吴春芳
- 作品数：7 被引量：45H指数：5
- 供职机构：上海第二医科大学附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 小鼠胚胎干细胞建系及GFP标记被引量：9
- 2003年
- 目的 :为组织工程提供新型种子细胞 ,建立胚胎干 (ES)细胞系。方法 :取 12 9/svj白色小鼠 4.5d的囊胚 ,分离囊胚的内细胞团 (ICM )细胞 ;在条件培养液及小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)作铺层下 ,细胞扩增传代 ,碱性磷酸酶 (AKP)染色及oct4、ssea 1等特异性抗体鉴定细胞 ,并将细胞注射至裸鼠皮下观察细胞在动物体内的生长变化。结果 :细胞体外培养呈“巢状”生长 ,可以持续传代 ;AKP染色及oct4、ssea 1等特异性抗体免疫反应均阳性 ;裸鼠皮下注射的细胞发育生长为包含各胚层细胞成分的畸胎瘤。在此基础上以基因转染方法将细胞标记绿色荧光蛋白 (GFP)。结论 :从小鼠ICM所分离的细胞为小鼠胚胎干细胞 ,且标记GFP的ES细胞在传代及形成胚体的过程中均能显示GFP 。
- 沈干从笑倩汪铮吴春芳曹谊林
- 关键词：胚胎干细胞细胞系绿色荧光蛋白
- 小鼠胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的永生化研究
- 探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和外源重组转化生长因子-βl(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细...
- 沈干丛笑倩杜忠伟吴春芳刘晓音刘伟曹谊林
- 关键词：小鼠胚胎干细胞永生化基因转染
- 文献传递
- 人胚胎干细胞程序降温保存的实验研究被引量：5
- 2005年
- 本文采用升降式程序降温仪对人胚胎于细胞进行了程序降温保存,并探讨和比较了降温速率、置核温度、保护剂和投入液氮前温度对冻存复苏后胚胎干细胞的存活率、活力及分化特性的影响。结果表明:采用Me_2SO+血清+DMEM(体积比为1∶3∶6)的保护剂,从0℃开始,以0.5℃/min的速率对细胞悬液降温;至-10℃时对其进行置核,并于-35℃时将其快速投入液氮中保存,复温后效果最佳。冻存复温后细胞存活率可达81.8%,复苏后的胚胎干细胞形态和集落生长方式都与冻前的生长形态相同,且胚胎干细胞标志之一碱性磷酸酶(AKP)反应阳性,同时染色体组型仍正常。
- 杨鹏飞丛笑倩程启康华泽钊吴春芳曹谊林
- 关键词：人胚胎干细胞细胞存活率染色体组型核温度复温集落
- 胚胎干细胞在转化生长因子-β1诱导下表达vWF、CD34的研究被引量：10
- 2003年
- 目的 探讨胚胎干 (ES)细胞在转化生长因子 β1(TGF β1)诱导条件下的分化表现 ,为组织工程种子细胞来源提供诱导方法。方法 小鼠ES细胞 ,以 1× 10 - 9mol L维甲酸 (RA)和 3μg LTGF β1进行诱导分化。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)及免疫组织化学验证细胞性质。结果 证实ES细胞经RA和TGF β1的诱导 ,3～ 4d出现圆形前体细胞 ,6d形成管状血管样结构。分化细胞可表达内皮细胞的标志vWF、CD34。结论 ES细胞在特定的条件下可分化为血管内皮细胞 ,有可能为构建组织工程化血管及其他人工血管的内皮化提供种子细胞来源。
- 沈干吴春芳丛笑倩刘晓音刘伟曹谊林
- 关键词：胚胎干细胞转化生长因子-Β1内皮细胞CD34
- 小鼠胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的永生化研究被引量：17
- 2002年
- 本文探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细胞”组成的血管样结构。经光学和扫描电镜及免疫荧光等法分析检测,证明组成血管样结构的细胞具有专一性vWF荧光染色,表明是血管内皮样细胞。利用脂质体将人端粒酶催化亚基逆转录酶(hTERT)基因转染诱导分化中的“圆形细胞”。应用Dot-blot,RT-PCR,Western blot及免疫组织化学等方法分析、观察和证明了诱导分化的组成血管样结构的园形细胞和被hTERT基因转染的“圆形”细胞的形态和生物学特性。结果表明,携带hTERT基因的从ES细胞分化来的圆形细胞在体外可大量增殖,持续传代,95%具有血管内皮细胞的一些特有标志和管道化生长特性。因此,通过人端粒酶基因的转染途径可解决由ES细胞诱导分化而来的内皮细胞扩增和永生化问题,为构建组织工程化血管及其它人工血管的内皮化提供种子细胞来源打下基础。
- 沈干丛笑倩杜忠伟吴春芳刘晓音刘伟曹谊林
- 关键词：胚胎干细胞分化血管内皮细胞永生化ES细胞诱导分化
- 人多潜能胚胎生殖细胞的分离和培养(简报)被引量：6
- 2002年
- 多潜能胚胎性干细胞来源有两条途经,从植入前的早期胚胎内细胞团(inner cell mass,ICM)分离出来的称胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES);从原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)分离得到的称胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)。这两种干细胞在小鼠嵌合体实验中,都证明具有参与生殖系传递的能力。
- 李晓红丛笑倩汪铮吴春芳曹谊林
