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军团菌16SrRNA聚合酶链反应方法的建立及应用被引量：12: 1999年; 建立了１６ＳｒＲＮＡ基因检测军团菌的多聚酶链反应方法。扩增参考菌株染色体ＤＮＡ（Ｌ．Ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ１～１４、Ｌ．ｂｏｚｅｍａｎｎｉ、Ｌ．ｄｕｍｏｆｉ、Ｌ．ｌｏｎｇｂｅａｃｈａｅ、Ｌ．ｍｉｃｄａｄｅｉ、Ｌ．ｊｏｒｄａｎｉｓ），均可检出出３８６ｂｐ的基因片段，敏感性为１０３ｃｆｕ／ｍｌ（平均值）；而扩增９株非军团菌均为阴性。对模拟血标本的检测，其敏感性可达１０２ｃｆｕ／ｍｌ。应用本检测系统检测了２４例临床标本，包括１９份血、５份胸水，阳性率为７０．８％（１７／２４）。与血清学检测和临床诊断治疗结果相符合。上述结果表明该方法敏感、特异、快速、简便。; 郭军巧郭军巧李月久李月久邱琼; 关键词：16SRRNA基因军团菌聚合酶链反应军团病

mip基因聚合酶链反应结合地高辛标记探针杂交鉴定嗜肺军团菌被引量：6: 1998年; 目的对嗜肺军团菌国外参考菌株及国内分离菌株的巨噬细胞感染增强子（ｍｉｐ）基因分析，建立一种快速、敏感、特异的嗜肺军团菌基因检测鉴定方法。方法利用嗜肺军团菌种特异性ＤＮＡ片段ｍｉｐ基因通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，对ＰＣＲ阳性产物进行地高辛标记的ｍｉｐ基因探针杂交，观察其反应结果。并对２６株环境和患者中分离的疑似嗜肺军团菌菌株进行分析。结果所有实验用嗜肺军团菌国外参考菌株及国内分离菌株的ｍｉｐ基因的ＰＣＲ扩增结果都为阳性，探针杂交结果也为阳性，而非嗜肺军团菌及与非军团菌对照菌株的ＰＣＲ扩增结果及探针杂交结果都为阴性，本实验其灵敏度和特异度均为１００％。另外２６株疑似嗜肺军团菌菌株有６株被鉴定为嗜肺军团菌。结论所建立嗜肺军团菌的快速初步鉴定方法具有很高的特异性和敏感性。; 卢锡华彭晓任红宇严寒秋万超群万超群邱琼; 关键词：嗜肺军团菌 DNA探针 MIP基因聚合酶链反应

空调冷却水嗜肺军团菌的分离及鉴定报告被引量：6: 1999年; 四川省在外环境中分离到嗜肺军团菌，尚未见于以往文献。１９９７年１１月自空调冷却水中分离到两株细菌（编号为９７００４、９７００８），其菌体形态、培养特性、生化反应及ＰＣＲ分析均符合嗜肺军团菌鉴定要求，经试管凝集、间接免疫荧光鉴定证实为嗜肺军团菌血清１型。; 罗隆泽谢仁栋兰纪康吕强吕强祝小平孙莉邱琼祝小平万超群; 关键词：嗜肺军团菌

军团菌5SrRNA聚合酶链反应方法的建立及应用被引量：3: 2000年; 建立 5SrRNA基因检测军团菌的多聚酶链反应方法 ,扩增参考菌株的染色体DNA (L .Pneumophila1～ 14、L .boze manni、L .dumoffii、L .longbeachae、L .micdadei、L .jordanis) ,均可检出 10 4bp的基因片段 ,敏感性为 8 5 2 10 2 cfu/ml(平均值 ) ;而扩增 9株非军团菌均为阴性。对模似血标本的检测 ,其敏感性可达 10 3 cfu/ml。检测 17例血标本 ,阳性率为 5 8 8% ( 10 /17) ,与血清学检测和临床诊断治疗结果相符合。结果表明该方法敏感、特异、快速、简便。; 白羽孔繁学郭军巧孙立华邱琼; 关键词：军团菌聚合酶链反应军团病

