龙洪旭
- 作品数：76 被引量：389H指数：11
- 供职机构：中南林业科技大学更多>>
- 发文基金：国家林业公益性行业科研专项国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 一种油茶子叶节直接再生植株的方法
- 本发明公开了一种油茶子叶节为外植体，通过器官发生途径直接再生植株的方法，属于生物技术领域。包括以下步骤：(1)采用普通油茶的种子为材料培育无菌苗。(2)将子叶节切下接种到不定芽诱导培养基上，经过20-25d出现不定芽。(...
- 张琳谭晓风李泽林青龙洪旭曾艳玲赵广
- 文献传递
- 油茶CoPDAT基因的克隆与表达分析被引量：6
- 2017年
- 磷脂:二酰甘油酰基转移酶(PDAT)能够催化磷脂酰胆碱(PC)sn-2位的酰基转移至二酰甘油(DAG)上,形成三酰甘油(TAG)和溶血磷脂酰胆碱,这是另外一条不同于Kennedy途径的三酰甘油合成方式,故明确油茶(Camellia oleifera)PDAT基因的功能对阐明油茶种子油脂合成机制具有重要意义。本研究通过cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆油茶CoPDAT基因的全长cDNA序列,该序列长2773 bp,开放阅读框为2022 bp,编码673个氨基酸。亚细胞定位分析确定CoPDAT基因所编码蛋白质定位于内质网上。实时荧光定量PCR分析结果表明,CoPDAT在油茶不同组织/器官中均有表达,在种子中不同发育时期的相对表达量呈"上升-下降-上升-下降-上升"的表达特征,在花后42周表达量最高。CoPDAT基因与油茶种子油脂含量的灰色关联度值为0.8356,表明该基因与油茶种子油脂的合成积累关系密切。本研究为阐明CoPDAT基因在油茶油脂合成过程中的功能以及为油茶的分子遗传改良提供参考。
- 赵广宋志波刘美兰龙洪旭李泽张琳
- 关键词：基因克隆生物信息学分析亚细胞定位
- 油桐丙二酰单酰CoA:ACP转酰基酶的克隆与序列分析被引量：8
- 2014年
- 为了深入了解油桐丙二酰单酰辅酶A酰基载体蛋白转酰基酶(Malonyl Co A:ACP transacylase,MCAT)在油脂合成代谢过程中的作用,利用RT-PCR技术克隆获得了油桐MCAT基因序列,且命名为Vf MCAT,并利用相关生物软件对该基因序列及其相应蛋白质进行了生物信息学分析。结果表明:Vf MCAT的CDS长为1 179 bp,编码392个氨基酸;该蛋白与蓖麻和亚麻的MCAT同源性均达85%,存在"GXSXG"和"GQGXQ"两个高度保守的motif,在系统进化关系上,其与蓖麻和亚麻的亲缘关系最为接近;分析其氨基酸序列后发现,Vf MCAT的分子量约为41.67 KDa,理论等电点p I为8.43,是一个含有一个跨膜结构域的可溶性稳定蛋白;对其二级和三级结构的预测结果表明,该蛋白主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,且最有可能在线粒体中发挥其主要作用,文中由此推测,Vf MCAT在叶绿体中参与了油桐脂肪酸合成代谢。
- 刘美兰谭晓风龙洪旭王哲刘璐王僳僳
- 关键词：油桐生物信息学分析
- 菲油果LEAFY基因的表达模式及启动子克隆被引量：4
- 2014年
- LEAFY(简称LFY)是植物花分生组织特征基因,在植物由营养生长向生殖生长转变过程中起着重要作用,是启动开花的枢纽。菲油果是一种新兴的果树资源,为研究菲油果LFY基因(FsLFY)的表达调控规律,本研究通过实时荧光定量PCR技术研究了FsLFY基因的时空表达模式,并通过染色体步移技术克隆了该基因的启动子序列。荧光定量PCR结果表明,FsLFY基因在菲油果花蕾不同发育阶段以及其他组织器官中均有表达。在花蕾中,小蕾期最高,中蕾期最低;组织器官中,营养枝茎段最高,花瓣最低。FsLFY基因启动子序列长度为2436 bp(GenBank登录号:KF766536),运用PLACE、PlantCARE等在线软件对其序列进行顺式作用元件分析,结果显示该序列不仅含有CAAT-box、TATA-box等核心启动子元件,而且还具有响应水分、光、赤霉素(GA)以及其他功能未知的顺式调控元件,表明FsLFY基因的表达受多种外界环境条件的调控。本研究为阐明菲油果的开花机理,以及通过分子育种手段使菲油果早花早果奠定了理论基础。
- 冯延芝张琳袁德义龙洪旭刘敏张日清陈圣林
- 关键词：菲油果实时荧光定量PCR启动子
- 一种绿色桐油基涂料及其制备方法
- 一种绿色桐油基涂料及其制备方法，本发明之绿色桐油基涂料，主要包括以下重量份的原料：精制桐油40‑60份、聚合亚麻油10‑15份、梓油10‑15份、桐油活性稀释剂20‑35份、复合催干剂1‑2份、抗氧化剂0.2‑0.4份、...
