邹键 作品数:7 被引量:38 H指数:4 供职机构: 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 更多>> 发文基金: 上海市科技兴农重点攻关项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
复合RT-PCR快速鉴别鹅副粘病毒与鸡新城疫病毒 被引量:4 2004年 对新近分离的鹅副粘病毒SF02株通过自行设计的3条引物建立了复合RT-PCR方法。该方法对鹅源副粘病毒SF02株和GPV2株均可检测到215bp和401bp2条带,对12株(其中7株参考株,5株野毒)鸡源新城疫、2株鸽源新城疫、1株鸭源新城疫病毒的检测只出现1条401bp带,与预期的大小一致,对H5、H9亚型禽流感病毒、鸭病毒性肝炎病毒、传染性支气管炎病毒、SPF鸡胚尿囊液均未检测到特异性条带。 单松华 邹键 姚龙涛 胡永强 何水林 龚祖埙关键词:复合RT-PCR 副粘病毒 新城疫病毒 鹅副黏病毒与新城疫病毒对鸡胚和鹅胚成纤维细胞的感染性分析 被引量:4 2005年 用鸡新城疫病毒F48E9,Komarov, LaSota,V4/66株和鹅副黏病毒SF02株分 别感染鸡胚和鹅胚成纤维细胞,用MTT显 色方法检测存活细胞数目。结果表明,不同 毒力新城疫病毒致细胞病变的作用不一样, 鸡新城疫强毒F48E9株和鹅副黏病毒SF02 株均引起两种细胞几乎全部死亡,感染动物 时,SF02与NDV强毒株的致病性有显著的 区别,但感染细胞时,二者并无明显差别; NDV与GPMV在感染水禽时的致病性差异 并不是因为诸如细胞膜受体等细胞水平的因 素不同造成的,可能与干扰素途径有关。 单松华 谢爱织 邹键 姚龙涛关键词:鹅副黏病毒 新城疫病毒 胚胎成纤维细胞 感染性 致病机制 含四个串联核酶和GFP基因的转基因质粒的构建 2001年 以含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的质粒pSK10 0 DS、含切割对虾杆状病毒基因的核酶Rz1的质粒pRGRz1、含核酶Rz2的质粒pRGRz2和转基因空质粒pcDNA3为基础 ,把绿色荧光蛋白GFP基因克隆于pcDNA3的SV40启动了下面 ,由SV40启动子控制 :含四个两种核酸基因的四联体克隆于pcDNA3的多克隆位点区 ,由T7启动子控制 ,构建成含两个Rz1、两个Rz2和GFP基因的转基因质粒pGTR ,以用于转基因抗病毒对虾的研究。 邹键 沈学仁 吴建华 周国瑛 龚祖埙关键词:核酶 绿色荧光蛋白 鹅副粘病毒上海株的分子鉴定 被引量:9 2002年 对新近分离的鹅副粘病毒SF0 2株采用RT PCR方法 ,扩增部分F基因进行测序 ,其裂解位点的序列为112 R R Q K R F117,与新城疫病毒强毒株的特征相符。通过对其F基因与我国大陆新城疫强毒F4 8E9株、疫苗毒Lasota株比较 ,发现该毒株的F基因已发生了较大的变异 ,而与1999年在我国台湾省流行的新城疫病毒基因Ⅶ型有很高的同源性。 单松华 邹键 姚龙涛 胡永强 何水林 龚祖埙关键词:分子鉴定 鹅副粘病毒 新城疫病毒 F基因 RT-PCR 鸽基因Ⅶ型新城疫病毒的分离鉴定 被引量:9 2003年 从外表健康的法国进口鸽中分离到一株鸽Ⅰ型副粘病毒(FP株),电镜观察病毒形态不规则,以圆形为主,平均直径100mm~120mm,表面有许多突起。其鸡胚平均死亡时间(MDT)为59 2h,鸡脑内接种指数(ICPI)为1 88。接种1月龄鸽能使其发病,出现明显症状和病变并有80%试验鸽死亡,接种2月龄SPF鸡全部死亡。经多重RT-PCR鉴定,属速发型新城疫病毒。应用RT-PCR技术对F基因重要功能区片段扩增后进行序列测定、分析表明,F蛋白裂解位点处的序列(112R-R-Q-K-R-117F)与新城疫强毒在这一区域的序列相符。与国内强毒F48E9株、疫苗毒Lasota株的核苷酸同源性分别为84 1%、82%,氨基酸同源性为84 5%、80 6%。与多株已报道的NDV参考株相应片段进行序列比较,经遗传基因进化树分析,鉴定为基因Ⅶ型,由此首次报道了鸽源基因Ⅶ型NDV株的存在。 单松华 邵朝纲 邹键 李春阳 胡永强 王忠宽 龚祖埙关键词:鸽I型副粘病毒 系统发育进化树