孙福谋
- 作品数:11 被引量:10H指数:2
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 噬菌体展示全人源抗GPC3的单链抗体的筛选及鉴定被引量:2
- 2017年
- 使用全人源噬菌体单链抗体文库进行筛选,获得特异性靶向磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)的单链抗体,并对单链抗体的生物学活性和抗原表位进行鉴定。经过4轮"结合-淘洗-洗脱-扩增"后,利用噬菌体ELISA和IMGT数据库分析抗体序列的靶向性和完整性。单链抗体的基因序列与表达载体p ET-22b进行双酶切并连接,重组载体转化大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3),抗体表达后经Ni^(2+)柱亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blot对单链抗体分子质量进行鉴定。抗体对抗原的亲和力常数通过ELISA和SPR实验获得,流式细胞术分析其与细胞膜受体的结合能力。经筛选获得4个单链抗体(1F7、1D7、1D4和1B10)具有良好的靶向性和亲和力,其中1F7单链抗体的亲和力和结合能力最高。本课题抗GPC3单链抗体为双特性抗体和免疫毒素等新一类免疫治疗药物的开发奠定基础。
- 蒋家豪孙福谋韩月王阳蔡佳玲王旻张娟
- 关键词:噬菌体展示单链抗体肿瘤靶向
- 一种以Jurkat为平台的靶向CD24和PD-L1双特异性嵌合抗原受体CAR及其应用
- 本发明提出了一种以Jurkat为平台的靶向CD24和PD‑L1双特异性嵌合抗原受体CAR及其应用,该嵌合抗原受体CAR包括抗CD24单链抗体、抗PD‑L1单链抗体、CD8a铰链区及跨膜区、4‑1BB胞内区、CD3ζ(ze...
- 邵帅张娟孙福谋杨思雨
- 一种靶向ARTN的单链抗体、制备方法及应用
- 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种新的可与人肿瘤组织中ARTN蛋白特异性结合的单链抗体。所述的抗人ARTN的单链抗体,其特征在于:其氨基酸序列为SEQ NO:1;其具有较强的靶向性,可以特异性地结合于肿瘤细胞表面的AR...
- 杨勇张娟卡马尔·哈立德·法尔汉·赫泽姆王旻张鑫荣蒋家豪孙福谋王阳杜晓典
- 双特异性抗体mAb04-MICA对人白血病细胞K562的体内外抗肿瘤活性被引量:1
- 2018年
- 探讨双特异性抗体m Ab04-MICA对人白血病细胞K562的体内外抗肿瘤活性。前期研究显示,m Ab04-MICA具有抗血管生成和重塑肿瘤微环境中的免疫监视作用,体外对K562细胞具有良好的抗肿瘤作用。通过ELISA鉴定m Ab04-MICA对抗原VEFGR2和受体NKG2D的亲和力;CCK8法分析m Ab04-MICA对K562的体外增殖抑制作用;采用流式细胞术分析m Ab04-MICA对鼠源VEGFR2的交叉反应能力;建立K562皮下荷瘤BALB/c裸鼠模型,通过测定瘤体积、称量瘤重、观测荷瘤鼠生存期等方法检测目的抗体的体内抗肿瘤活性;免疫组化方法测定其对肿瘤组织本身及组织内新生血管生成的影响。结果显示:m Ab04-MICA对VEGFR2和NKG2D都具有良好的亲和力,并且在体外能够特异性地抑制VEGF诱导的K562细胞的增殖;m Ab04-MICA与鼠源VEGFR2具有较高的结合能力;相同给药剂量下,双特异性抗体抑瘤作用显著优于母体单抗,且能延长荷瘤裸鼠生存期,其中Ki-67、p-VEGFR2、VEGF及CD34的表达量显著降低,提示m Ab04-MICA可通过特异性地阻碍瘤组织VEGFR2的磷酸化而控制瘤体新生血管的生成,在治疗白血病方面具有潜在的应用价值。
- 杜晓典孙福谋袁敏讷王斐刘雅利尚鹏钊王旻张娟
- 关键词:双特异性抗体血管内皮生长因子受体2免疫监视白血病
- 一种CD24抗体融合蛋白的设计及其应用
- 本发明属基因工程抗体技术领域,具体涉及一种CD24抗体融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将CD24单链抗体rG7S与MICA分子胞外1‑3区通过G<Sub>4</Sub>S柔性肽相连接,哺乳动物真核表达体系...
- 张娟王旻王彤孙福谋
- 文献传递
- 基于酶催化抗体药物偶联物中抗体的定点突变及鉴定
- 2017年
- 谷氨酰胺转移酶催化谷氨酰胺与赖氨酸及其衍生物形成异肽键,可用于抗体与小分子药物的定点偶联。本文在构建的抗人CD24嵌合抗体c G7的基础上,定点突变c G7获得具有4个可催化的谷氨酰胺位点的嵌合抗体c G7Q。本研究采用overlap PCR技术将抗体重链CH段第297位天冬酰胺突变成谷氨酰胺,构建含突变重链的真核表达载体。将含突变重链与轻链的载体共转染CHO-s细胞,筛选稳定高产单克隆细胞株,表达及鉴定目的蛋白c G7Q,表面等离子共振法与流式细胞术分析c G7Q与人CD24分子的结合能力,乳酸脱氢酶释放实验鉴定定点突变对抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)的影响,结果显示,经改造的c G7Q保持母体单抗的结构和特异性结合能力及部分ADCC效应,为后续制备靶向CD24定点偶联药物奠定基础。
- 马招兄徐瑶赵虹孙福谋张鑫荣王旻张娟
- 关键词:抗体定点突变谷氨酰胺转移酶
- 一种靶向ARTN的单链抗体、制备方法及应用
- 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种新的可与人肿瘤组织中ARTN蛋白特异性结合的单链抗体。所述的抗人ARTN的单链抗体,其特征在于:其氨基酸序列为SEQ NO:1;其具有较强的靶向性,可以特异性地结合于肿瘤细胞表面的AR...
- 杨勇张娟卡马尔·哈立德·法尔汉·赫泽姆王旻张鑫荣蒋家豪孙福谋王阳杜晓典
- 文献传递
- 一种抗CD24人源化抗体融合蛋白
- 本发明属基因工程抗体技术领域,具体涉及一种CD24抗体融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将CD24人源化抗体hG7S与MICA分子胞外1‑3区通过G<Sub>4</Sub>S柔性肽相连接,哺乳动物真核表达体...
- 王旻张娟孙福谋杜晓典
- 文献传递
- 一种CD24抗体融合蛋白的设计及其应用
- 本发明属基因工程抗体技术领域,具体涉及一种CD24抗体融合蛋白的制备方法及用途。本发明利用基因工程技术将CD24单链抗体rG7S与MICA分子胞外1?3区通过G<Sub>4</Sub>S柔性肽相连接,哺乳动物真核表达体系...
- 张娟王旻王彤孙福谋
- 一种靶向CD24且激活NK细胞的双特异性抗体的制备及其应用
- 本发明属基因工程抗体技术领域,具体涉及一种靶向CD24且激活NK细胞的双特异性抗体的制备及其应用。本发明利用基因工程技术将抗CD24人源化嵌合抗体cG7与具有募集和激活NK细胞活性的MICA分子通过柔性肽(Gly<Sub...
- 张娟王旻韩月孙福谋王阳王斐蔡佳玲
- 文献传递