张瑞岩
- 作品数：11 被引量：36H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪乙型脑炎病毒囊膜E蛋白间接ELISA诊断方法的建立与初步应用被引量：5
- 2010年
- 本研究利用纯化的原核表达乙型脑炎囊膜E蛋白作为包被抗原,建立了乙型脑炎间接ELISA诊断方法。对检测的各种条件进行了优化,优化反应条件后确定的抗原最适包被浓度为2μg/mL,抗原最佳包被条件为37℃包被2 h,血清的最适稀释度为1∶160,酶标抗体最适稀释度为1∶5000,最佳封闭条件为1%BSA,阴阳性临界值判定标准为D492 nm=0.254。该方法不与猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒阳性血清反应,其D492 nm<0.254,说明该方法具有良好的特异性。采用该方法对150份疑似乙型脑炎血清样品进行检测,结果显示,与某猪乙型脑炎试剂盒相比符合率为90.77%,表明建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,因此,本研究成功建立了能特异性检测抗乙型脑炎血清抗体的ELISA检测方法。
- 张宁金洪涛丁壮张瑞岩刘雯李勇薛会亮李丹夏志平
- 关键词：乙型脑炎病毒E蛋白间接ELISA
- 流行性乙型脑炎多克隆抗体的制备及其囊膜E蛋白ELISA方法的建立被引量：1
- 2010年
- 为了建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,试验用纯化的乙型脑炎病毒免疫健康新西兰白兔制备多克隆抗体,并对多克隆抗体进行纯化和效价测定;以纯化原核表达的乙型脑炎重组结构蛋白(E蛋白)为包被抗原,通过对检测方法相关条件的优化,建立了检测乙型脑炎病毒抗体的间接ELISA方法。结果表明:该抗原不与猪其他疾病的阳性血清反应,具有良好的特异性;在批内重复试验中,变异系数小于10%。
- 张宁金洪涛丁壮张瑞岩刘雯李勇连海夏志平
- 关键词：乙型脑炎病毒E蛋白ELISA方法
- 硝唑尼特的一般毒性和致突变性研究
- 2011年
- 通过小鼠经口急性毒性试验、蓄积毒性和耐受性试验研究了硝唑尼特的一般毒性;通过Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验研究了硝唑尼特的致突变性。结果表明:硝唑尼特对小鼠口服LD50为6.295 g/kg,属实际无毒类物质;对小鼠20 d给药蓄积系数K>5.26,属弱蓄积或基本无蓄积毒性,未产生耐受性;对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌测试菌株无致突变性,对小鼠骨髓细胞微核率和小鼠精子形态无影响。
- 张德利吴永魁张瑞岩李乾学张西臣
- 关键词：急性毒性蓄积毒性致突变性
- 日本脑炎病毒囊膜蛋白的基因原核表达及抗原性分析被引量：1
- 2010年
- 参照GenBank中的日本脑炎病毒序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因得到cDNA,克隆至pMD-18T载体,经测序证实后亚克隆至原核表达载体pET-28a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果表明,成功构建了重组质粒pET-28a/JEV E,目的蛋白主要以包涵体形式表达。Western blot检测表明,表达产物与兔抗JEV多克隆抗体呈阳性反应,在ELISA试验中,用表达出的E蛋白包被,能够很明显地区分出猪日本脑炎阴性、阳性血清。
- 张宁金洪涛夏志平张瑞岩刘雯李勇薛慧亮李丹丁壮
- 关键词：日本脑炎病毒E蛋白原核表达抗原性
- 利什曼原虫灭活苗的免疫效果试验被引量：1
- 2010年
- 以小鼠为模型评价了利什曼原虫灭活苗的免疫保护效果。将利什曼原虫甲醛灭活后制备灭活疫苗,单独或与质粒pVAX/mIL-18联合经肌肉注射免疫小鼠,共免疫2次,间隔2周;同时以PBS作为对照。ELISA检测抗体表明,利什曼原虫灭活疫苗单独或与pVAX/mIL-18联合免疫可以诱导小鼠产生较强的抗利什曼原虫的IgG。免疫接种4周后通过尾静脉攻击利什曼原虫,联合免疫的减虫率达47.7%,单独免疫组减虫率达到31.4%;质粒pVAX/mIL-18组减虫率达到29.1%,灭活苗与pVAX/mIL-18联合免疫组肝脏负荷都要显著低于其它组(P<0.05)。表明灭活苗与pVAX/mIL-18联合免疫组对Balb/c小鼠有一定的保护力,具有一定预防利什曼原虫感染的作用。
