吴煦
- 作品数：11 被引量：22H指数：4
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体被引量：5
- 2008年
- 目的建立流式免疫微球芯片技术（FCIBA）分析特异性血小板自身抗体的新方法。方法使用不同红色荧光强度的微球，包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体（抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体），制备特异性血小板自身抗体检测微球，用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物，检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA（MACE）进行比较，并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体。结果FCIBA分析抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体，批内重复性变异系数（CV）分别为4．82％、6．09％、5．04％、5．73％、5．30％；稀释试验呈对数线性相关，相关系数（r）分别为0．9972．0．9966．0．9988．0．9965、0．9982；新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关，r值分别为0．9289、0．9224、0．8894、0．9100、0．9134（P均〈0．01）。新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51．69％；其中，抗GPⅡb／Ⅲa为40．82％，抗GPⅠa／，Ⅱa为24．45％，抗GPⅣ为19．39％，抗GPⅠb／Ⅸ为32．65％，抗HLA-ABC为17．35％。新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，阳性率为0。结论本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法，可同时分析抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／，Ⅱa、GPⅣ、GPⅠb／Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体。
- 吴煦王建中李传保屈晨雪袁家颖汪润王新华赵燕君张爱玉
- 关键词：血小板减少性紫癜血小板膜糖蛋白类蛋白质阵列分析
- 部分蔬菜抗血小板聚集功能及其作用机制的初步研究被引量：4
- 2008年
- 目的对部分具有抗血小板聚集功能蔬菜的作用机制进行初步探讨。方法将不同种类的蔬菜汁（以西红柿汁作为阳性对照）分别与正常人富血小板血浆（PRP）孵育，加入血小板聚集诱导剂，观察各种蔬菜汁对血小板聚集的影响；用诱导剂激活血小板，流式细胞仪分析蔬菜汁对活化血小板纤维蛋白原受体（Fib-R）和P-选择素（CD62P）的表达水平及血小板纤维蛋白原结合量的影响；利用动物试验对血小板抑制作用进行体内验证，普通白兔随机分为5组，分别定量饲以生理盐水、熟西红柿汁、蒜黄汁、大白菜汁及菠菜汁，观察不同时间后血小板聚集情况。结果在花生四烯酸（AA）诱导下，未发现熟蔬菜汁有明显抑制体外人血小板聚集的作用，但在二磷酸腺苷（ADP）、胶原或肾上腺素诱导下，熟蒜黄汁、大白菜汁、菠菜汁能够明显抑制血小板聚集，并且随着蔬菜汁浓度的增加，对血小板聚集的抑制率增高。熟蒜黄汁、大白菜汁、菠菜汁不能抑制ADP、胶原或肾上腺素诱导的血小板Fib-R、CD62P表达，但能够显著抑制由ADP或胶原诱导的血小板与纤维蛋白原结合量。普通白兔在饲以熟大白菜汁、蒜黄汁、菠菜汁后，ADP诱导的兔血小板聚集率分别在第3、5、8周末时开始降低，熟大白菜汁喂养组血小板聚集的抑制率在第3、5、8周末分别为：45．7％、53．6％、48．5％，熟蒜黄汁喂养组分别为：10．7％、66．7％、46．3％，熟菠菜汁喂养组分别为：8．7％、21．0％、42．6％；饲以熟大白菜汁、蒜黄汁后，胶原诱导的兔血小板聚集率分别在第5、8周末时开始降低，熟大白菜汁喂养组血小板聚集的抑制率在第5、8周末分别为：54．9％、56．3％，熟蒜黄汁喂养组分别为：28．4％、86．7％。在8周内，熟西红柿汁对兔血小板未产生抗聚集作用。结论在ADP或胶原诱导下，熟蒜
