孟敏
- 作品数：18 被引量：38H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学更多>>
- 小麦品种中国春的Waxy蛋白亚基和其编码基因及应用
- 本发明公开了从普通小麦品种中国春中分离到的三个Waxy蛋白亚基编码基因的全长编码序列，对应的编码序列与其编码的蛋白亚基的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO1-SEQ ID NO6所示。相应的，本发明公开了上述编码序列的...
- 陈其皎高翔孟敏董剑赵万春
- 文献传递
- 农学类专业遗传学实验教学模式研究被引量：1
- 2022年
- 遗传学是高校生命科学类专业重要的专业基础课程,而遗传学实验是遗传学教学的重要组成部分。为提高遗传学实验教学质量,培养创新型人才,西北农林科技大学遗传学教研室经过多年的实践与探索,优化了遗传学实验教学内容和模式,完善了考核方式,重构出适合农学类专业的“三阶段、五模块、四类型”的实验教学模式,并系统总结了这种实验教学模式的构建与核心。该模式在教学中所表现出强大优势,在提升学生的综合素质、培养优秀的生命科学人才等方面取得了优异成绩,可为遗传学或其他类似课程的实验教学改革提供参考。
- 孟敏
- 关键词：农学类专业遗传学实验教学模式
- 柳枝稷的组织培养技术研究被引量：13
- 2009年
- [目的]探索柳枝稷的不同组培条件，优化其诱导和分化培养基。[方法]以柳枝稷幼穗为外植体进行组织培养获得组培苗，建立相应的植株再生系统。[结果]愈伤组织诱导培养基为MS＋5．00mg／L2，4-D＋0．15mg／L6．BA＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂；继代与增殖培养基为MS＋4．00mg／L2，4-D＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂；分化培养基为MS＋0．2mg／L KT＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂；生根培养基为1／2MS＋0．80％蔗糖＋0．70％琼脂。愈伤组织诱导和继代培养阶段培养温度为24℃，在分化和生根培养阶段培养温度为28℃。幼穗外植体的出愈率达95％，愈伤组织增殖率在800％-1000％以上，分化率达80％以上，生根率在98％以上。经炼苗后，获得的组培苗的移栽成活率达95％以上。[结论]采用优化激素搭配的培养基可得到高效的诱导率、分化率和生根率。
- 孟敏李华军徐开杰奚亚军
- 关键词：柳枝稷幼穗愈伤组织诱导
- 栽培黑麦籽粒Waxy蛋白亚基及其提取、鉴定方法和编码基因与应用
- 本发明公开了栽培黑麦籽粒Waxy蛋白亚基以及该蛋白亚基的DuoFlow提取方案、CE快速鉴定体系及与该蛋白亚基对应的编码序列，所公开的黑麦籽粒Waxy蛋白亚基具有序列表1所示的氨基酸排列顺序。本发明公开的DuoFlow提...
- 高翔陈其皎董剑孟敏赵万春
- 文献传递
- 黑麦籽粒Waxy蛋白亚基的高效分离与鉴定技术体系的构建被引量：1
- 2013年
- 【目的】构建用于制备级分离及高效鉴定黑麦籽粒Waxy蛋白亚基的技术体系,为该亚基理化特性的分析、功能的发掘及Waxy种质的快速筛选等提供理论参考。【方法】设计特异引物从灌浆期间的奥地利黑麦籽粒cDNA中克隆获得Waxy,并进行体外表达;利用DuoFlow对籽粒蛋白提取物进行纯化,对峰值收集物、原核表达产物及其Ni柱纯化的重组Waxy蛋白进行SDS-PAGE分离,挖取蛋白条带进行MALDI-TOF质谱鉴定,结合经由基因序列所推导的氨基酸序列,确定回收产物的Waxy蛋白属性;在优化电泳条件的基础上构建针对Waxy蛋白的毛细管电泳体系;同时,利用部分黑麦品种对DuoFlow及CE体系的有效性进行验证。【结果】核苷酸序列分析表明,从奥地利黑麦cDNA中克隆获得一条覆盖Waxy全长的编码序列(GenBank登录号:KF559182),其理论编码产物约为60 kD;利用DuoFlow Q1阳离子交换柱,以低浓度Tris-Hcl(20 mmol·L-1Tris-Hcl,pH 9.5)进行蛋白挂柱,高浓度NaCl(20 mmol·L-1Tris+1 mol·L-1NaCl,pH 9.5)进行蛋白洗脱,214 nm波长检测,实现了对籽粒Waxy蛋白的DuoFlow高效分离;纯化产物的SDS-PAGE条带大小、质谱鉴定肽段与黑麦、小麦Waxy蛋白序列相似性的统计结果表明,DuoFlow峰值回收产物具有黑麦Waxy亚基一致的特征序列,故属于Waxy蛋白;以DuoFlow纯化产物为标准样,以0.05 mmol·L-1硼砂+15%乙腈+1%SDS溶液(pH 9.5)为缓冲液,采用分离电压20 kV,温度25℃,检测波长214 nm,压力进样,0.5 psi×5 s,在11—12 min处获得峰值约12 mAU单一主峰,图形清晰,基线水平,从而构建了Waxy蛋白的CE鉴定体系,且籽粒Waxy蛋白提取物能直接用于对该亚基的检测;同时,利用黑麦品种对上述体系的验证结果表明,DuoFlow及CE体系适于对Waxy亚基的高效分离与通量检测。