陶剑锋 作品数:33 被引量:104 H指数:6 供职机构: 北京市创伤骨科研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市科技新星计划 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
急性肩袖损伤手术修复时机的初步组织学和生物力学研究 被引量:3 2012年 目的应用兔建立急性肩袖损伤模型,研究不同时间手术修复对冈上肌腱-骨愈合、腱-骨界面胶原纤维的生长分布以及生物力学特性的影响。方法取90只骨骼成熟的雄性新西兰大耳白兔,均行右侧冈上肌切断术,建立急性肩袖损伤模型。随机分为3组:早期修复组,术后1周行腱-骨缝合;晚期修复组,术后4周进行修复;不修复组,作为对照。分别于术后2、4、8周通过HE染色观察腱-骨愈合情况,通过苦味酸天狼星红染色计算Ⅰ型/Ⅲ型胶原面积比,代表胶原纤维生长分布情况;测量术侧和健侧冈上肌断裂的最大负荷,并计算二者的百分比。结果各组均未观察到明显的冈上肌脂肪浸润和萎缩变性。早期和晚期修复组在8周时形成了新的冈上肌止点。在早期修复组和晚期修复组,8周时Ⅰ型/Ⅲ型胶原比(2.02±0.77和2.06±0.58)显著大于2周时(1.10±0.24和1.14±0.50;t=3.082、3.655,P〈0.01)。各组冈上肌术侧/健侧最大负荷百分比在2、4及8周的情况:早期修复组(38%±11%、66%±7%、89%±4%)和晚期修复组(41%±16%、63%±7%、89%±9%)均显著高于不修复组(14%±6%、32%±4%、56%±12%),差异具有统计学意义(早期修复组:t=3.311、8.549、5.719;晚期修复组:t=3.713、8.063、6.044;t9〈0.01);各组在8周时的冈上肌术侧/健侧最大负荷百分比显著高于4周(t=3.878—4.613,P〈0.01)和2周时(t=7.158—10.024,P〈0.01)。结论急性肩袖损伤在4周内修复可形成新止点,提高腱-骨界面Ⅰ型胶原的比例,恢复冈上肌的生物力学强度。 卢耀甲 鲁谊 朱以明 张蔷 黎广平 陶剑锋 姜春岩关键词:肩关节 回旋套 修复外科手术 骨组织工程PLGA/TCP复合材料的性能研究 被引量:9 2003年 骨组织工程的支架要求有与人骨在功能梯度上相一致的材料结构、几何结构和生理功能。PLGA/TCP复合材料具有适用于骨组织工程支架的綜合性能。以快速成形技术低温沉积工艺的成形效栗来评价材料的成形性能,以体外降解试验来评价材料的降解性能,以国家标准的方法来评价材料的细胞毒性,对PLGA和TCP不同配比下的性能进行了研究,发现TCP含量的增加有利于降低材料的细胞毒性,加快了材料的降解,但同时降低了材料的成形性能。从骨组织工程的临床应用来看,低的细胞毒性是需要首先得到保证的,成形性能則通过其他方式来改善。 费小琛 颜永年 熊卓 孙磊 陈磊 陶剑锋关键词:骨组织工程 快速成形技术 细胞毒性 兔软骨细胞与骨髓基质细胞的平面共培养:两者培养比例筛选 被引量:5 2010年 背景:骨髓基质细胞一定条件下可以分化为软骨细胞,但目前还缺少将软骨与骨髓基质细胞平面共培养的深入探讨。目的:拟明确骨髓基质细胞与软骨细胞共培养时比例的选择、细胞增殖活性、软骨特异性蛋白表达的规律,用于细胞移植的最佳时间和传代次数。方法:软骨细胞与骨髓基质细胞的分离培养,传代后分为5组:单纯软骨细胞组;共培养组,软骨细胞与骨髓基质细胞7:3,5:5,3:7组;以及单纯骨髓基质细胞组。传代至第4代(G4),倒置相差显微镜观察各组细胞在不同传代时期的细胞形态,MTT实验检测细胞增殖活性,甲苯胺蓝与阿利新蓝染色,细胞免疫化学法检测Ⅱ型胶原的表达。结果与结论:共培养各组在各个时期细胞表型正常。G1-G3代细胞增殖活跃,G4代细胞增殖能力下降。共培养各组甲苯胺蓝与阿利新蓝染色以及Ⅱ型胶原表达在G2和G3代均较高。综合各指标认为,以软骨细胞与骨髓基质细胞的比例为5:5,3:7组为最佳。软骨细胞与骨髓基质细胞平面共培养,保持了软骨细胞的形态和蛋白表达特性,如进行细胞移植,选取软骨细胞与骨髓基质细胞5:5或3:7的比例为最佳。 孙磊 綦惠 陈磊 陈海燕 江健 陶剑锋 杰永生 高新生 Peter I.Lelkes关键词:软骨细胞 骨髓基质细胞 共培养 蛋白聚糖 骨质疏松腰椎椎弓根螺钉方向对内固定稳定性的影响 被引量:2 2009年 目的初步探讨常用的椎弓根螺钉置入方法对骨质疏松椎体中螺钉稳定性的影响。