P=0.18>0.05)。H评分法显示:正常对照组子宫内膜腺体瘦素半定量为2.11±0.74,内膜间质为1.90±0.85;黄体功能不足患者组内膜腺体为1.49±1.06,内膜间质为1.30±0.89。对两组结果进行t检验,具有统计学意义(P=0.001<0.05)。结论黄体功能不足的患者子宫内膜上的瘦素表达异常,在黄体中期存在瘦素不表达或弱表达。
- 赵明辉雷呈志韩佩珍张春明王德芝王彦
- 关键词:黄体功能不足子宫内膜血清瘦素黄体中期
- 瘦素放射免疫分析
- 目的:瘦素(leptin,LEP)是由肥胖基因编码,由脂肪细胞合成和分泌的一个新水性激素蛋白.其分子量为16KD,含146或147个氨基酸,是脂肪分解和合成代谢的一个主要调节因子.本文用高纯的重组人瘦素抗原免疫家兔,得到...
- 赵明辉张春明王德芝韩佩珍
- 文献传递
- 重组脂联素融合蛋白的表达及其生物学活性测定
- 2008年
- 目的表达重组脂联素融合蛋白(adiponectin-Trx),并测定其生物学活性。方法从小鼠脂肪组织提取总RNA,应用序列特异性引物经RT-PCR方法扩增获得全长脂联素基因序列,克隆至pGEM-T载体,序列经DNA测序证实。将目的序列(18-247氨基酸)亚克隆至pET-32(a)表达载体,重组质粒adiponectin/pET32(a)的序列经测序证实。将adiponectin/pET32(a)转化表达宿主菌OrigamiTM(DE3),在27℃以1mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE和氨基酸测序检测目的蛋白的表达,目的蛋白经组氨酸镍螯和树脂亲和纯化。以不同浓度的融合蛋白adiponectin-Trx和Trx蛋白处理体外培养的人脐静脉内皮细胞,细胞增殖法测定其生物学活性。结果小鼠脂肪组织脂联素基因的编码序列,337位点上的碱基A被G置换,导致在113位的蛋氨酸被缬氨酸取代。序列测定表明,构建的重组表达载体adiponectin/pET32a序列完全正确,诱导工程菌主要表达可溶性的融合蛋白adiponectin-Trx,部分以包含体形式表达。表达产物的相对分子量(Mr)同预期分子量相同,adiponectin-Trx Mr为43000,Trx Mr为19000。在低浓度时融合蛋白刺激人脐静脉内皮细胞增殖。结论小鼠脂肪组织脂联素基因编码序列与来自3T3-L1脂肪细胞的编码序列不同。成功地在E.coli中表达了重组脂联素融合蛋白并具有生物学活性。
- 王胜芬韩佩珍穆传杰赵明辉卢圣栋
- 关键词:融合蛋白可溶性生物学活性
- 人抵抗素ELISA试剂盒的研制及其初步临床应用
- 抵抗素是 Steppan 等在2001年研究抗糖尿病新药物噻唑烷二酮类(TZDs)作用机制时新发现的一种由脂肪细胞分泌的肽类激素,它可以影响与胰岛素作用相关的葡萄糖代谢以及脂代谢,因而具有对抗胰岛索的功能而被命名为抵抗素...
- 路璐王德芝张春明赵明辉韩佩珍
- 文献传递
- 抗Resistin合成多肽抗体的制备及鉴定被引量:5
- 2005年
- 目的制备抵抗素合成肽及其抗体。方法根据人抵抗素cDNA编码的氨基酸序列合成抵抗素分子22~34位的13个氨基酸的多肽(CSMEEAINERIQE),并利用MBS双功能试剂将人工合成多肽成功地与KLH进行偶联,免疫家兔制备抗抵抗素合成多肽的抗体,并经亲和层析进行了纯化。结果对此抗体进行鉴定的结果表明,抗人抵抗素合成多肽抗体可与天然抵抗素分子发生特异性反应,并可用于免疫沉淀和Westernblot。结论该抗体的制备为Resistin分子功能的研究及肥胖和2型糖尿病的机制研究提供了有用的工具。
- 赵明辉王彦张春明王德芝韩佩珍
- 关键词:抵抗素载体蛋白多肽抗体胰岛素
- 人瘦素放射免疫分析法的建立及初步临床应用
- 瘦素是由肥胖基因编码,由脂肪细胞合成和分泌的一种亲水性激素蛋白。分子量16KD,是脂肪分解和合成代谢的主要调节因子。本文用高纯的重组人瘦素(leptin,LEP)抗原免疫家兔,得到高效价的兔抗人瘦素多克隆抗体,氯胺—T法...
- 赵明辉张春明王德芝王彦韩佩珍
- 关键词:瘦素多克隆抗体放射免疫分析
- 文献传递
- 人血清抵抗素ELISA方法的研究及其临床初步应用被引量:1
- 2008年
- 用兔抗人抵抗素(resistin)片断(22~34氨基酸残基)的多克隆抗体(PcAb)包被固相板,用辣根过氧化物酶(HRP)标记PcAb得HRP—PcAb。在包被PcAb的孔中加入抵抗素标准品(或待测样品),加入HRP—PcAb,形成PcAb-resistin—HRP—PcAb复合物,加酶底物邻苯二胺(OPD)显色,用酶标仪在492nm波长处测定OD值,绘制标准曲线。从标准曲线读出样本中抵抗素含量。本方法特异性强,灵敏度高,精密度好。该法测定范围0.5~100ng/mL,最低检出量0.5ng/mL,批内和批间CV%分别为3.4%和7.2%。50例2型糖尿病患者血清抵抗素含量为23.2±3.9ng/mL,明显高于正常值16.0±2.5ng/mL。结果表明该法稳定,灵敏度适于检测人血清抵抗素水平。
- 路璐王德芝张春明潘兵赵明辉韩佩珍
- 关键词:抵抗素多克隆抗体酶联免疫吸附分析