【结论】从奥地利栽培黑麦cDNA文库中克隆获得Waxy完整编码序列,构建了能特异分离黑麦籽粒Waxy蛋白的DuoFlow制备级纯化体系,
- 孟敏董剑高翔赵万春李晓燕陈其皎陈良国石引刚
- 关键词：WAXY蛋白毛细管电泳
- 生物能源植物柳枝稷组织培养体系的建立
- 孟敏
- 关键词：生物能源柳枝稷
- 小麦Waxy蛋白亚基毛细管电泳分离体系的构建被引量：1
- 2015年
- 为构建Waxy蛋白亚基的快速、高效、高通量毛细管电泳分离鉴定体系,为该亚基理化特性的分析、功能的发掘及含Waxy蛋白亚基种质的快速筛选提供参考依据,以小麦中国春为材料,采用逐一优化毛细管电泳体系参数的方法,系统研究了毛细管电泳中缓冲液各成分以及pH值对中国春中Waxy蛋白亚基出峰效果的影响,初步构建了普通小麦Waxy蛋白亚基的最佳分离体系。结果表明,在检测波长为214nm、以0.05mol·L-1硼砂＋8%乙腈＋0.8%SDS溶液（pH 9.5）为缓冲液、分离电压20kV、温度25℃、进样压力0.5psi×5s时,在6~9min处出现峰高约0.015au的三个主峰,且图形清晰,基线水平,重复性好。本研究构建的毛细管电泳系统分离体系可有效分离普通小麦Waxy蛋白亚基。
- 孟敏强琴琴高翔陈其皎董剑
- 关键词：小麦WAXY蛋白毛细管电泳缓冲液
- 低分子量谷蛋白亚基在小麦品种形成过程中的变化特征被引量：1
- 2013年
- 【目的】研究普通小麦品种选育过程中低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)的变化特性,理解该基因家族成员多样性的起源,并为小麦品质改良提供参考。【方法】以3套小麦高代杂交品系(F5/F6)为材料,利用毛细管电泳(CE)技术从储藏蛋白水平鉴定LMW-GS亚基的变化;根据GenBank中已公布的LMW-GS编码序列设计特异性引物,进行PCR扩增、克隆、测序及序列分析。【结果】毛细管电泳结果表明,与亲本相比,高代供试品系均保持了相对稳定的LMW-GS数目,但多个亚基在籽粒中的最终含量却发生明显变化;同时,测试品系还产生了亲本所不具有的新条带。对克隆获得的54条序列(GenBank登录号KC222070-KC222121和KC478714-KC478715)进行序列分析,均具有LMW-GS的典型结构,包括相对保守的信号肽、存在丰富变异的中间重复区及保守的C-端,因此属于LMW-GS基因家族成员;子代与对应亲本的相似性分析表明,3套材料中均存在极端保守序列,子代序列与其相应父本序列完全一致,且都属于LMW-m型亚基;相对保守序列所占比例最大,由于微弱的SNPs,双亲都充当变异序列的供体;蛋白质序列分析还揭示了额外Cys亚基的产生过程。此外,还发现含10个或11个半胱氨酸(Cys)残基的LMW-GS。Cys残基的变异主要发生在C-端Ⅲ区,只有1条序列的Cys变异发生在C-端Ⅱ区。【结论】小麦品种选育过程,父源性的LMW-m型低分子量谷蛋白亚基较其它类型亚基更趋于序列的保守,SNPs则是产生LMW-GS多样性的主要动力。
- 杨芮高翔陈其皎李晓燕董剑孟敏赵万春石引刚陈良国
- 关键词：小麦毛细管电泳多样性
- 同源多倍体诱导与鉴定实验中的问题探讨
- 2016年
- 针对同源多倍体诱导与细胞学鉴定实验中,存在实验材料霉烂,同源多倍体诱导率低,细胞学鉴定时染色体着色浅,制片时染色体不分散等问题,该文在豌豆实验中探索出一套染色体诱导、解离、染色、制片等最佳诱导浓度和诱导时间的完整组合,能有效提高豌豆同源多倍体实验的准备与教学工作效率。
- 孟敏王竹林胡甘
- 关键词：豌豆同源多倍体秋水仙素实验教学
- 果蝇杂交实验教学的小窍门被引量：5
- 2015年
- 为了解决果蝇杂交实验中存在的实验过程耗时长、处女蝇质量不高、果蝇性状识别不准确、F2代群体数量偏少等问题,探索出优选培养基、快速鉴定果蝇性别、高质培养处女蝇、扩大F2代群体等优化果蝇杂交实验教学的一些小窍门。
- 孟敏胡甘王竹林车将
- 关键词：实验教学
