孙红柳
- 作品数:6 被引量:96H指数:3
- 供职机构:首都医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 转染肝刺激因子基因增强肝癌细胞抗损伤作用研究被引量:2
- 2004年
- 目的 将人肝刺激因子基因(hHSS)转染BEL-7402肝癌细胞,探讨其增强细胞抗损伤的作用。 方法 于肝癌细胞中转染hHSS,并以MTT法检测转染细胞活性;采用CCl4和H2O2损伤细胞,测定细胞死亡率和凋亡率,以及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性变化,观察转染细胞的抗损伤能力。 结果 hHSS表达的肝癌细胞增殖速度加快,同时转染hHSS细胞具有保护细胞免受两种毒剂的氧化损伤的能力,可以明显降低细胞死亡率及凋亡率[在CCl1-处理组和H2O2-处理组空载体对照凋亡细胞率分别为(32.44±0.52)%和(47.78±0.45)%,转染细胞凋亡率分别为(25.60±0.66)%和(37.40±0.69)%,t值分别为16.82和25.2,P<0.01],并活化酪氨酸信号分子MAPK。 结论 hHSS基因的功能与刺激细胞增殖有关。
- 陈莉孙红柳杨琳杜海军安威
- 关键词:基因转染肝刺激因子肝癌氧自由基抗损伤
- 去甲斑蝥素对人乳腺癌细胞系的凋亡诱导作用及bcl-2基因的表达(英文)被引量:81
- 2000年
- 目的:探讨去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制。方法:用 10μ g/ml去甲斑蝥素处理体外培养的人乳腺癌细胞系 MCF-7。处理后,在不同时间点,采用普通光镜、电子显微镜观察去甲斑蝥素对乳腺癌细胞的诱导凋亡现象。利用流式细胞仪分析凋亡细胞百分比,用蛋白印迹杂交方法对凋亡抑制基因 bcl-2的表达情况进行检测。结果:经 10μ g/ml去甲斑蝥素处理 12 h后,可观察到 MCF-7细胞变形、出泡,从培养瓶底脱离。细胞染色和电子显微镜可观察到染色质浓聚、边集,且随着药物作用时间的延长,凋亡细胞百分比逐渐增加。与对照组相比,凋亡抑制基因 bcl-2的表达降低。结论 :诱导肿瘤细胞凋亡可能是去甲斑蝥素抗肿瘤作用的分子机制之一。
- 戎煜梁福佑陈莉杜海军刘乐尧孙红柳安威
- 关键词:去甲斑蝥素乳腺肿瘤BCL-2基因
- 重组人肝刺激物在原核细胞中的表达与纯化被引量:6
- 2002年
- 利用基因重组技术 ,构建成人肝刺激因子 (hHSS)和谷胱甘肽转移酶 (GST)融合表达载体 ,转化大肠杆菌BL 2 1(DE3 ) ,以His·Tag亲和层析纯化表达产物 ,FactorXa切割分离hHSS单体 ,并检测其生物学活性。结果显示 ,在pET 4 2a表达体系中hHSS以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在 ,GST hHSS表达量占菌体可溶性蛋白的3 0 % ;FactorXa切割GST与hHSS之间肽腱 ,得到 3 3和 15kD两条蛋白带 ,经Western杂交证实 3 3kD条带为GST ,而 15kD条带的分子量与hHSS基因序列推测蛋白结果相符。经His·Tag再次纯化可获得hHSS单体 。
- 杜海军孙红柳陈莉安威
- 关键词:融合蛋白原核表达纯化
- 肝刺激因子促增殖和抗损伤作用的研究
- 肝刺激因子(Hepatic Stimulator Substance,HSS)是存在于哺乳动物新生肝及再生肝胞质液中的一种热稳定性蛋白,分子量介于14-20kD.研究证实,HSS抗酸、耐碱,可特异性刺激肝细胞或肝源性肿瘤...
- 孙红柳
- 关键词:转染细胞融合蛋白
- 文献传递
- 重组人肝刺激因子的促增殖和抗损伤作用被引量:9
- 2003年
- 目的 探讨重组人肝刺激因子 (hHSS)的生物学特性并观察其抗损伤能力。 方法 以MTT法、细胞计数、细胞周期分析和MAPK活性观察hHSS促细胞增殖作用。以H2 O2 损伤细胞 ,观察hHSS保护细胞的作用。 结果 重组hHSS能刺激BEL 74 0 2肝癌细胞增殖 ,促进增殖信号分子MAPK的磷酸化。hHSS可增强细胞对抗H2 O2损伤的能力 ,促进受损细胞DNA合成。 结论 HSS为一种新的生物活性蛋白 。
- 陈莉孙红柳安威
- 关键词:促增殖抗损伤细胞增殖
- 转染肝刺激因子基因增强肝癌细胞抗凋亡作用研究
- 目的:将人肝刺激因子基因(human hepatic stimulator substance,hHSS)转染BEL-7402肝癌细胞,探讨其增强细胞抗凋亡的作用。方法:利用脂质体介导的转基因方法将目的基因转染至BEL-...
- 吴媛孙红柳陈莉杨琳安威
- 关键词:肝癌细胞抗凋亡作用肝刺激因子基因增强
- 文献传递