- 王新华王建中屈晨雪吴煦袁家颖汪润张爱玉赵燕君
- 关键词：血小板聚集蔬菜体外研究动物实验
- 西红柿汁体外抑制血小板聚集功能及其机制探讨被引量：2
- 2006年
- 目的:观察西红柿汁在体外对血小板聚集、血小板活化标志物的表达及对血小板纤维蛋白原结合量的影响,初步探讨西红柿汁对血小板聚集功能的影响机制。方法:将不同浓度的西红柿汁与正常人富血小板血浆(PRP)孵育,加入5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)和胶原,观察西红柿汁对血小板聚集的影响。用ADP及胶原激活血小板,流式细胞仪(FCM)分析西红柿汁对活化血小板纤维蛋白原受体(Fib-R)和P-选择素(CD62P)的表达水平及血小板纤维蛋白原结合量的影响。结果:西红柿汁能够明显抑制由ADP、胶原诱导的血小板聚集,且随着西红柿汁浓度的增加,对血小板聚集的抑制率增高。西红柿汁不能抑制ADP、胶原诱导的血小板Fib-R、CD62P表达,但能显著抑制由ADP、胶原诱导的血小板与纤维蛋白原结合量。结论:西红柿汁在体外能够显著抑制血小板聚集,其抗血小板聚集的作用机制与阻碍纤维蛋白原与血小板Fib-R结合有关。西红柿汁具有潜在的抗血小板治疗前景。
- 王新华王建中屈晨雪吴煦袁家颖汪润
- 关键词：西红柿血小板聚集
- 流式微球技术检测血小板微粒的方法建立及其评价被引量：5
- 2005年
- 目的建立血小板微粒(plateletderivedmicroparticles,PMPs)的流式微球技术(cytometricbeadarray,CBA)检测方法并对其进行方法学评价。方法采用包被针对血小板膜糖蛋白Ⅲa(CD61)单克隆抗体的检测微球捕获PMPs,用CD41PE结合捕获的PMPs,利用流式细胞仪对微球PMPsCD41PE复合物进行检测。通过试验优化检测条件;并对方法的重复性和检测线性进行评价。对45例健康人PMPs水平进行检测。结果检测微球在4℃可以稳定保存90d以上,变异系数0.65%,基本可以满足临床检测的要求。应用CTAD抗凝管采集标本可以有效的抑制PMPs的体外释放;室温反应4h可以达到PMPs最大的结合;利用PBS洗涤可以去除检测微球对PMPs的非特异性吸附。该方法批内变异系数6.8%;批间变异系数10.4%,有较好的重复性;利用该方法检测血小板活化上清中的PMPs,在0～200μl之间有较好的线性(r=0.9962)。45例正常健康成人血液PMPs参考范围为1.031～1.766(相对荧光强度)。结论流式微球技术可以简便、快捷、准确地检测PMPs,对于临床出血、血栓性疾病的诊治具有重要意义。
- 李传保王建中吴煦袁家颖汪润张爱玉赵燕君屈晨雪王新华
- 关键词：流式微球技术血小板微粒
- 肾移植患者外周血人巨细胞病毒特异性CD8^＋T淋巴细胞频率及其γ干扰素分泌功能的初步研究
- 2008年
- 目的研究肾移植患者外周血人巨细胞病毒（HCMV）特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）的频率及其γ干扰素（IFN-γ）分泌功能，以期探讨HCMV活化感染的免疫学机制。方法选取HCMV血清学阳性的HLA-A^＊0201肾移植患者和健康对照者，将其分为3组：存在HCMV活化感染的肾移植组（9例）、无HCMV活化感染的肾移植组（29例）和健康对照组（54名）；运用HLA-A2-NLVPMVATV．五聚体检测外周血中总的HCMVNLVPMVATV特异性CTL，同时以NLVPMVATV体外刺激PBMC，检测IFN-γ分泌性CTL。结果在健康对照组、无HCMV活化感染的肾移植组和存在HCMV活化感染组中，HCMV特异性CTL频率中位数分别为1．19％（0～19．42％）、1．20％（0～18．40％）和3．2％（0．51％～18．90％），差异无统计学意义（H=5．34，P〉0．05）；IFN-γ分泌细胞频率中位数分别为0．72％（0-0．70％），0．47％（0-5．