- 马翠平王泽刘全史赫张瑞岩商立民张林波
- 关键词：利什曼病灭活苗
- 硝唑尼特对杜氏利什曼原虫体内药效活性研究
- 2011年
- 为观察硝唑尼特对感染杜氏利什曼原虫小鼠的保护效果,将杜氏利什曼原虫前鞭毛体接种昆明小鼠,饲养30 d后每天灌服3个浓度(400,200,100 mg/kg)的硝唑尼特,并设阴性(玉米油)、阳性(两性霉素B)对照,连续给药10 d,治疗结束10 d后处死,分别以有限稀释法、荧光定量PCR法和肝组织HE染色检测药物治疗效果。结果显示,400 mg/(kg.d)的硝唑尼特能明显减少小鼠体内杜氏利什曼原虫数(P<0.05),有限稀释法和荧光定量PCR法显示其对肝、脾的抑虫率分别为91.54%、92.05%和90.97%、91.63%;200,100 mg/(kg.d)药物组同样具有一定的抑虫效果。结果表明:硝唑尼特对体内杜氏利什曼原虫具有较好的药效活性,并具有剂量效应相关性。
- 张瑞岩张宁商立民张西臣刘全吴永魁
- 关键词：杜氏利什曼原虫黑热病药效
- 硝唑尼特对杜氏利什曼原虫的药效学及一般毒性研究
- 杜氏利什曼原虫(Leishania donovani,L.d)是一种专性细胞内寄生的鞭毛虫,可感染人、哺乳动物和爬行动物等,引起人畜共患的利什曼原虫病(Leishmaniasis)又称黑热病。该病呈世界范围流行,目前全世...
- 张瑞岩
- 关键词：杜氏利什曼原虫药物活性小鼠
- 文献传递
- 硝唑尼特对利什曼原虫的体外药效试验被引量：3
- 2010年
- 为观察硝唑尼特在不同浓度、不同作用时间对离体杜氏利什曼原虫的药效作用,以6个不同浓度(6.25、12.5、25、50、100、200μg/mL)的硝唑尼特分别作用体外培养的杜氏利什曼原虫前鞭毛体48h和72h。结果显示,随着浓度和作用时间的增加,药物对虫体的抑制率升高,显微镜下可见虫体变形,核和动基体不完整,细胞质内有空泡,鞭毛脱落,即硝唑尼特对杜氏利什曼原虫有较好的抑杀作用。
- 史赫张瑞岩张林波马翠平张西臣刘全吴永魁
- 关键词：杜氏利什曼原虫体外试验
- 抗弓形虫药物研究进展被引量：14
- 2010年
- 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界范围分布的人兽共患寄生原虫,给人类生活和畜牧业生产带来极大的危害,然而至今仍没有理想的治疗弓形虫病的药物。近年来,研究人员主要从干扰弓形虫的叶酸代谢、检测抗其他病原微生物和寄生虫药物的抗弓形虫活性,以及针对弓形虫独特的生理结构和生化反应路径进行药物设计,开展抗弓形虫药物的研究,取得了许多重要的成果。随着人们对弓形虫研究的不断深入,对其分子生物学特性会有更加全面的了解,将给新的药物靶标的发现和特效药物的研发提供重要的理论依据。
- 张瑞岩刘全商立民吴永魁
- 关键词：弓形虫
- 弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1启动子的克隆及鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的克隆弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的启动子序列,为弓形虫基因操作提供工具。方法应用PCR方法扩增弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的5′非编码区、致密颗粒蛋白GRA2的3′编码区和红色荧光蛋白(RFP)基因,并构建重组质粒pMD/SAG-RFP-GRA,经电穿孔法将其转染弓形虫速殖子,倒置荧光显微镜观察RFP的表达。结果重组质粒pMD/SAG-RFP-GRA经双酶切和测序证明构建正确,质粒转染弓形虫速殖子24h,荧光显微镜下可观察到红色荧光,表明克隆的SAG1启动子具有转录活性。结论已成功克隆了弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的启动子序列,并能介导外源基因在弓形虫体内的表达。
- 安娜张瑞岩赵志远商立民刘全魏峰
- 关键词：弓形虫病速殖子克隆
