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SIRT1在TNF-α介导的肠上皮屏障破坏中的作用及机制研究被引量：3: 2014年; 目的观察沉默信息调节因子1(SIRT1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的肠上皮Caco-2细胞屏障功能破坏的影响并探讨其分子机制。方法将Caco-2细胞分3组处理:对照组、TNF-α100ng/mL 24h处理组(TNF-α组)及TNF-α100ng/mL24h处理+白芦藜醇(Resveratrol)40μm预处理12h组(TNF-α+Res组)。分别检测跨上皮电阻(TER)、SIRT1及紧密连接蛋白:ZO-1、occludin的蛋白表达。结果对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.81±0.02、0.43±0.04、0.60±0.03。3组的TER分别为(154.00±5.00)、(97.00±4.00)、(128.00±6.00)Ohm/cm2。TNF-α组SIRT1的蛋白表达较对照组下降47.00%,TER降低37.00%,经白芦藜醇预处理使TER较TNF-α组升高32.00%。对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的ZO-1和occludin蛋白相对表达量分别为0.62±0.06和0.57±0.03、0.23±0.05和0.33±0.04、0.41±0.03和0.50±0.02。TNF-α处理后紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达显著降低(P<0.05),而白芦藜醇预处理可缓解该现象,蛋白表达较TNF-α组分别升高78.00%、51.00%(P<0.05)。结论 TNF-α处理条件下SIRT1水平降低,而升高SIRT1水平可增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin蛋白水平的表达,从而减轻TNF-α对Caco-2细胞构成的上皮屏障功能的损伤。; 马远航杨松巍孙礼刚于敏孙力华王文生杨桦; 关键词：上皮紧密连接蛋白

沉默信息调节因子1对缺氧条件下肠上皮屏障功能的保护作用及机制被引量：6: 2014年; 目的观察沉默信息调节因子1（SIRT1）对肠缺氧上皮Caco-2细胞屏障功能的影响并探讨其分子机制。方法对Caco-2细胞分别进行1％O2浓度缺氧6h（缺氧组）和常规处理（常规组）及加浓度为40μmol／L Resveratrol（SIRT1激动剂）预处理6h后再缺氧6h（观察组），分别检测3组肠上皮细胞跨上皮电阻（TER），PCR及Western blot分别检测3组SIRT1及紧密连接蛋白ZO—1、Occludin和Claudin-1的mRNA与蛋白表达。结果缺氧组SIRT1mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于常规组（分别为0．40±0．02比0．70＋0．07，P=0．001；0．37±0．03比0．76±0．03，P=0．001），也明显低于观察组（0．50±0．02，P=0．026；0．54±0．02，P=0．011）。缺氧组3种紧密连接蛋白mRNA表达均低于常规组（P〈0．05），也低于观察组（P〈0．05），观察组的ZO-1及Claudin-1表达与常规组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。3种紧密连接蛋白的表达水平常规组最高，观察组次之，缺氧组最低，两两比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。常规组、缺氧组和观察组的TER分别为（142±7）Ohm／cm^2、（94±3）Ohm／cm^2和（119±7）Ohm／cm^2；两两比较，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。结论缺氧条件下SIRT1水平降低，而SIRT1的激活可通过增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1mRNA与蛋白的表达，从而减轻缺氧对肠上皮屏障功能的损伤。; 马远航许超王文生孙礼刚杨松巍逯顶松刘勇杨桦; 关键词：缺氧紧密连接蛋白

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孙礼刚

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