陈镇洲
- 作品数：52 被引量：145H指数：7
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省科研条件建设项目国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 核转染增强型绿荧光蛋白对兔原代骨髓基质细胞向神经细胞方向分化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究以最近发展起来的核转染技术转染增强型绿荧光蛋白（EGFP）质粒进行基因修饰对兔原代骨髓基质细胞向神经细胞方向分化的影响。方法从兔股骨抽取骨髓，密度梯度离心法获取原代骨髓基质细胞。以Nucleofector^TM技术转染pEGFP—C2（EGFP组），以同期培养未转染的细胞作为对照组（control组）。以“CYTOKINE·神经干细胞培养基”＋10％胎牛血清诱导BMSCs向神经细胞方向分化。流式细胞仪检测转染效率。比较两组细胞的生长增殖以及Nestin、NSE、GFAP抗原的表达情况。结果在转染后24h成功发现EGFP的表达。两组细胞具有相似的形态学变化以及生长曲线。诱导18d，两组细胞NSE、GFAP的表达比例无统计学意义。结论Nucleofector^TM技术是一种简易而高效的转染兔原代骨髓基质细胞的方法；EGFP可以作为兔骨髓基质细胞有效的基因表达标记；核转染pEGFP-C2对兔原代骨髓基质细胞体外增殖及向神经细胞方向分化无明显影响。
- 陈镇洲徐如祥姜晓丹杜谋选黄涛蔡颖谦
- 关键词：绿色荧光蛋白骨髓基质细胞分化
- 骨髓基质细胞及血管内皮祖细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能恢复的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察经静脉移植骨髓基质细胞（BMSCs）及血管内皮祖细胞（EPCs）后，缺血性脑损伤大鼠神经系统功能恢复情况。方法40只健康成年Wistar大鼠按随机数字表法分为模型组、移植BMSCs组、移植EPCs组、移植BMSCs／EPCs组，每组10只。线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，造模后24h取1mLBMSCs、EPCs、BMSCs／EPCs细胞悬液（3×10^6个／mE）分别经尾静脉注射移植入后3组大鼠，模型组大鼠注射等量生理盐水。移植前、移植后1、7、14、28d，采用旋转试验、躯体感觉试验、神经系统功能评分mSS）评估各组大鼠神经功能的恢复情况。移植后28d，免疫荧光染色检测各组大鼠缺血脑组织的微血管密度（MVD）。结果移植后第7天，旋转试验显示移植BMSCs／EPCs组大鼠旋转时间长于其他3组，躯体感觉试验和NSS评分分别显示移植BMSCs／EPCs组大鼠移物时间和NSS评分低于其他3组，差异有统计学意义（P〈0．05）；移植后28d，免疫荧光染色检测结果显示缺血脑组织MVD明显高于其他3组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论静脉BMSCs／EPCs联合移植可增强缺血性脑损伤功能的恢复。
- 何旭英陈镇洲段传志寇盛斌王双全李明徐如祥
- 关键词：大脑中动脉闭塞骨髓基质细胞血管内皮祖细胞细胞移植
- 丘脑中央中核毁损治疗癌症顽痛的实验和临床研究
- 刘灵慧徐如祥陈善成陈镇洲项永生张世忠李卫
- 该课题的创造性和先进性主要有以下三点：1.在临床用于镇痛的常用脑内核团CM、PF、VPL、和CM+cg，经上述毁损前、后痛阈的实验，经动物实验验证了每个核团均能镇痛，其中以VPL的镇痛效果最好。同时表明复合的脑内核团CM...
