方海立 作品数:29 被引量:135 H指数:7 供职机构: 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
钙超载与细胞损伤 被引量:21 2004年 高利平 方海立关键词:钙超载 细胞损伤 人类胆汁分泌情况的观察 1994年 人类胆汁分泌情况的观察方海立,朱辉(重庆医科大学生理学教研室,重庆医科大学附属第二医院重庆630046)为了观察人胆汁分泌量在24h中的分布及在各时相内胆汁中主要固体成分的浓度,测定了9例成人每小时胆汁的分泌量,及每4h胆汁中主要的脂类成分。1材料与... 方海立 朱辉关键词:胆汁 分泌 急慢性给锂盐对大鼠脑内多巴胺含量的影响 被引量:3 1990年 锂盐是一种抗精神病的药物,常用于情感性精神疾患的治疗和预防,但其作用机制仍未阐明。已知,中枢性多巴胺能神经元是抗精神药物以及一些中枢激动剂的作用点。我们应用萤光分光光度法测定了大鼠腹腔内注射锂盐1、3和5天后不同脑区内多巴胺的含量。实验结果表明注射锂盐24小时后,大鼠脑和脊髓内多巴胺含量是降低的;注射锂盐3天和5天后,相应出现多巴胺含量的轻度升高和显著升高。这就说明在锂盐作用下,动物中枢性多巴胺能神经元发生了一系列代谢性变化。有关锂盐对脑内多巴胺代谢的影响尚无一致意见。 方海立 周保和 费汝为关键词:多巴胺 锂盐 抗精神病药 中药膏剂“CYG”促猪大面积全厚皮肤缺损创面愈合的研究 2009年 目的观测中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面的促愈效果并探讨其促愈机制。方法贵州小型猪7只,每只背部脊柱两侧近脊柱均有全厚皮肤缺损创面(大小10.5cm×8.5cm)各2个,共28个创面。右侧的14个创面用中药膏剂"CYG"治疗作实验组,同体左侧创面作对照。观察伤后7周内各创面愈合时间、愈合率及愈合过程病理变化,并通过S-P法层粘蛋白(Laminin)免疫组化染色观测其肉芽组织内血管生成变化,免疫组化染色、RT-PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor beta one,TGF-β1)表达。结果伤后7~44d,治疗组与对照组创面平均残留面积及愈合残留面积百分率比较,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组于伤后32~34d完全愈合,较对照组提前10~12d,且创面质地细腻、平整。愈合过程中治疗组肉芽组织生长早且旺盛,肉芽组织中Laminin、成纤维细胞、毛细血管及胶原含量丰富;治疗组各时相点创面TGF-β1表达较对照组低,同组TGF-β1表达:中期(伤后15~35d)>早期(伤后7~14d)>晚期(伤后66~49d)。结论中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面有良好促愈作用,且创面愈合质量高,并可能对创面瘢痕形成具抑制作用。 闫国和 侯爱莲 孙慧勤 廖彬 方海立 程天民 王军平 粟永萍1,6二-磷酸果糖减轻STZ致大鼠胰岛细胞凋亡 被引量:1 2009年 目的探讨1,6二-磷酸果糖(FDP)对链脲佐菌素(STZ)致胰岛细胞凋亡的保护作用与血红素加氧酶/一氧化碳(HO-1/CO)、抗氧化以及NOS/NO系统的关系。方法用离体培养乳鼠胰岛细胞,分别检测STZ、FDP作用后细胞形态、细胞活性、细胞凋亡率、细胞HO-1的活性和细胞培养上清液中胰岛素的基础和高糖刺激分泌量以及CO的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和NO的变化。结果STZ作用后,胰岛细胞活性降低,基础和高糖刺激胰岛素分泌减少,胰岛细胞凋亡率明显增加(P<0.01);细胞HO-1活性有所下降,上清液中CO生成减少(P<0.01),SOD、GSH-PX活性水平降低、iNOS增多、NO增加。与FDP孵育后细胞活性显著升高,胰岛素基础和高糖分泌量增多,胰岛凋亡率明显降低,HO-1活性和CO生成明显提高(P<0.01或P<0.05),同时SOD、GSH-PX活性水平明显增强、iNOS活性降低、NO生成减少,并且具有剂量依赖性。结论FDP能显著改善STZ致胰岛细胞凋亡,其机制可能与增加HO-1/CO系统水平,提高抗氧化酶SOD、GSH-PX的活性以及降低iNOS活性,从而减少NO的生成等途径有关。 