刘云龙
- 作品数:20 被引量:37H指数:4
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 实时荧光聚合酶链式反应偶联高特异性核酸侵入反应检测单核苷酸多态性被引量:5
- 2015年
- 建立了实时荧光聚合酶链式反应(PCR)偶联高特性核酸侵入反应检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。优化了体系中flap核酸内切酶1(FEN1酶)和野生型检测探针等用量,确定了最佳反应条件,即FEN1酶用量为1.5 U,野生型检测探针用量为0.125μmol/L,0.5μmol/L Invader突变型检测探针,各0.25μmol/L通用野生型(VIC)和突变型(FAM)荧光共振转移发卡探针,显著降低了野生型样本和突变型样本背景信号,避免了背景信号对检测结果分型的干扰。采用本方法对编码乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因ALDH2*2位点21例样本、细胞色素P450 2C19基因CYP2C19*2和CYP2C19*3位点各19例样本进行分型检测,结果表明,ALDH2*2位点GG纯合10例,GA杂合8例,AA纯合3例;CYP2C19*2位点GG纯合9例,GA杂合8例,AA纯合2例;CYP2C19*3位点GG纯合18例,GA杂合1例。使用焦磷酸测序进行验证,两种方法检测结果一致。本方法特异性好、操作简便、耗时短、成本低,可实现对SNP单管闭管无污染的分型检测。
- 郑梦琳齐谢敏童欢刘云龙邹秉杰宋沁馨周国华
- 关键词:单核苷酸多态性细胞色素P450
- 血浆中肺癌相关甲基化基因组合及其应用
- 本发明公开了血浆中肺癌相关甲基化基因组合及其应用。血浆中肺癌相关的甲基化基因组合,所述的组合包含SHOX2、CDO1。所述的组合还包含选自以下任意一种或多种基因:PTGER4、TAC1、HOXA7和SCT。本发明所述的组...
- 顾月清刘云龙陈红红
- 文献传递
- 基因标志物数字化检测新方法研究
- 随着生物医学的快速发展,基因标志物在现代医学中的意义越来越重要,研究已经发现众多与疾病的发生、发展等密切相关的基因标志物,包括基因多态性、体细胞突变、拷贝数变异以及基因甲基化水平异常等。通过检测这些基因标志物,能够实现对...
- 刘云龙
- 关键词:生物医学基因标志物聚合酶链式反应
- 全血改进线性指数聚合酶链式反应用于焦磷酸测序检测基因多态性被引量:3
- 2015年
- 焦磷酸测序是目前基因多态性检测的主要方法之一,但是其前期的样本制备工作较为繁琐,限制了其在临床检测中的应用。为了简化焦磷酸测序的流程,本研究根据不对称PCR原理,改进了线性指数聚合酶链式反应(LATE-PCR)的引物设计方法,增加过量引物的长度和浓度,并结合全血直接扩增技术,建立了基于普通r Taq聚合酶和高p H缓冲液(Hp H Buffer)的全血改进LATE-PCR(Improved LATE-PCR,im LATE-PCR)方法。考察了方法的最优扩增体系、血液抗凝剂对其影响以及全血模板量。采用单管、一步法直接扩增出单链测序模板,成功地对24例临床血样的乙醇脱氢酶基因多态性进行了检测,检测结果可用于指导临床个体化用药。24例样本的基因型分别为ADH1B位点AA纯合6例、AG杂合14例、GG纯合4例;ADH1C位点GG纯合20例、AG杂合4例、AA纯合0例。
- 项铮刘云龙邢晓清初亚男宋沁馨周国华
- 关键词:焦磷酸测序基因多态性酒精代谢
- 我国高等师范教育模式改革及高师院校定位研究
- 师范教育是“教育的工作母机”。建国以来,我国政府一直把师范教育放在优先发展的地位,以独立设置的师范教育定向培养师资。目前我国高等师范教育的发展到了一个新的转折点,国家鼓励师资来源多元化、鼓励综合性大学和非师范高校参与培养...
- 刘云龙
- 关键词:教育模式
- SA-MBD重组蛋白以及表达方法和应用
- 本发明公开了一种SA‑MBD重组蛋白以及表达方法和应用;所述SA‑MBD重组蛋白由链霉亲和素(SA)和甲基化DNA结合域(MBD)重组而成,用于甲基化DNA的检测。所述SA‑MBD重组蛋白的表达方法是人工合成编码SA‑M...
- 刘云龙顾月清谭书琳
- 全血直接扩增结合焦磷酸测序法测定亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性被引量:7
- 2012年
- 亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C>T和1298A>C两个位点的多态性与临床常用抗肿瘤药物甲氨喋呤及氟尿嘧啶的作用密切相关,对这两个位点多态性的检测能指导临床合理用药。为进一步缩短检测时间,降低检测成本,本研究建立了基于全血直接PCR的焦测序检测方法,采用"HpH Buffer"直接扩增全血模板,仅需1μL全血样本即可对两个位点进行高效扩增。扩增产物经碱变性法制备单链模板后进行焦磷酸测序,经过条件优化,仅需5μL扩增产物和1μL微球即可完成高灵敏的焦测序反应。为验证方法的准确性,检测了12例临床样本,均能正确检测两个位点的基因多态性。本研究为临床基因多态性检测提供了一种操作简便,耗时短,成本低,准确度高的方法,本方法可用于指导甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶的个体化用药。
- 刘云龙陈之遥武海萍周国华
- 关键词:亚甲基四氢叶酸还原酶基因基因分型焦磷酸测序
- 光电材料中相干非线性响应的研究
- 光电材料中的光电转换过程被广泛的应用于光伏、光电探测的器件应用领域,关于光电转换过程,如何提高转换效率长期以来一直是学术界中光电理论机制研究、光电材料合成设计和器件设计领域研究的重点。光电转换过程通常可分为光激发材料产生...
- 刘云龙
- 关键词:光电材料
- 用于检测个体化用药相关基因标志物的焦磷酸测序技术研究
- 低成本检测与个体化用药相关的基因标志物是广泛开展临床合理用药的关键。与个体化用药相关的基因标志物包括基因多态性(SNP)、体细胞基因突变和异常表达的基因(mRNA或micro RNA),焦磷酸测序技术是一种可以定量测定基...
- 周国华刘云龙宋沁馨
- 关键词:临床药学个体化用药基因标志物
- 文献传递
- 一种用于鉴别肺结节良恶性的血浆游离DNA甲基化基因组合及其应用
- 本发明公开了一种用于鉴别肺结节良恶性的血浆游离DNA甲基化基因组合及其应用。一种用于鉴别肺结节良恶性的血浆游离DNA甲基化基因组合,选自SOX17、SCT、RASSF1A、SHOX2、HOXA7和CDO1中的至少任意两种...
- 顾月清刘云龙胡子健