61％）和0．67％（0．07％-4．00％），差异无统计学意义（H=0．58，P〉0．05），但HCMV特异性CTL中IFN-γ分泌细胞的比例分别为（60．18±19．16）％，（39．19±17．22）％和（20．02±13．26）％，组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论肾移植组外周血中HCMVNLVPMVATV特异性CTL频率较健康对照组并无降低，但其分泌IFN-γ的比例降低，出现HCMV活化感染组IFN-γ分泌CTL比例降低更为明显。HCMV特异性CTL的IFN-γ分泌功能受损可能是造成肾移植患者HCMV活化感染的因素之一。
- 杨瑞锋徐国宾吴煦李志艳夏铁安
- 关键词：肾移植CD8阳性T淋巴细胞
- 强直性脊柱炎合并IgA肾病家系T细胞亚群检测及其临床意义被引量：2
- 2006年
- 目的研究强直性脊柱炎合并IgA肾病家系成员外周T淋巴细胞亚群的变化及其意义。方法利用流式细胞术检测该家系成员HLA-B27及外周血CD45RA+/CD4、CD45RO+/CD4、CD45RA+/CD8、CD45RO+/CD8、CD4+CD38+/CD3、CD4+DR+/CD3、CD38+/DR+/CD4、CD8+CD38+/CD3、CD8+DR+/CD3、CD38+/DR+/CD8 T淋巴细胞亚群,并在患病和未患病者之间进行比较。结果HLA-B27与强直性脊柱炎的发病呈正相关,r=0.9999(P<0.001),与家系中未发病者相比CD45RO+/CD4和CD45RO+/CD8 T细胞的平均荧光强度明显升高(P<0.05,P<0.01),其余的变化没有显著性。结论CD45RO+T细胞在强直性脊柱炎患者机体免疫功能紊乱的发生发展过程中有重要的作用;可能与强直性脊柱炎并发IgA肾病有关,需进一步研究证实。
- 汪润袁家颖吴煦李传保王建中
- 关键词：强直性脊柱炎IGA肾病流式细胞术T细胞
- 利用微球捕获技术检测血小板微粒的方法建立及其评价
- 目的建立利用微球捕获技术检测血小板微粒（plateletderivedmicroparticles,PMP）的方法并对其进行初步的方法学评价。方法采用包被针对血小板膜糖蛋白IIIa（CD61）单克隆抗体的检测微球捕获PM...
- 李传保吴煦袁家颖汪润屈晨雪王建中
- 关键词：血小板微粒
- 文献传递
- 血小板相关抗体直接法与间接法的比较被引量：1
- 2006年
- 目的:比较直接法与间接法血小板相关抗体(PAIg)分析的诊断意义。方法:使用流式细胞术,同时用直接法与间接法分析健康人组、免疫性血小板减少性紫癜患者组和非免疫性血小板减少性紫癜患者组的血小板相关抗体,并对检测结果作比较分析。结果:直接法分析诊断免疫性血小板减少性紫癜的敏感度为61.02%,特异度为93.94%,阳性预测值为94.74%,阴性预测值为57.41%。间接法分析诊断免疫性血小板减少性紫癜的敏感度为66.10%,特异度为87.88%,阳性预测值为90.70%,阴性预测值为59.18%。同时使用直接法和间接法分析、诊断免疫性血小板减少性紫癜的敏感度为84.75%,特异度为87.88%,阳性预测值为92.59%,阴性预测值为76.32%。结论:同时使用直接法和间接法PAIg分析,可有效提高血小板相关抗体检出率。
- 吴煦王建中屈晨雪袁家颖赵燕君张爱玉
- 关键词：免疫性血小板减少性紫癜流式细胞术血小板相关抗体
- 部分蔬菜抗血小板聚集功能及其作用机制的初步研究
- 对常用蔬菜抗血小板聚集功能进行研究，并对部分具有抗血小板聚集功能的蔬菜体外作用机制进行初步探讨，且利用动物试验对其抑制作用进行体内验证。
- 王新华王建中吴煦屈晨雪袁家颖汪润张爱玉赵燕君
- 关键词：血小板聚集西红柿大白菜细胞分析
- 131例急性髓细胞性白血病免疫表型的预后作用分析
- ：探讨急性髓细胞性白血病(AML)免疫表型与预后的相关性。 方法：运用多色流式细胞术分析131例AML免疫表型，分析免疫表型与年龄、初诊时白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)和血红蛋白(HGB)的关系及其对完全...
- 屈晨雪王建中汪润袁家颖张爱玉赵燕君吴煦
- 关键词：白血病免疫分型流式细胞术预后
