尹康
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：河北医科大学实验动物学部更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- SV40PolyA片段串联拷贝数目影响GFP报告基因表达被引量：1
- 2011年
- Alu元件(约280bp)是人类基因组中的重要重复序列,串联Alu呈长度依赖性下调GFP报告基因表达,在Alu串联序列上游正向或反向插入SV40PolyA(简称PolyA,240bp),解除Alu串联序列对GFP基因的抑制作用.PCR法扩增PolyA反序(PolyAas)不同位置的60bp片段,插入pAlu14质粒(14个Alu正向串联插入pEGFP-C1)的GFP基因和Alu14之间,瞬时转染HeLa细胞,通过荧光显微镜观察和Northern检测,1F1R(PolyAas5′端第1个60bp片段)和4F4R(自PolyAas5′端计算第4个60bp片段)不能活化基因;2F2R和3F3R(PolyAas中间的2段)可以解除Alu14对GFP基因的抑制作用.将2F2R和3F3R各自反复首尾串联,分别插入pAlu14质粒GFP基因和Alu串联序列之间,瞬时转染HeLa细胞,用插入4个2F2R的pAlu28,插入4个3F3R的pAlu18,插入4个3F3R的pAlu28作长度对照,以排除由于插入片段长度增加可能对结果造成的干扰,发现2～4个拷贝的2F2R和3F3R活化基因作用高于一个拷贝的同样片段,但是多于8拷贝以后,活化GFP基因作用减弱.本实验证明,SV40 PolyAas至少含有两段活化基因序列,活化基因序列(2F2R,3F3R)的最适活化基因条件需要合适的拷贝数.
- 尹康马欢王秀芳谢英冯晶晶杨钦清吕占军
- 关键词：拷贝数GFPALU
- 活化基因序列串联拷贝数目对GFP报告基因表达的影响及核心序列分析
- 目的:淋巴细胞的抗原受体发生等位基因排斥,又称单等位基因表达,来自父方和母方的抗原受体等位基因在成熟的淋巴细胞中只有一个表现活性。B淋巴细胞单等位基因表达抗原受体(BCR)是通过沉默两个同源抗原受体之一完成,如果没有等位...
- 尹康
- 关键词：拷贝数GFPALU
- 文献传递
