刘煦文 作品数:12 被引量:14 H指数:2 供职机构: 中山医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 美国中华医学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 生物学 更多>>
非同位素标记pAW101探针作人流胚胎组织的亲权鉴定 被引量:1 1992年 DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)技术的经典方法是用酚抽提DNA,同位素标记探针。本文研究选用N_aCI盐析分离DNA的技术,结合地高辛配基标记pAW101探针方法,作了11例无争议的胚胎组织的亲权鉴定,同时测定4种同Ⅰ酶型,在不违反孟德尔遗规律的前提下,按Essen-Moller公式计算父权概率(均>99.73%),达到确定亲生关系的标准。本方法简单、易于掌握,结果稳定可靠,适宜于一般实验室开展工作。 杨英浩 刘超 罗超权 伍新尧 罗健扬 刘煦文关键词:非同位素标记 亲权鉴定 用PCR技术同时检测微量血痕的种属来源及其DNA多态性 1992年 应用聚合酶链反应技术扩增血痕DNA,根据扩增产物中有无aPoB基因的数量可变重复序列(VNTR)及其扩增片段的大小即可同时确定其种属特异性和DNA的多态性。实验结果显示人血痕可见扩增带并具有多态性,而猴猪狗猫鸡血痕无扩增带。 郭俊明 罗超权 杨英浩 伍新尧 刘煦文 罗健扬关键词:聚合酶链反应 血痕 种属鉴定 PCR-SSCP作HLA-DRB基因分型的初步研究 被引量:2 1994年 从20例人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)血清学特异性不同的血痕样本中抽提基因组DNA,经PCR扩增HLA-DRB基因第二外显子的高度多态区域。PCR产物在50%甲酰胺存在下加性获得单链DNA片段后,经8%中性聚丙用酰胺凝胶电泳、银染显色分析。结果显示,DR血清学特异性不同的个体具有不同的电泳图型。而DR相同血清不同的个体却具有相同的电泳带型。在稳定条件下,单链电泳图型有着良好的重复性。与聚合酶链反应-制性片段长度多态性(PCR-RFLP)或聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸(PCR-SSO)探针法相比,聚合酶链反应。单链构象多态性(PCR-SSCP)分析简单、快速、经济,不需探针和限制性内切酶,并可望成为临床上器官和骨髓移植寻找合适的HLA配型的一种工具。 林观平 杨英浩 孙筱放 伍新尧 罗超权 刘煦文 张仕光关键词:白细胞抗原 基因 PCR-RFLP 广东汉族人载脂蛋白B(apoB)基因3′端VNTR的遗传多态性研究 被引量:10 1993年 随机抽提100例无血缘关系的广东汉族人的血痕DNA,用PCR法扩增载脂蛋白B(apolipoprotein B apoB)基因3′端的VNTR,共检出19个等位基因,片段大小分布在510~1200bp之间,等位基因频率为0.005—0.195,杂合度为88.80%,父权排除率为0.6395,其等位基因数目及频率分布均与英国白种人的有差异。家系分析表明扩增片段按孟德尔方式遗传。本实验证实了apoB基因3′端VNTR的高度多态性和高度杂合性。 罗超权 郭俊明 杨英浩 伍新尧 刘煦文关键词:载脂蛋白类 应用pAW101 DNA探针作人流胚胎组织的亲权鉴定 1992年 用pAW1015kb的DNA片段为探针检测人流胚胎与其亲代的DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)的遗传关系。同时测定他们的某些同工酶(葡萄糖磷酸变位酶、酯酶D、乙二醛酶Ⅰ)型。在不违反孟德尔遗传规律的前提下,按M(?)ller-Essen公式计算,其父权概率都已达到或超过可以确认亲生关系的标准。这一方法的建立,使过去棘手的早期妊娠的亲权鉴定之难题获得圆满解决。