- 关键词：
- Neurocan基因蛋白表达及其抗体制备与检测的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的制备Neurocan蛋白，用此蛋白免疫动物制备抗血清，并对抗血清进行检测，最终使待参与DNA疫苗构成的Neurocan蛋白所产生的抗体能与脑内创伤区的相应抑制性蛋白抗原结合，从而减轻抑制因子对神经生长的抑制作用，促进神经再生。方法合成Neurocan基因，构建原核表达质粒PET30a-Neurocan，转化大肠杆菌BL21，异丙基-β—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达目的蛋白，并经SDS—PAGE、Western blot鉴定。Neurocan蛋白免疫兔制备免疫血清。ELISA法检测抗血清效价，以兔免疫前血清为阴性对照：Western blot检测抗血清特异性，以免疫血清为-抗，山羊抗兔-AP为二抗，NBT／BCIP显色。结果合成的Areurocart基因经酶切鉴定、PCR鉴定及测序鉴定，显示序列正确。原核表达Neurocan蛋白经过SDS-PAGE鉴定，条带大小约为55000，与计算出来的大小一致；经Westem blot鉴定，目的蛋白能与his抗体特异性结合，说明是Neurocan基因的表达产物。抗血清经ELISA法检测，抗血清效价达到1：100万；经Western blot检测，目的条带明显。结论Neurocan蛋白原核表达成功；通过Neurocan蛋白免疫兔可得到特异性抗体，此抗体能与Neurocan蛋白特异性结合，为DNA疫苗的进一步研制奠定了基础。
- 杜谋选姜晓丹徐如祥陈镇洲吕俊
- 关键词：原核表达抗血清
- 大鼠急性脑缺血后CD4^+CD25^+调节性T细胞、Foxp3表达及其意义被引量：15
- 2012年
- 目的动态观察大鼠急性脑缺血后不同时期外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和脑组织中Foxp3的表达,探讨其在急性缺血性卒中病理生理演变过程中的作用。方法 48只Wistar大鼠按随机数字表法分为缺血组和假手术组。参考改良的Zea-Longer插线方法将缺血组大鼠制作成右侧大脑中动脉线栓脑缺血动物模型。采用流式细胞术和免疫组化染色检测造模后1、3、7、14 d时大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞表达和脑组织中Foxp3表达,同时采用改良NSS神经功能评分观察大鼠行为学变化。结果缺血组和假手术组大鼠神经功能缺损评分在模型制备后逐渐下降(P<0.01)。流式细胞术显示脑缺血后1、3 d时缺血组大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的表达与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05),7、14 d时表达明显高于假手术组(P<0.05),且与大鼠的神经功能评分呈负相关(r=-0.68,P=0.01)。免疫组化显示脑缺血后1 d时缺血组大鼠脑组织中即可观察到Foxp3表达,且主要集中在缺血灶区域,在未缺血侧也可观察到Foxp3表达,但表达量较少,而假手术组脑组织中未见Foxp3表达。结论 CD4+CD25+调节性T细胞参与了大鼠急性脑缺血后炎症免疫反应的发生发展过程,且在脑缺血后1 d时便开始参与脑缺血性损伤的免疫调节,这种免疫调节对脑细胞有着保护作用。
- 陈瑞清谭盛陈健郭阳李粲陈镇洲
- 关键词：脑缺血CD4+CD25+调节性T细胞FOXP3
- 人类GAD67基因转染骨髓基质源性神经干细胞及初步检测被引量：1
- 2007年
