崔硕
- 作品数:8 被引量:2H指数:1
- 供职机构:河北省科学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的原核表达及单克隆抗体制备被引量:1
- 2014年
- 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)是一个肝癌潜在的诊断标志物和治疗靶点。为获得抗GPC3单克隆抗体,用PCR方法克隆GPC3基因,利用酶切位点将该序列插入pGEX-2T载体,构建了pGEX-2T-gpc3表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,获得高效表达。经纯化后获得分子量为58 kD的蛋白。以该重组蛋白为免疫原,通过免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和筛选获得1株抗该重组蛋白的单克隆抗体1F3。Western blot分析显示,该抗体具有较好的特性,可用于GPC3蛋白的功能和应用研究。
- 程华方向东吴萌史蕾崔硕
- 关键词:蛋白表达单克隆抗体
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体的构建及在细胞中的表达
- 研究背景:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)与多种肿瘤的发生发展关系密切,特别是在肝细胞癌中特异性高表达,是一种潜在的肝癌血清学和组织学重要诊断标志物。目的 :通过体外实验构建真核表达载体p CMV-...
- 崔硕程华闫静辉
- 关键词:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体构建脂质体转染
- 文献传递
- 酶联免疫吸附试验试剂盒稳定剂的研制与应用
- 2014年
- 目的研制酶联免疫吸附试验试剂盒中各组分的稳定剂,使得试剂盒保存期达到国家相关规定。方法采用经验法和正交法相结合的办法,配制一系列稳定剂配方,对酶标板、酶标抗体及标准品等进行处理,通过对照试验,筛选出稳定效果最好的配方。结果筛选到一种包被稳定剂(质量分数:牛血清清蛋白0.5%,明胶0.25%,海藻糖5%,PEG4000 0.1%),一种酶标抗体稳定剂(质量分数:牛血清清蛋白1%,蛋白胨1%,蔗糖10%,海藻糖5%,PEG4000 0.25%)。结论在稳定剂作用下,酶联免疫吸附试验试剂盒可在4℃条件稳定放置1年。
- 武向丽程华史蕾崔硕闫静辉
- 关键词:酶标板酶标抗体稳定剂
- 一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖GPC3蛋白片段及其应用和制备的杂交瘤细胞株
- 本发明涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖GPC3蛋白片段,其具有如SEQ ID No.1的氨基酸序列;本发明的GPC3蛋白片段的抗体特异性强,可用于制备高效价的多克隆或单克隆抗体,或者制备GPC3蛋白标准品,可用于GPC3蛋白检...
- 程华闫静辉方向东吴萌崔硕
- 文献传递
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体的构建及在细胞中的表达
- 研究背景:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 (Glypican-3,GPC3)与多种肿瘤的发生发展关系密切,特别是在肝细胞癌中特异性高表达,是一种潜在的肝癌血清学和组织学重要诊断标志物。目的:通过体外实验构建真核表达载体pCMV-g...
- 崔硕程华闫静辉
- 关键词:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体构建脂质体转染
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体的构建及在细胞中的表达
- 2016年
- 构建载体表达人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)蛋白,用以获得抗GPC3单克隆抗体。用PCR技术扩增GPC3基因,利用酶切位点将该序列插入p3XFLAG-CMV-14载体,构建p CMV-gpc3表达载体。通过脂质体将该载体转染至HEK293细胞中,利用Western blot技术检测最终结果。收集稳定表达的细胞,破碎,通过亲和层析柱,获得纯度较高的GPC3蛋白。成功构建p CMV-gpc3真核表达载体,转染至HEK293细胞后,经G418筛选获得稳定表达的单克隆细胞系;Western blot分析结果表明目的蛋白高效表达。
- 程华方向东崔硕吴萌张昭军李泽夏
- 关键词:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达脂质体转染
- 胶体金法检测尿微量白蛋白的结果比较被引量:1
- 2018年
- 目的探讨尿微量白蛋白检测在肾损伤早期诊断及治疗中的应用。方法收集糖尿病及体检健康人群的随机尿,使用自动生化分析仪和胶体金检测尿微量白蛋白水平。结果糖尿病组尿微量白蛋白显著高于对照组(P<0.05)。胶体金法与自动生化仪器法对健康人群的检测基本一致。结论胶体金法测定尿微量白蛋白结果准确、稳定,能较早地反映肾损伤情况,适合家庭的动态监测。
- 武向丽王崇程华崔硕
- 关键词:微量白蛋白自动生化分析仪胶体金试纸条早期肾损伤
- 一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖GPC3蛋白片段及其应用和制备的杂交瘤细胞株
- 本发明涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖GPC3蛋白片段,其具有如SEQ ID No.1的氨基酸序列;本发明的GPC3蛋白片段的抗体特异性强,可用于制备高效价的多克隆或单克隆抗体,或者制备GPC3蛋白标准品,可用于GPC3蛋白检...
- 程华闫静辉方向东吴萌崔硕
- 文献传递