此外,本文还对这一方法的优越性进行了讨论。 伍新尧 杨英浩 罗超权 刘煦文关键词:胚胎 亲权鉴定 DNA探针 人工流产 一种随机探针人DNA指纹分析法的建立 被引量:2 1990年 根据随机探针(Anonymous Probe)检测DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)分析原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA有90%以上同源序列的事实,选用rMBP-cDNA 3′-端非表达区高度重复序列的0.81千碱基对(kb)片段作探针,检测用HaeⅢ重酶解的人DNA限制性片段,结果可以分辨出22条谱带,受检的30例无血缘关系的个体之间,没有两个人的谱带是完全相同的,显示出此方法的高度特异性。本文还比较了若干DNA片段作探针和几种限制性内切酶水解人DNA后检测DNA指纹的初步结果。 罗超权 杨英浩 刘煦文 伍新尧关键词:DNA指纹 RFLPS 法医鉴定学 动脉硬化性脑梗塞遗传因素载脂蛋白AI基因DNA多态性分析 1993年 应用限制性片段长度多态性方法分析了52例动脉硬化性脑梗塞患者及60例健康对照ApoAⅠ基因,并应用酶学方法测定了二种基因型患者血清高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇及甘油三脂水平。结果表明载脂蛋白AⅠ基因PstⅠRFLP由2.2kb和3.3kb组成,3.3kb片段频率在二组间分别为0.16、0.02,二组间具有极显著性差异(P<0.o1),提示多态片段3.3 kb与动脉硬化性脑梗塞相关,是HDL-L水平下降的遗传因素之一。 胡学强 刘焯霖 梁秀龄 罗超权 杨英浩 刘煦文关键词:动脉硬化性脑梗塞 甘油三脂 DNA多态性 RFLP 广东汉族人基因组D17S5位点遗传多态性 1993年 本文介绍用二步法PCR检测广东汉族人基因组D17S5 VNTR(数量可变的串联重复序列)遗传多态性的结果。共发现有12个等位基因。这些等位基因片段的大小在100bp至870bp之间(每一重复单位为70bp),等位基因的频率分布在0.00.5至0.19之间。 杨英浩 伍新尧 罗超权 郭俊明 刘煦文关键词:人基因组 等位基因频率 广东汉族人 串联重复序列 VNTR PCR在检测人类发干性别中的应用 1993年 从1~2cm人发干中提取基因组DNA,以募核苷酸ya、y4_为引物,经过聚合酶链反应,扩增Y染色体特异的片段(446bP)。根据有无该片段的存在来确定发干的性别。这种方法取材方便,灵敏度高、易于推广。本文还报道了科用本方法检测某案例中5根发干的性别,为侦破工作提供了线索。 罗健杨 郭俊明 刘煦文 罗超权 杨英浩 伍新尧关键词:干性 PCR 聚合酶链反应 寡核苷酸 Y染色体 基因组DNA 广东汉族健康人载脂蛋白AⅠ-CⅢl-AⅣ基因簇DNA多态性及其单倍型分布 被引量:1 1992年 本文研究了中国广东汉族健康人群apoAI-CⅢ-AIV基因簇DNA限制性内切酶PstI、SstI和EcoRI片段长度多态性。其中等位基因P_1,P_2,S_1,S_2,R_1和R_2的频率分别为0.98,0.02,0.96,0.04,0.90和0.10。经卡方检验符合Hardy-Weinbery氏遗传平衡,与其他种族比较,本文结果显示中国广东汉族人P_2等位基因频率低于日本人、亚洲印第安人和高加索人,S_2等位基因频率低于日本人、菲律宾人、沙特阿拉伯人和亚洲印第安人,而与高加索人相近,R_2等位基因频率稍高于高加索人。不同种族间apoAI-CⅢ-AIV基因簇DNA多态频率无疑存在差异,这种差异可能是由于遗传漂变和自然选择单独或联合作用所致。对P_1、P_2,S_1、S_2和R_1、R_2构成的单倍型和连锁平衡程度进行了分析,结果显示这些单倍型处于连锁不平衡状态。 罗超权 杨英浩 胡学强 刘煦文关键词:基因簇 汉族 艾滋病毒