- 目的利用转基因技术将人类谷氨酸脱羧酶（GAD）67基因转染骨髓基质源性神经干细胞仍MSCs-D-NSCs），获得GAD67修饰的成体专能干细胞。方法以PCR、双酶切及测序鉴定pEGFP-C2-GAD67和pcDNA3.1-GAD67重组子；利用密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs并促其向NSCs方向分化，将编码人类GAD67基因的真核表达质粒pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3．1-GAD67分别转染BMSCs-D-NSCs，荧光显微镜下观察并用流式细胞仪检测转染效率。结果pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD6，均可扩增出约1800bp目的条带，经双酶切和基因测序证实。荧光显微镜下观察可见大量绿色荧光细胞，两种载体转染效率分别为39.3％和40.5％。结论pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD67真核表达载体重组正确，利用脂质体介导人类GAD6，基因能有效转染BMSCs-D-NSCs，为进一步观察其GAD67基因和蛋白的表达提供了前提条件。
- 马宏伟徐如祥姜晓丹刘智良张雪陈镇洲郭爱林苏健王娆张冉黄伟黄永安
- 关键词：转染骨髓基质细胞神经干细胞
- 血管内皮祖细胞及其在脑缺血中的作用被引量：1
- 2006年
- 成年个体的骨髓中包含一种前体细胞,它能迁移至外周血并分化为成熟血管内皮细胞,故称为血管内皮祖细胞(EPCs)。EPCs具有良好的增殖潜能,并参与血管内皮修复、缺血器官以及肿瘤组织的新血管形成。脑梗死发生后,在缺血部位存在着新血管形成,此过程同样存在着EPCs的参与。血液循环中EPCs数量或质量下降是中风发生的重要原因之一,而脑缺血后神经功能的恢复与缺血部位新血管的形成密切相关。因此,EPCs的研究对于脑缺血的治疗打开一扇新奇之门。本文就血管内皮祖细胞的生物学特性、生理及病理学意义以及在脑缺血治疗中的作用作一综述。
- 陈镇洲徐如祥姜晓丹
- 关键词：血管内皮祖细胞脑缺血新血管形成
- 自体血管内皮祖细胞治疗缺血缺氧性脑损伤被引量：5
- 2013年
- 背景:缺血缺氧性脑损伤后的神经再生、神经功能的恢复与缺血部位新生血管的形成和重塑有着密切的关系。血管内皮祖细胞参与出生后缺血组织的血管新生及修复,促使血液循环再通和氧气等营养物质的供应,为神经功能的恢复提供微环境。目的:探讨自体血管内皮祖细胞治疗缺血缺氧性脑损伤的可行性、有效性及安全性,探索改善脑损伤患者神经功能修复的新方法。方法:应用计算机检索PubMed、ScienceDirect、Springerlink、CNKI、万方等数据库近10年的相关文献。英文关键词为"EPCs、endothelial progenitor cell、stroke"等,中文关键词为"内皮祖细胞、干细胞移植、脑卒中"等,选择内容与血管内皮祖细胞治疗缺血缺氧性疾病相关的文献,同一领域文献则选近期发表的或发表在权威杂志上的文章,共纳入43篇参考文献。结果与结论:脑缺血后神经再生、神经功能的恢复与缺血部位新生血管的形成和重塑有着密切的关系,内皮祖细胞参与出生后缺血组织的血管发生及修复,促进血液循环及氧气等营养物质的供应,为神经功能的恢复提供微环境。自体血管内皮祖细胞治疗缺血缺氧性脑损伤是可行的、安全的、有效的,但仍需大量的生物学及动物实验为其临床应用提供客观的理论依据。
- 崔立玲黄国志陈镇洲郭阳
- 关键词：干细胞内皮祖细胞干细胞移植缺血缺氧性脑损伤神经康复
- 高温高湿环境下运动对战士血红蛋白的影响被引量：2
- 2004年
- 周青徐如祥张世忠余俐陈镇洲郭再玉
- 关键词：血红蛋白类
- 骨髓基质细胞向神经干细胞分化及临床应用初步研究
- 戴宜武徐如祥赵春平姜晓丹徐强杨志军李刚王伟周青郭再玉金澎柯以铨成文平代广辉陈镇洲
- 一.简要技术说明：1.应用领域：神经再生；神经系统损伤；神经系统退行性病变的治疗。2.技术原理：神经再生问题一直是神经医学领域的重大问题，神经细胞死亡后不能再生的观念已经被广泛接受。但近年来成体脑内神经干细胞的发现打破了...
- 关键词：
- 关键词：神经干细胞骨髓基质细胞自体移植
