陆晓峰
- 作品数:7 被引量:15H指数:3
- 供职机构:汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学更多>>
- 新癌基因fascin在食管癌细胞中过表达调控机制的研究
- 人类的fascin基因,亦即fascin-1,定位于7p22,编码一种55kD的球形蛋白,结合捆绑细胞微丝F-Actin,主要在细胞的分裂增殖、变形与移动以及信号转导中发挥功能。
本课题组以往曾率先研究发现,fas...
- 陆晓峰
- 关键词:FASCINSP1EGF食管癌细胞MAPK细胞信号转导通路
- 文献传递
- 氨基酸的2,3-二甲醛基喹喔啉荧光衍生及高效液相色谱分离分析被引量:2
- 2012年
- 将荧光试剂2,3-二甲醛基喹喔啉首次应用到氨基酸的高效液相色谱分离分析中。考察了该荧光试剂与伯胺氨基酸衍生反应的pH值、比例、反应时间等影响因素,确定衍生反应的最佳条件为:100 mmol/L硼砂缓冲液(pH 9.5),二巯基乙醇、衍生试剂与氨基酸的比例为9∶3∶1,室温下反应5 min。采用C18色谱柱,经二元梯度洗脱,荧光检测,17种伯胺蛋白氨基酸得到较好分离。氨基酸的浓度在0.01~1.00 mmol/L范围内与其衍生物峰面积呈较好的线性关系,氨基酸衍生物的检出限为0.02~0.07μg/L。应用该方法对麦冬中游离氨基酸的含量进行测定,结果满意。此方法快速,高效,灵敏度高,精密度好。
- 林向成陆晓峰汤泉罗杨合
- 关键词:荧光试剂氨基酸高效液相色谱
- NGAL蛋白诱导食管癌细胞发生自噬被引量:4
- 2009年
- 以往研究证明,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)与食管癌密切相关,改变NGAL表达能够对癌细胞的形态结构产生明显影响,但确切的作用机制不明.在酵母细胞中表达NGAL蛋白,柱层析分离纯化.筛选NGALR(NGAL receptor)高表达与弱表达的人食管癌细胞系EC1.71和EC109作为实验细胞模型.5-FAM标记NGAL蛋白,加入到细胞培养上清中,对比研究NGAL蛋白入胞情况、细胞形态学改变、细胞自噬体产生、自噬相关基因表达、细胞内铁离子与铁蛋白水平以及相关细胞信号转导激酶的活性等.结果表明,NGAL蛋白可经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用,致使细胞发生典型的自噬性形态结构变化,自噬体大量产生,自噬相关基因的表达发生相应变化,ERK被激活,但细胞内的铁离子与铁蛋白未受明显影响.上述结果提示,诱导细胞发生自噬是外源性NGAL蛋白经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用的机制之一,与NGAL蛋白跨膜转铁未见直接关联,而ERK信号转导途径可能参与了这一过程.
