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孕妇CD36抗原表达筛查及基因测序分析: 2018年; 目的了解孕妇CD36抗原的表达及其基因型。方法对在本中心做抗体筛查及血小板抗体检测的200名孕妇,采用流式细胞术检测其血小板及单核细胞上的CD36表达,并对其中血小板或单核细胞上CD36抗原缺失者做基因测序分析。结果本组孕妇CD36缺失表达率为1.5%（3/200）,3例CD36缺失均为Ⅱ型缺失（只有血小板上CD36缺失）,未见CD36Ⅰ型缺失（血小板和单核细胞上CD36都缺失）。3例CD36缺失表达者基因测序分析：2例发生CD36基因突变,其突变位点分别是Exon12 A1163T和Exon5 329-330del AC,为常见的基因突变类型;1例为正常CD36基因型。结论孕妇CD36表达缺失率与中国普通人群相似,缺失者CD36基因发生了基因突变。; 邵媛徐秀章丁浩强刘静王嘉励夏文杰邓晶陈大伟陈扬凯叶欣; 关键词：CD36 抗原表达基因突变孕妇流式细胞术

一种鼠源性抗鼠CD36单克隆抗体的制备方法: 本发明涉及一种鼠源性抗鼠CD36单克隆抗体的制备方法，属于基因工程技术领域；具体包括CD36基因敲除小鼠基因型鉴定、血小板cDNA的PCR扩增、TA克隆及蓝白斑筛选、细胞转染及G418筛选、流式鉴定、Western Bl...; 徐秀章陈大伟叶欣夏文杰付涌水; 文献传递

广州地区伊朗献血人群CD36表型筛查及基因型鉴定被引量：2: 2017年; 目的了解广州地区伊朗籍献血者CD36表型及基因型。方法对2016年在广州血液中心捐献机采血小板的53例伊朗人献血者标本,应用流式细胞仪分别检测血小板和单核细胞上CD36抗原的表达。对CD36抗原表达异常者提取DNA,采用PCR-SBT测序做CD36的基因型鉴定并做基因突变分析。结果本组伊朗人群的CD36抗原表达异常率7.55%(4/53),其中2例的CD36抗原在血小板上表达含量低,1例为血小板和单核细胞上均无表达(即CD36Ⅰ型缺失),1例为单核细胞上CD36表达量低,由此得出CD36缺失表达的频率为1.89%(1/53)。PCRSBT法分析:CD36抗原表达异常4例的CD36基因型中,血小板上低表达CD36抗原的2例发生基因突变,分别是exon 10-975T/G和exon11 del CTA,且均为新的基因突变;2例CD36基因型正常。结论本组伊朗献血人群里CD36抗原表达异常者中存在新的基因突变,其对CD36抗原表达的影响尚需进一步认证。; 王嘉励刘静丁浩强徐秀章邓晶邵媛陈扬凯夏文杰陈大伟叶欣; 关键词：伊朗人

一种高选择性、高效的牛视网膜微血管内皮细胞培养方法被引量：5: 2012年; 目的建立一种高效、可行、特异性高的牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)培养方法。方法取新鲜牛眼,分离视网膜并用DMEM进行冲洗、匀浆剪碎,过75μm筛,将滤网上滤渣转移至50ml离心管,用Ⅰ型胶原酶、DNaseⅠ及蛋白酶等多种酶混合液消化20min,人血清中和后,过46μm网筛并冲洗,离心5min,将组织扣在培养皿中,转入15ml离心管,用10%人血清含生长因子ECGS的DMEM培养液培养于25cm2,选择性培养视网膜血管内皮细胞,接种于明胶包被培养瓶中,采用ECGS配合肝素培养液促进内皮细胞生长,观察细胞形状生长特性,并用免疫化学荧光方法进行鉴定。结果选择性培养视网膜微血管内皮细胞成单层、镶嵌铺路石状生长,Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测为阳性纯度均大于95%以上,将细胞种在凝固的基质胶表面,12～18h形成官腔结构。结论本方法过程简单、可靠,培养的内皮细胞纯度高,生长状态良好,稳定传代,为视网膜血管生成疾病研究建立了模型。; 王征齐炜炜陈少波戴智育陈大伟程锐高国全杨霞; 关键词：视网膜微血管内皮细胞细胞培养

广州地区无偿献血人群中HLA及HNA抗体筛查及特异性分析: 陈大伟徐秀章付涌水夏文杰叶欣邓晶丁浩强陈扬凯邢媛刘静王嘉励

鼠源性抗人CD36单克隆抗体131-G1（G2a）和176-B8（G1）: 本发明涉及鼠源性抗人CD36单克隆抗体131‑G1（G2a）和176‑B8（G1）的制备方法，属于基因工程技术领域；具体的单克隆抗体制备过程包括CD36基因敲除小鼠基因型鉴定、人血小板cDNA的PCR扩增、TA克隆及蓝白...; 陈大伟徐秀章夏文杰叶欣付涌水; 文献传递