方法从尸体中获取6节腰椎椎体经DEXA和QCT检测骨密度值,证实为骨质疏松后在计算机导航下按随机分组的方法向12个椎弓根中置入不同方向的椎弓根螺钉,使用MTS-858生物力学仪脊柱力学测试平台进行±250 N的循环负荷疲劳测试,记录负荷循环中的螺钉位移,计算系统的刚度系数并进行对比分析。结果M agerl法在负荷循环中的位移明显高于Krag法和尾向法(P<0.01);M agerl法的松动程度也明显大于Krag法和尾向法(P<0.01)。结论对于骨质疏松患者的腰椎后路椎弓根螺钉内固定手术,常用的螺钉平行上终板的技术不能提供最好的生物力学稳定性。 袁强 行勇刚 陶剑锋 陈大福 田伟关键词:骨质疏松 腰椎 内固定器 计算机导航 脱细胞真皮基质的改建及其作为软骨细胞移植载体在兔软骨缺损修复中的应用 被引量:9 2008年 目的:探讨脱细胞真皮(acellular dermal matrix,ADM)经改建后作为软骨细胞移植载体的可行性。方法:取新生小牛背部真皮组织,分别用自制脱细胞剂和表面活性剂对其进行脱细胞处理后,观察得出自制脱细胞剂脱细胞的效果良好,但脱细胞后的胶原纤维结构需要改建;将自制脱细胞剂脱细胞后的真皮组织分别用按一定浓度配比的消化液和胃蛋白酶消化,发现经配比消化液改建后的胶原纤维表面光滑、孔隙均匀,符合软骨细胞移植载体的要求;比较戊二醛和水溶性交联剂对改建后脱细胞真皮基质的交联效果,可见水溶性交联剂交联后的ADM载体植入大鼠皮下后,其生物相容性良好;用生长因子对改建和交联后的ADM进行纤维表面修饰,然后接种乳兔软骨细胞,观察细胞粘附及生长情况;最后将接种有兔自体软骨细胞的ADM植入兔胫骨软骨缺损部位,术后定期取材观察修复效果。结果:(1)经戊二醛交联后的ADM植入大鼠皮下后有强烈的炎症反应,并有组织出血坏死;而经水溶性交联剂交联的ADM的组织相容性较好。(2)在植入接种有自体软骨细胞的ADM24周后,大白兔胫骨的软骨缺损修复完好,附和的细胞能够存活且增殖,ADM本身基本降解。结论:经脱细胞、纤维改建、交联及生长因子修饰的ADM孔隙均匀,组织相容性好,适于细胞粘附及长期生长。ADM胶原支架在兔体内可基本降解,未见排异反应,移植24周后骨缺损修复。 江健 孙磊 冯华 陈磊 陶剑锋 Peter I.Lelkes关键词:脱细胞真皮 软骨细胞 软骨修复 胶原蛋白酶诱发兔膝关节骨性关节炎软骨组织中HIF2α表达上调 被引量:3 2015年 目的研究低氧诱导因子HIF2α在胶原蛋白酶诱发兔膝关节骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)模型中的表达情况,为下一步以HIF2α为靶点进行OA靶向治疗研究提供实验基础。方法取健康16周龄雄性日本大耳白兔24只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组和胶原蛋白酶诱发OA(Collagenase-induced OA,CIOA)组。利用右侧膝关节腔内注射II型胶原蛋白酶(剂量为0.5 mg)方法建立膝关节OA模型。给药后24周处死动物,采用大体形态观察与HE、甲苯胺蓝染色观察关节软骨退变程度,应用微型CT(Micro-CT)观察软骨下骨改变情况,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)、蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)和实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)检测软骨中HIF2α表达情况。结果大体形态观察结果显示,CIOA组关节面粗糙、糜烂,与溃疡形成,关节囊增厚,滑膜增生。组织病理学检测结果显示,CIOA组关节软骨缺损,软骨细胞数量减少,排序紊乱,有细胞簇聚现象。Micro-CT结果显示,CIOA组软骨下骨可见大量骨赘形成,关节间隙狭窄。IHC结果显示,CIOA组关节软骨中HIF2α蛋白阳性细胞数增加;WB结果显示,CIOA组关节软骨组织中HIF2α蛋白表达显著增加;而qRT-PCR结果显示,HIF2αmRNA表达显著降低。结论在成功建立膝关节OA模型基础上,发现HIF2α在胶原蛋白酶诱发兔膝关节OA软骨中表达上调,其表达调控可能在转录后水平进行。我们的实验结果提示HIF2α特异性抑制剂可能被用于缓解OA发生。 王莹 吴成爱 阎国强 陶剑锋 于志坚 赵丹慧关键词:骨性关节炎 软骨 作为旋转反应器胶原支架的制备及复合软骨细胞修复骨软骨损伤的初步研究 目的:以胶原为原料开发一种小型胶原支架材料,尝试采用旋转反应器来复合软骨细胞,并探讨复合细胞后修复软骨损伤的效果.
