魏春艳 作品数:37 被引量:109 H指数:6 供职机构: 吉林出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 经济管理 更多>>
检疫性昆虫DNA条形码检测技术的研发与应用实例 被引量:6 2015年 【目的】DNA条形码技术是近年来生物分类鉴定的研究热点之一,已成为植物检疫性昆虫鉴定的有力工具。为快速、准确地鉴定口岸截获的昆虫种类,实现"检得出、检得准、检得快"的要求,我们研发了昆虫DNA条形码试剂盒检测技术(Insect DNA barcoding identification kit)。【方法】该检测技术针对出入境植物检疫性及危险性昆虫的主要类群,选择合适的基因片段、设计引物、对目标基因进行扩增测序,找出基因片段上区分每个物种的多态位点规律,作为该物种的鉴定特征并建立数据库,应用于植物检疫性及危险性昆虫的物种鉴定。【结果】以检疫性昆虫木蠹象属Pissodes为例,确定了木蠹象属5种昆虫的多态位点规律(鉴定特征),构建了用于物种鉴定的数据库。通过比对数据库里的鉴定特征,将未知样品鉴定为榛梢木蠹象P.terminalis(相似度100%),与形态鉴定结果一致。本文介绍了检测技术的原理、方法、技术流程及应用实例,并展望了其在有害生物检测中的推广应用前景。【结论】昆虫DNA条形码试剂盒检测技术为建立标准化,准确性高的物种鉴定平台打下基础,有着良好的推广应用前景。 叶兼菱 安榆林 钱路 杨晓军 徐梅 吴翠萍 魏春艳 牛磊 甘英俊关键词:DNA条形码 植物检疫 防风枯斑病的病原学及药剂敏感性 被引量:4 2018年 试验研究了防风枯斑病的病原学和病菌生物学特性及其药剂敏感性。通过病菌的分离及柯氏证病,获得3株病原菌;结合病原形态特征、培养学特性及r DNA-ITS、TUB2和TEF序列分析,确定引起防风枯斑病的病菌为Diaporthe angelicae。病菌生物学研究表明:菌丝生长及孢子产生的最适温度为25℃,最适p H为8;病菌在以麦芽糖和蔗糖为主要碳源的培养基上生长和产孢最佳;在以天门冬酰胺为主要氮源的培养基上生长最佳。病菌分生孢子在25℃时萌发率最高,孢子的致死温度为35℃;分生孢子在p H 8时萌发率最高;全光照有利于分生孢子萌发。病菌对23种杀菌剂的敏感性测定结果表明:病菌对30%氟菌唑WP、3%己唑醇·27%稻瘟灵EC、40%氟硅唑EC、55%硅唑·多菌灵WP、25%丙环唑EC、30%苯醚甲环唑SC、30%醚菌酯WP、250 mg/L吡唑醚菌酯EC、10%苯醚甲环唑WG、77%硫酸铜钙WP的敏感程度较高,其EC50<0.1 mg/L。 王梦奇 刘丽玲 李海洋 魏春艳 白庆荣关键词:防风 枯斑病 病原鉴定 药剂敏感性 吉林局从进境橡木上截获的8种天牛 被引量:1 2010年 吉林局在对法国进境橡木进行检疫时,检出有害生物3纲13目57科107种,其中天牛科昆虫8种。国内无分布且首次截获的种类包括:截尾丽虎天牛、亚热带虎天牛、栎红天牛、栎天牛。 魏春艳 梁春 王伟利 罗雁非 温有学关键词:橡木 天牛 法国进口橡木上截获的8种小蠹虫 被引量:1 2009年 吉林出入境检验检疫局在对该进境木材进行检疫时,从木板中检出大量的有害生物,后经筛选、整理、鉴定,有害生物种类多达3纲13目57科107种,其中小蠹虫有8种。国内首次截获的种类有橡木小蠹、桤毛小蠹和林道梢小蠹。 魏春艳 王志明 刘金华 王伟利 李书境 卢丹 温有学 张生芳关键词:橡木 截获 小蠹虫 关于植物检疫实验室标本、标准菌(毒)株的质量控制 被引量:3 2005年 标本、标准菌 (毒 )株是植物检疫实验室检测过程中不可缺少的宝贵资源 ,二者作为参照物质 ,对检测结果具有直接重要的影响 ,并对检测结果的正确判定 ,具有重要的指导意义。因此 ,加强植物检疫实验室标本、标准菌 (毒 )株的质量控制 ,亦是植物检疫实验室质量保证的重要环节之一。 魏春艳 王有福 印丽萍 安榆林 高岚关键词:标本 植物检疫实验室 羧甲基壳聚糖病毒灭活/去除工艺验证 被引量:3 2016年 目的对羧甲基壳聚糖病毒灭活/去除工艺进行验证。方法模拟生产条件,选择猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)、伪狂犬病病毒(pseudo rabies virus,PRV)、鸭肝炎病毒Ⅰ型(duck hepatitis virus-Ⅰ,DHV-Ⅰ)、牛滤过性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)作为指示病毒,采用高温碱化和醇洗灭活/去除病毒,Karber法计算病毒滴度,荧光PCR检测病毒灭活/去除效果。