- 张丕显方王楷许丽艳蒋纪恺沈忠英杜则澎陆晓峰周飞谢剑君吴炳礼崔有宏谢东李恩民
- 关键词:NGAL自噬细胞周期食管癌细胞
- siRNA干扰ERK1/2表达对食管癌细胞ezrin基因的转录调控作用
- 2010年
- 目的检测siRNA干扰细胞外信号调节激酶ERK1/2基因表达对ezrin基因的转录调控作用,探讨食管癌细胞ezrin基因的表达调控机制。方法采用定量RT-PCR技术,检测转染ERK1/2siRNA对食管癌EC109细胞ERK1/2和ezrin基因mRNA表达水平的影响;采用双荧光素酶报告基因分析系统,检测siRNA干扰ERK1/2表达对EC109细胞ezrin基因启动子活性的影响。结果在食管癌EC109细胞中,转染ERK1/2siRNA,降低ERK1/2和ezrin基因的mRNA表达水平以及ezrin基因启动子活性。结论 ERK1/2对食管癌细胞ezrin基因的转录具有调控作用。
- 高书颖李恩民陆晓峰杜则澎许丽艳
- 关键词:EZRIN基因食管癌细胞定量RT-PCR细胞外信号调节激酶1/2
- 食管癌细胞ezrin基因启动子TPA反应性的研究
- 2009年
- 背景与目的:研究食管癌细胞ezrin基因启动子的TPA反应性以及TPA诱导ezrin基因转录的MAPK信号转导途径。材料与方法:应用转录因子数据库分析预测ezrin基因-87/+134序列的潜在转录因子结合位点和TPA反应元件;采用双荧光素酶报告基因分析系统,检测ezrin基因-87/+134序列的启动子活性和TPA反应性,TPA反应元件结合蛋白Sp1和AP-1对ezrin基因的转录激活作用,以及MAPK抑制剂对TPA诱导激活的ezrin基因转录的抑制作用。结果:ezrin基因-87/+134序列存在潜在TPA反应元件,具有启动子活性;5ng/mlTPA显著增强ezrin基因启动子活性(P<0.01);Sp1和AP-1对ezrin基因具有转录激活作用;MEK1/2特异性抑制剂U0126和PD98059降低TPA诱导的ezrin基因转录激活作用。结论:食管癌细胞中,ezrin基因启动子具有TPA反应性;TPA可能通过MEK/ERK1/2磷酸化Sp1/AP-1途径调控ezrin基因转录。
- 高书颖李恩民杜则澎陆晓峰许丽艳
- 关键词:EZRIN基因食管癌细胞启动子活性
- 转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用被引量:3
- 2009年
- 目的:明确转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用。方法:将转录因子表达载体CMV-Sp1和CMV-Sp3分别转染食管癌EC109细胞,采用定量RT-PCR和Western blot技术检测过表达转录因子Sp1和Sp3对ezrinmR-NA和蛋白表达的影响;将ezrin基因启动子驱动的报告基因表达载体与内参照质粒pRL-TK和转录因子表达载体共转染EC109细胞,采用双荧光素酶报告基因分析系统检测转录因子Sp1和Sp3对ezrin基因启动子的激活作用以及这种激活作用是否依赖于ezrin基因的Sp1结合位点-75/-69。结果:过表达转录因子Sp1和Sp3显著提高EC109细胞ezrinmRNA和蛋白表达水平以及启动子活性。Sp1和Sp3增强ezrin基因启动子活性的作用位点不同,只有Sp1通过-75/-69位点调控ezrin基因启动子活性。结论:转录因子Sp1和Sp3可调控EC109细胞ezrin基因的表达。
- 高书颖李恩民杜则澎陆晓峰许丽艳
- 关键词:EZRIN基因食管癌细胞转录因子
- 食管癌中Fascin蛋白异常过表达的临床意义、功能、分子作用机制与分子调控机制研究被引量:6
- 2016年
- 肿瘤流行病学调查结果表明,我国是食管癌高发国,全球的食管癌病例约50%,甚至有些年份>50%发生在我国。广东省潮汕沿海地区是我国六大食管癌高发区之一,而且还是唯一的沿海食管癌高发区,地区特色十分鲜明。1998年以来,立足于潮汕,我们实验室主要围绕Ezrin、Fascin、LCN2、LOXL2和DSC2等细胞骨架结合蛋白,在食管癌中异常表达的临床意义、功能、分子作用机制与分子调控机制开展系列研究。在本文中,我们集中于Fascin,同时结合其他实验室的相关研究结果,予以综述。
- 李恩民谢剑君曾发敏张海华荣举陆晓峰杜则澎吴炳礼侯健石宏顺吴健谊张丕显谢仰民沈健解文明陶立华许丽艳
- 关键词:FASCIN分子作用机制肿瘤流行病学EZRIN食管上皮