- 杨焰杨宁宁龙洪旭廖有为余云黄彬
- 文献传递
- 油茶3羟酰CoA脱水酶基因的克隆与表达分析被引量：6
- 2014年
- 3羟酰CoA脱水酶是一类催化3羟酰CoA脱水转化成为烯酰CoA形式的酶。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料，在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上，采用RACE技术，克隆到一个油茶3羟酰CoA脱水酶基因的cDNA全长，命名为CoHCD（GenBank,登录号KJ910336）。该基因cDNA全长为1145bp，含有666bp的开放读码框，编码221个氨基酸，分子量为25．2kDa，理论等电点pI为9．4，疏水残基占整个氨基酸残基的48．9％，是亲水性蛋白，具有4个比较明显的跨膜区和蛋白质酪氨酸磷酸酶基序“HGXXGXXRS”。在基因cDNA全长序列的基础上，分别成功地构建了原核表达载体、超表达载体和RNA干扰载体，其中，原核表达载体在宿主细胞BL21（DE3）上成功诱导表达，获得表观分子量约为25kDa的相应目的蛋白。实时荧光定量PCR分析表明，在5个不同发育时期的油茶种子中CoHCD高效表达主要集中在8～10月，转录最高峰发生在9月，其表达量在种子发育过程中呈增加趋势。
- 王建勇谭晓风曾艳玲龙洪旭陈鸿鹏刘凯
- 关键词：油茶克隆
- 油茶Pht1;2的克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2013年
- 目的:克隆和分析油茶高亲和磷转运蛋白基因,为研究其结构和功能打下基础。方法:以油茶品种‘华硕’为试材,通过RT-PCR和RACE的方法克隆出油茶磷酸转运子Pht1基因家族一个成员的全长cDNA序列,命名为CoPht1;2(GenBank登录号:JX412956.1),通过生物信息学技术对其序列的理化性质、结构与功能进行分析和预测。结果:CoPht1;2 CDS长度为1 590bp,编码530个氨基酸,与其它物种的Pht1氨基酸序列具有较高的相似性,其中与杨柳科毛果杨的Pht1相似性最高,达到77.5%;该基因所编码蛋白质的分子量为58.02 kDa,理论等电点pI为8.97,二级结构主要由α-螺旋、β-折叠和不规则卷曲构成,包含12个明显的跨膜螺旋拓扑结构。结论:预测显示该蛋白是一个疏水跨膜蛋白,具有磷转运蛋白的主要特征,初步判定其与油茶磷吸收有关,其功能有待进一步验证。
- 周俊琴谭晓风袁军龙洪旭
- 关键词：油茶生物信息学
- 油桐4个品种光合特性的日变化
- 利用Li-6400 便携式光合测定系统，测定了4个油桐品种光合指标的日变化。结果表明：(1)‘葡萄桐’、‘小米桐’、‘对年桐’的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)日变化均呈单峰曲线，‘大米桐’的净光合...
- 李泽谭晓风袁军龙洪旭周乃富张琳
- 关键词：油桐净光合速率光合特性蒸腾速率日变化
- 文献传递
- 油茶Pht1;1基因克隆及其表达分析被引量：11
- 2013年
- 以油茶湘林4号为材料,通过RT-PCR和RACE的方法克隆出油茶磷酸转运子Pht1基因家族一个成员的全长cD-NA序列,命名为CoPht1;1(GenBank登录号:JX403969),通过实时定量PCR的方法检测了不同磷浓度下该基因在根系中的表达水平。结果表明:CoPht1;1 CDS长度为1626 bp,编码542个氨基酸,与其他物种的Pht1氨基酸序列具有较高的相似性,其中与夹竹桃科长春花的Pht1相似性最高,达到88%;蛋白质二级结构和拓扑结构预测表明,CoPht1;1具有跨膜蛋白的主要特征,与其他物种的Pht1具有一致性;实时定量RT-PCR结果表明,油茶Pht1基因的表达受低磷诱导,并在受磷胁迫处理(P浓度为0.1 mmol/L)15 d时表达量最高。
- 周俊琴谭晓风袁军龙洪旭
- 关键词：油茶基因表达模式
- 油桐种子FAD2基因全长cDNA序列分析被引量：6
- 2012年
- 油桐种子中FAD2催化形成的亚油酸是合成桐油酸的直接原料,研究油桐种子中的FAD2基因对提高桐油酸的产量具有实际意义。将油桐对年桐近成熟种子cDNA文库中的16个FAD2克隆子进行CAP3拼接,再进行BLAST比对,并进行DNAMAN分析,结果表明所克隆的基因序列为FAD2全长cDNA序列,其长度为1 537 bp,含有1个完整的编码序列,长度为1 146 bp(106～1 255 bp),编码383个氨基酸。酶蛋白相对分子质量44 144.4 u,等电点为8.57,氨基酸序列N端有6个残基的信号肽序列,有5个跨膜结构域,N端、C端及中间各有一段表现为强亲水性,酶活性中心为3个保守的组氨酸簇。在系统进化上,油桐FAD2基因与千年桐的亲缘最近,与蓖麻、乌桕、橡胶树、麻疯树等大戟科植物的亲缘关系较近,与油橄榄、花生、芝麻等植物的亲缘较远,与油茶的亲缘关系更远。
- 谢禄山谭晓风张琳龙洪旭
- 关键词：油桐种子CDNA文库FAD2