郑倩 刘红 曹弟勇 蓝海涛 刘华 方海立 张能关键词:STZ 胰岛 细胞凋亡 HO-1/CO INOS/NO 细胞因子诱导离体胰岛β细胞凋亡及其机理研究 被引量:8 2006年 目的:观察白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)和γ-干扰素(IFN-γ)引起胰岛细胞凋亡、胰岛素分泌、bcl-xl和bax蛋白表达的变化。方法:应用体外单层培养的3 ̄5天的W istar大鼠胰岛细胞,分别检测IL-1β、TNF和IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、以及培养液中基础和高糖刺激下胰岛素分泌量、NO含量、NOS活性、bcl-xl和bax蛋白表达以及DNA片段的影响。结果:IL-1β、TNF和IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率明显增加及DNA明显片段化,同时NO含量和NOS活性亦明显升高,胰岛素分泌明显降低,bcl-xl表达下降和bax表达增强(P<0.01),且有时间和剂量依赖性。结论:细胞因子能诱导胰岛细胞凋亡,其机制可能与提高NOS活性从而增加NO的生成以及上调bax/bcl-xl比例有关。 余华荣 张能 方海立 董毅龙关键词:白细胞介素-1Β 一氧化氮 胰岛细胞 一氧化氮和Ca^(2+)介导的细胞因子损伤大鼠胰岛细胞的研究 被引量:5 2006年 目的观察一氧化氮和Ca2+在白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)和γ-干扰素(IFN-γ)诱导的胰岛细胞凋亡中的作用。方法应用体外单层培养的3 ̄5d的Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL-1β、TNF和IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、[Ca2+]i含量以及培养液中基础和高糖刺激下胰岛素分泌量、NO含量及NOS活性以及DNA片段的影响。结果IL-1β、TNF和IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率明显增加及DNA片段化,基础和高糖刺激下胰岛素分泌量降低,同时胰岛细胞[Ca2+]i、NO含量和NOS活性亦明显升高(P<0.01),且有时间和剂量依赖性。结论NO和Ca2+可能是介导上述细胞因子引起胰岛细胞凋亡的重要途径。 余华荣 张能 方海立 郑倩关键词:白细胞介素-1 一氧化氮 CA^2+ 胰岛细胞 胰岛β细胞保护的研究进展 2002年 多种因素可引起胰岛 β细胞的损伤 ,因此通过保护胰岛 β细胞来治疗糖尿病的研究受到人们广泛重视。保护途径较多 ,包括免疫机制、阻断细胞因子的作用、使用自由基清除剂、采用免疫隔离技术以及基因重组技术。胰岛细胞保护为治疗糖尿病提供了新的思路和方法。 郑倩 方海立 张能关键词:胰岛 细胞保护 Β细胞 免疫机制 糖尿病 小鼠IFIT1多克隆抗体的制备 被引量:7 2007年 目的获取小鼠IFIT1(Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1)特异性多克隆抗体。方法扩增培养高效表达IFIT1的重组子pMAL-C2X-IFIT1,超声破碎后的细胞上清过Amylose Pre-packed column亲和层析柱,将所得纯化的融合蛋白MBP-IFIT1作为抗原,添加福氏佐机剂后免疫兔,收集抗血清,用Western blot和ELISA方法测定抗血清特异性反应和效价。结果纯化的MBP-IFIT1可诱导兔产生特异性免疫应答,所得抗体能够特异性识别融合蛋白中的IFIT1,ELISA结果显示其效价为1∶12800。结论MBP-IFIT1具有良好的抗原性,以该融合蛋白为抗原免疫兔成功制备出IFIT1特异性多克隆抗体。 郭晓姝 李洪涛 方海立 王军平 粟永萍关键词:IFIT1 多克隆抗体 融合蛋白 抗原性 免疫应答 白细胞介素-1β对胰岛素分泌的抑制及睾酮的反转作用 1995年 离体培养新生大鼠胰岛细胞用IL-1β(5—20U/ml)处理20h后,可使胰岛细胞在高糖(20mmol/L)刺激下的胰岛素释放量明显降低。对IL-1β处理后的胰岛给予睾酮(10-10mol/L),则能反转IL-1β的抑制效应,并且睾酮不仅增加胰岛素分泌,而且还可促进胰岛细胞内胰岛素含量的增加。 方海立 王玲 杨英魁 朱文玉关键词:睾酮 白细胞介素-1Β 胰岛素 胰岛