陈凤娇
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 用于异种移植的新型基因改造猪的培育被引量:1
- 2014年
- 目的培育用于异种移植的新型基因改造猪,在α-Gal基因敲除以及膜辅蛋白CD46、血栓调节蛋白(TM)基因转入的基础上,进一步将Ⅱ类反式激活因子基因N端缺失显性负向(CⅡTA-DN)基因转入猪胎儿成纤维细胞,以抑制猪白细胞抗原(SLA)Ⅱ类分子的表达。方法设计合成博来霉素(Zeocin)抗性基因片段,并将其与含有CⅡTA-DN基因的pST205载体连接,构建置于人Tie2增强子和CMVβ-actin启动子下游的pNMU105/CⅡTA-DN表达载体,将线性化的pNMU105通过脂质体转染法转入已经敲除了α-Gal并转入CD46、TM基因的猪胎儿成纤维细胞181B(DKO/CD46/TM)。Zeocin抗性筛选转染pNMU105质粒的181B细胞,PCR方法检测CⅡTA-DN基因在181B细胞中的转入,获得阳性单克隆并进行核移植,得到DKO/CD46/TM/CⅡTA-DN转基因猪。取仔猪的耳缘组织裂解后进行基因鉴定。结果成功设计Zeocin抗性基因片段并构建pNMU105/CⅡTA-DN表达载体,经过质粒转染和Zeocin抗性药物筛选获得多株阳性单克隆,顺利通过核移植得到转基因猪。仔猪耳缘组织经PCR鉴定,在592 bp位置检测到预期条带,证明均为CⅡTA-DN转基因阳性。结论通过新型基因改造猪的培育,在抑制超急性排斥反应和补体反应、降低凝血和人CD4+T细胞免疫反应的理论基础上进行了转基因模型猪的构建,为异种移植中更加有效地减少免疫损伤、提高移植器官的存活做出了新的尝试。
- 李倩坤王盈张曼玲杨海元程俊霖赵丽华任子健陈凤娇万振昆张纬李荣凤戴一凡
- 关键词:异种移植
- 应用TALENs以及CRISPR/Cas9技术构建B细胞缺失免疫缺陷猪模型
- 背景:目前应用于临床治疗的多克隆抗体主要来源于志愿者捐献,但是靠志愿者捐献来供应多克隆抗体临床使用受多方面的限制。比如,捐献者可捐献血量较少;具有交叉感染的风险;种类不全,从伦理学角度,很多病毒等致病抗原并不能用来免疫人...
- 陈凤娇
- 关键词:医学免疫多克隆抗体基因修饰
- 猪身上长出人体器官
- 2016年
- 为了在猪、牛和其他动物体内孕育出可用于器官移殖的人类器官,生物学家正在努力迈出第一步。
- 胡安·卡洛斯·伊斯皮苏亚·贝尔蒙特陈凤娇杨海元
- 关键词:人体器官生物学家