结果 3批甲壳素经碱化反应处理,PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ的平均灭活对数值分别为≥6.736、≥6.597、≥6.138和≥5.806 log TCID50/0.1 ml;3批羧甲基壳聚糖经醇洗处理,PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ的平均灭活对数值分别为≥6.763、≥6.569、≥6.167和≥5.587 log TCID50/0.1 ml。碱化反应与醇洗处理前感染PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ样品荧光PCR检测平均Ct值分别为23.465、23.387,24.873、24.706,26.887、25.376,27.386、24.629,处理后样品的荧光PCR检测平均Ct值均>40。结论羧甲基壳聚糖经高温碱化和醇洗反应处理均能有效灭活病毒,保证了产品的安全性。 杨倩 宋战昀 张旭光 李敏思 王向辉 隋佳辰 张健 郑言 魏春艳 王振国关键词:甲壳素 羧甲基壳聚糖 应用PCR技术检测玉米中的禾谷镰刀菌 被引量:6 2004年 本实验通过用PCR方法来实现对禾谷镰刀菌的快速检测 ,经对霉变玉米样品、玉米茎腐病组织及玉米穗腐病标本的检测 ,证明该方法是一种高效、灵敏的方法 ,具有重要的实际应用价值。 刘金华 肖成蕊 魏春艳关键词:禾谷镰刀菌 玉米穗 穗腐病 茎腐病 PCR技术 PCR方法 豆象属昆虫检疫重要性概述 被引量:6 2013年 2007年5月发布并实施的《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》中,正式将豆象(属)非中国种Bruchus spp.(non-Chinese)列入其中。豆象属昆虫在我国分布较少,对储藏物具有极大的破坏性,因此,深入了解和研究豆象属昆虫,对于减少储存粮食损失和促进进出口贸易将发挥重要的作用。本文介绍了豆象属昆虫的主要特征;世界重要豆象属昆虫的种类、分布;以及我国口岸检疫截获豆象属昆虫及其检疫重要性。这些为口岸一线的检验检疫工作提供了重要依据。 陈新 魏春艳 任炳忠 丁旭关键词:检疫 黄花蒿精油对玉米象成虫体内酶活力的影响 被引量:7 2010年 用5种体积分数的黄花蒿精油处理玉米象成虫,测定了处理后不同时间其体内几种酶活力的变化情况。与对照组相比,所有处理组的乙酰胆碱酯酶(AChE)活力在处理后2h内均大幅下降,且随着处理体积分数的增大活力降低;处理4h后,5%~20%处理组的活力有所恢复。α-乙酸萘酯酶(α-NACarE)活力在处理后2~12h内呈下降趋势,处理后24h活力逐渐恢复。谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活力在处理后2h时降低,处理后4h活力有所恢复。过氧化物酶(POD)活力在2h内均大幅下降;处理4h后,5%~20%处理组的POD活力有所恢复,1%处理组在处理后8h活力显著高于对照组。试验结果表明,在试虫接触药剂的初期解毒酶活性受到抑制,而后由于机体的抵抗作用,解毒酶活力有所恢复,反映出玉米象成虫对黄花蒿精油存在解毒机制。但是随着精油体积分数的增大,黄花蒿精油较强的毒害作用抑制了解毒酶的活性,解毒酶活力反而下降。 尚利娜 袁海滨 魏春艳 任炳忠关键词:玉米象 酶活力 新城疫病毒血凝素蛋白RNA适配体的筛选及活性研究 被引量:5 2014年 核酸适配体与单克隆抗体相比具有更高的分辨率,能识别配体间一个基团的细微差别,且所需的结合活性位点更小。本试验通过SELEX技术,体外经过12轮筛选获得了能够与F48E9株新城疫病毒特异性结合的3个RNA适配体,命名为FHN12-45-3、FHN12-36-6和FHN12-19-9。RNA适配体的二级机构预测结果显示,所筛选获得的RNA适配体空间结构以外环、内环、发夹环及突起结构为主。特异性试验结果显示,适配体FHN12-45-3经ELISA和Dot-blot试验证实能够区分不同株的新城疫病毒。生物学活性试验结果显示,适配体FHN12-45-3能够减少4个单位的F48E9株病毒血凝效价,初步表明适配体与F48E9株病毒可能的活性作用位点在血凝素蛋白上,在鸡胚成纤维细胞培养体系中适配体FHN12-45-3能够减少84.62%的F48E9株病毒蚀斑,荧光定量RT-PCR方法检测适配体FHN12-45-3能够减少培养体系中77.73%病毒载量,表明筛选的RNA适配体在细胞水平能够有效的抑制F48E9株新城疫病毒的复制。 李敏思 宋战昀 冯新 杨倩 郑言 魏春艳 王伟利 王振国 付小平关键词:新城疫病毒 血凝素蛋白 SELEX