方法:成年猪跟腱中提取胶原,制备胶原支架,进行细胞毒性检测和生物相容性分析.将其切成1mm3小... 綦惠 陶剑锋 陈磊 杰永生 孙磊关键词:胶原 一种用于显微CT的样本平台 本实用新型公开了一种用于显微CT的样本平台,包括平行设置的多个放置盘,多个所述放置盘的中心通过连接柱连接在一起,所述连接柱的中心线与所述放置盘垂直设置;所述连接柱的端部连接有固定柄。本实用新型提供的样本平台,设计成三维多... 李玉锦 陶剑锋 王庚文献传递 改建脱细胞真皮基质作为软骨细胞移植载体修复兔软骨缺损(英文) 被引量:1 2009年 背景:脱细胞真皮(Acellular Dermal Matrix,ADM)具有良好的柔韧性、易于修剪,制成微粉状皮内或皮下注射后,可见到成纤维细胞的移入及胶原的沉积,目前己被广泛应用于整形修复临床实践。目的:验证脱细胞真皮经改建后作为软骨细胞移植载体的可行性。设计、时间及地点:对比观察,于2003-08/2007-02在北京大学医学部和北京积水潭医院完成。材料:新生小牛的真皮层由北京元亨圣马生物研究所提供;体质量250g的SD健康成年大白鼠24只,雌雄不限。3月龄的新西兰大白兔36只。方法:①取新生小牛背部真皮组织,进行脱细胞处理,分别用戊二醛和水溶性交联剂进行交联;再用生长因子对其进行纤维表面修饰。②取SD大白鼠,于大鼠脊柱两侧各设计3个长方形皮瓣,分别植入两组交联后的脱细胞真皮基质。术后2,6,12周取出植入物。③取新西兰大白兔,分为实验组和对照组,从其左侧关节面取原代软骨,分离软骨细胞并接种于复合后的ADM上进行培养。将实验组兔右侧后肢造成软骨缺损,植入含有自体软骨细胞的ADM,再将生物胶滴加于载体表面;对照组兔右侧后肢造成软骨缺损后分层缝合伤口。分别于第4,12,24周取材,对照组每次取2只,实验组每次取5只。主要观察指标:①交联效果的比较。②兔软骨缺损修复结果。结果:①经戊二醛交联后的ADM植入大鼠皮下后有强烈的炎症反应,并有组织出血坏死;而经水溶性交联剂交联的ADM的组织相容性较好。②在植入接种有自体软骨细胞的ADM24周后大白兔股关节的软骨缺损修复完好,附和的细胞能够存活且有增殖,ADM本身基本降解。结论:经脱细胞及纤维改建和交联及生长因子修饰的ADM孔隙均匀,组织相容性好,适于细胞黏附及长期生长。ADM胶原支架在兔体内可基本降解,未见排异反应,移植24周后见骨缺损修复。 江健 孙磊 冯华 陈磊 孟淑琴 冯正 陶剑锋 Peter I.Lelkes关键词:脱细胞真皮 软骨细胞 软骨修复 一种用于生物力学机的骨样本固定装置 本实用新型公开了一种由装置本体、底板、塑料挡板、连接螺丝、固定螺栓及多跟钢针组成的用于生物力学机的骨样本固定装置,装置本体为不锈钢板围成的正方形箱体,箱体上部敞口,箱体底部由不锈钢底板封底,底板中心设有纵向垂直的十字形通... 吴成爱 陶剑锋 田伟文献传递