广州地区209例HLA-Ⅰ类抗体引起的血小板输注无效患者抗体特异性及epitopes分析被引量：3: 2022年; 目的了解广州地区人类白细胞抗原(HLA)⁃Ⅰ类抗体所致血小板输注无效(PTR)患者的HLA抗体特异性及高频抗原决定簇。方法采用ELISA方法对209例PTR患者的HLA⁃Ⅰ类抗体进行检测。运用Luminex检测平台,通过HLA特异性抗体检测试剂盒(LIFECODES LSA^(TM)CLASS I)检测患者血清中针对HLA⁃A、B及Cw的特异性抗体;经MATCH IT!和HLA Matchmaker软件分析,获得患者HLA⁃Ⅰ类抗体特异性及相应epitopes。统计分析PTR患者血清中针对HLA⁃A、B、Cw位点的特异性抗体及epitopes的阳性频率。结果209份HLA⁃Ⅰ类抗体阳性PTR患者标本中共检出95种特异性抗体,其中针对HLA⁃A位点的抗体29种,以A*24:02(42.58%)最常见;检出针对HLA⁃B位点的抗体48种,阳性频率较高的有B*27:08(50.72%)、B*82:02(45.45%)、B*15:12(44.98%)、B*07:02(44.02%)、B*35:01(42.58%)、B*35:08(42.58%)和B*27:05(42.11%);针对血小板低表达Cw位点的抗体仅检出18种,常见C*07:01(19.62%)和C*07:02(18.66%)。运用HLA Matchmaker软件分析,共检出182种HLA⁃I类epitopes,以163 LG(19.28%)、71 KA(16.27%)、30 G(15.06%)、163 EW(11.45%)和127 K(11.45%)相对高频。结论获得广州地区PTR患者体内HLA⁃Ⅰ类抗体的分布特点,对血小板供者库的建立以及Eplet配型方法的开展提供理论依据。; 陈扬凯徐秀章叶欣邓晶丁浩强夏文杰邵媛刘静陈大伟许耀日; 关键词：血小板输注无效抗原决定簇

一株鼠抗人CD36单克隆抗体的制备及应用被引量：2: 2020年; 目的本研究通过已建立的稳定表达人血小板CD36的HEK293T细胞系,制备鼠源的抗人CD36单克隆抗体并进行特性鉴定。方法利用已经建立的稳定表达人血小板CD36的HEK293T细胞系对CD36(-/-)C57小鼠进行免疫,取脾脏与小鼠骨髓瘤细胞融合,筛选出阳性克隆。纯化单克隆抗体后,利用Western blot检测抗体结合活性。利用小鼠IgG类/单抗亚型鉴定试剂鉴定单克隆抗体的抗体亚型。通过流式细胞检测和血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测(MAIPA)鉴定其诊断应用价值。结果经筛选后得到一株杂交瘤细胞,抗体亚型为IgG2a,轻链为κ链,Western blot试验表明该单克隆抗体特异性识别人血小板CD36抗原。MAIPA结果显示,与商业化单克隆抗体FA6-152相比,该单克隆抗体灵敏度更高。结论成功制备了一种鼠抗人CD36单克隆抗体,为临床鉴定CD36抗体,筛选CD36阴性献血员提供了新的工具,也为今后进一步研究CD36在血液免疫疾病中作用机制提供了实验基础。; 陈大伟徐秀章夏文杰邵媛王嘉励刘静邓晶陈扬凯丁浩强叶欣; 关键词：CD36 单克隆抗体

CD109表达量及保存方法的相关性研究: 2016年; 目的分析中国南方人群HPA-15基因型分布频率,研究血小板上HPA-15抗原表达量。寻找较好的血小板保存方法以维持HPA-15的高表达量,为单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测HPA-15同种抗体提供合适的供者血小板。方法 1)随机选取广州血液中心的健康血小板单采献血者109名,留取EDTA抗凝管全血。SSPPCR方法检测HPA-15基因型。流式细胞术检测血小板上HPA-15抗原表达量。2)另随机选取健康献血者的单采血小板67例,将每份血小板分为2份,1份重悬于EDTA-PBS中放于4℃保存作为检测组A,另1份留于血小板辫子中放于血小板振荡仪中作为检测组B,在d 0、1、2、3、7、14检测2组血小板上HPA-15的检测含量,比较2组HPA-15含量的变化。结果 1)109名随机健康献血者HPA-15a和HPA-15b的基因频率是0.495和0.505。流式细胞术检测HPA-15抗原的MFI值的范围2.44-20.4,阳性率3.2%-86.7%。不同HPA-15基因型之间,HPA-15抗原表达量有统计学差异(P<0.05)。2)分析比较AB这2个组,随着测量时间点的推移,2组HPA-15的表达量均有降低,但检测组B中HPA-15的表达含量高于检测组A,且2组的MFI值有统计学差异(P<0.05)。结论 HPA-15a和HPA-15b的基因分布频率相近,HPA-15抗原表达含量整体水平偏低且个体差异性大。体外保存方式下,HPA-15的表达含量随着时间推移逐渐降低,4℃保存方式下HPA-15含量降解尤为明显。血小板振荡仪中保存血小板的方法为MAIPA检测HPA-15抗体提供更合适的血小板抗原。; 邵媛叶欣徐秀章夏文杰王嘉励丁浩强邓晶陈扬凯刘静陈大伟; 关键词：流式细胞术

广州地区无偿献血人群中HLA及HNA抗体筛查及特异性分析: ＜正＞目的了解广州地区无偿献血者中HLA及HNA抗体的分布和特异性,评估献血者血液及其成分所含HLA/HNA抗体引起免疫性输血不良反应的风险。方法随机收集广州地区无偿献血者标本1 014（人）份,其中男性献血者454（人...; 陈大伟夏文杰叶欣邓晶丁浩强陈扬凯邵媛刘静王嘉励徐秀章付涌水; 文献传递

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陈大伟

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