双重PCR法检测痰标本对早期诊断军团菌肺炎的意义被引量：5: 2001年; 为探讨双重PCR方法 (DPCR)检测痰标本中军团菌DNA在早期诊断军团菌肺炎方面的意义 ,采用DPCR方法对军团菌肺炎组、临床疑似军团菌肺炎组、普通肺炎组和肺结核组 4组患者留取的痰标本进行检测。DPCR过程采用根据军团菌 1 6SrRNA基因和mip基因设计的 2对引物 ,同时扩增军团菌 3 86bp 1 6SrRNA基因片段和 2 0 6bpmip基因片段。结果 :军团菌肺炎组的DPCR阳性检出率为 1 0 0 % ,明显高于其他 3组 (分别为 1 7.2 4%、0、0 ,P均 <0 .0 1 )。模拟痰标本DPCR的最低检出限为 1× 1 0 3 cfu/mL。初步研究表明 ,DPCR方法检测痰标本中的军团菌DNA具有较好的敏感性、特异性和稳定性。; 张沪生金建敏陈东宁秦杰邱琼万超群; 关键词：军团菌肺炎痰标本

军团菌PCB检测中模板制备优化被引量：2: 2000年; 对 8种常见的模板制备方法进行了探讨和改良 ,结果显示在军团菌PCR检测中 ,对临床血标本的处理以煮沸 -离心法最优 ,它可促使军团菌PCR操作步骤简化 ,时间缩短 ,成本降低 ,且敏感。; 白羽辽宁省卫生防疫站孙立华辽宁省卫生防疫站郭军巧辽宁省卫生防疫站邱琼; 关键词：军团菌聚合酶链反应

双重PCR方法早期诊断军团菌肺炎意义的初步探索被引量：1: 2002年; 目的　探讨双重PCR方法 (DPCR)检测痰及支气管肺泡灌洗液 (BALF)中军团菌DNA在早期诊断军团菌肺炎方面的意义。方法　两对引物可扩增军团菌 386bp 16SrRNA基因片段和 2 0 6bpmip基因片段。采用DPCR方法对军团菌肺炎组 (15例 )、临床可疑军团菌肺炎组 (14例 )和普通肺炎组 (2 5例 )三组患者在病程早期留取的痰及BALF标本进行检测。结果　军团菌肺炎组的所有标本包括 2 5份痰、8份BALF的DPCR结果均为阳性 ,而普通肺炎组的所有标本包括 32份痰和 16份BALF均为DPCR阴性。临床可疑军团菌肺炎组留取的 2 0份痰和 8份BALF中 3例患者的 6份痰、2份BALF标本呈DPCR阳性。同一患者留取的多份标本呈现相同的DPCR结果。模拟标本的DPCR最低检出限为 1× 10 3 cfu/ml。结论　初步结果显示 :采用DPCR方法检测痰和BALF标本中的军团菌DNA具有较好的敏感性、特异性和稳定性。; 张沪生金建敏邱琼秦杰李松涛万超群; 关键词：双重PCR 军团菌肺炎

军团菌双重PCR检测方法的建立及其应用研究被引量：20: 2000年; 目的　建立一种双重PCR方法 ,用于简便 ,快速检测军团菌。方法　根据军团菌 16SrRNA基因和mip基因序列设计合成引物 ,可以扩增 386bp 16SrRNA基因和 2 0 6bpmip基因片段。用该方法对军团菌标准参考菌株和 47份临床标本进行了检测。结果　通过一次PCR反应 ,不仅能够检测嗜肺军团菌 ,而且能够检测非嗜肺的军团菌 ,从而克服了单一引物应用时的不足。 2 1株对照菌株扩增阴性 ,最小检出限为 2× 10 1 cfu/ml。 47份临床标本 (包括 12份血 ,2 0份支气管肺泡灌洗液 ,7份胸水 ,8份痰 )PCR检测的阳性标本为 2 8份 (2 8/4 7) ,在临床上均支持为军团菌感染 ,高于血清抗体检测的阳性标本数 (2 4/4 7)。结论　该方法用于军团菌的检测简便、快捷 ,具有很高的特异性和敏感性。; 邱琼万超群刘双任红宇卢锡华; 关键词：军团菌双重PCR 分子流行病学

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邱琼