朱诗应 作品数:59 被引量:165 H指数:7 供职机构: 第二军医大学热带医学与公共卫生学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 上海市国际科技合作基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 哲学宗教 农业科学 更多>>
森林脑炎病毒包膜E蛋白与人抗体Fc段融合蛋白及其用途 本发明涉及生物医药工程技术领域,森林脑炎病毒是一种毒力极强的嗜神经病毒,引起的森林脑炎为急性中枢神经系统传染病。目前的森林脑炎粗制疫苗和纯化疫苗均属于灭活疫苗,存在抗原成分复杂,有效抗原的含量较低,副作用较多等问题。包膜... 赵平 朱诗应 任浩 戚中田文献传递 寨卡病毒基因序列分析及核酸检测方法 被引量:5 2016年 目的分析寨卡病毒基因组序列特征,建立寨卡病毒的核酸检测方法。方法构建81种虫媒传播黄病毒和寨卡病毒的系统进化树,比较寨卡病毒与登革病毒4型、日本脑炎病毒的核酸和氨基酸序列差异,分析亚洲型和非洲型寨卡病毒基因变异位点,尤其是中国的4株输入性寨卡病毒基因序列。通过比较亚洲型和非洲型寨卡病毒全基因组核酸序列,设计一组寨卡病毒实时荧光定量PCR检测的引物和探针,并检测其敏感性与特异性。结果 81种虫媒传播黄病毒中,寨卡病毒与Spondweni、Kedougou病毒同源性最近。全基因组核酸序列比较结果显示寨卡病毒与登革病毒4型的同源性比日本脑炎病毒更近,而氨基酸序列比较结果显示寨卡病毒与日本脑炎病毒的同源性更近。与传统亚洲型寨卡病毒比较,广东GD01株有5个氨基酸突变位点,广东GDZ16001株有3个,浙江ZJ03株有6个,赣县VE Ganxian株有33个。所设计的PCR引物和探针对质粒标准品检测呈阳性,检测下限为100拷贝/mL,对细胞培养的寨卡病毒RNA检测呈阳性,而对登革病毒1~4型和日本脑炎病毒检测呈阴性。结论寨卡病毒与Spondweni病毒同源性最近,赣县VE Ganxian株的高变异显示寨卡病毒正在快速变异。本研究设计的PCR引物和探针可用于亚洲型和非洲型寨卡病毒株检测,具有较高的敏感性和特异性。 狄弘玮 彭浩然 朱善邦 朱诗应 戚中田 唐海琳 赵平关键词:病毒基因组 核酸检测 庚型肝炎病毒NS3蛋白在昆虫细胞中的表达 被引量:3 2000年 The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein was expressed in Sf9 insect cells and analyzed by SDS-PAGE. A protein band about Mr 43810 was demonstrated on polyacrylamide gel electrophoresis and this protein amounted to more than 30% of the total cell proteins. Recombinant NS3 protein was purified by Ni-NTA column. Western blot showed that this recombinant protein could react with GBV-C/HGV RNA positive mixed sera. The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein could be used to detect GBV-C/HGV infection and will supply material for study of structure and function of this protein. 朱分禄 任浩 朱诗应 宋燕斌 戚中田关键词:GBV-C/HGV NS3蛋白 庚型肝炎 表达HCV核心蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌口服免疫小鼠的研究 被引量:3 2002年 构建了丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白原核表达质粒pQE-HCV,转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL7207中,SDS-PAGE和Western blot检测到该重组菌能表达3种分子量的HCV核心蛋白,以该重组菌作为口服型活疫苗灌胃接种BALB/c小鼠,检测到小鼠产生的抗HCV核心蛋白IgG及迟发型超敏反应、T细胞增殖反应和细胞毒性T淋巴细胞反应,结果表明该重组菌能有效诱导免疫应答,尤其能高效诱导细胞免疫应答,这为研制高效免疫、成本低廉、接种方便的HCV疫苗提供了一个新的可行途径。 赵平 曹洁 曹明媚 朱诗应 戚中田关键词:HCV核心蛋白 丙型肝炎病毒核心蛋白 减毒鼠伤寒沙门菌 免疫应答 重组菌 生物采样侦检车 本实用新型涉及一种生物采样侦检车。目前国内外已研制出了具有达到生物安全三级防护水平的移动实验室,俗称“P3车”,国内外现有的P3车均由2台以上的箱式车辆编组而成,体积庞大且操作复杂。本实用新型的目的是提供一种小型的机动性... 赵平 任浩 朱诗应 夏建桥 戚中田文献传递 含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答 2012年 目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。 解冰 唐紫薇 劳文光 李建军 王岩 朱诗应 陶清源 戚中田 赵平 陈志辉关键词:乙型肝炎病毒 CPG寡脱氧核苷酸 质粒 免疫佐剂 鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析 被引量:9 2003年 从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,Mg2 +浓度小于50mmol L时培养的重组菌经SDS PAGE和Westernblot检测能高水平表达HGVNS3蛋白。Mg2 +浓度升至 50mmol L时 ,NS3蛋白表达量明显降低。收集以 50mmol LMg2 +的培养基扩增的重组菌 ,灌胃接种C57小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果显示PpagC是一个强的宿主体内激活的启动子 ,为构建以伤寒沙门氏菌为载体的高效免疫口服疫苗提供了一个新的途径。 王宏卫 赵平 张珉 朱诗应 戚中田关键词:鼠伤寒沙门菌 克隆 活性 镁离子 庚型肝炎病毒 表达质粒 人呼吸道腺病毒核酸分型诊断研究 朱诗应 唐海琳 赵平核酸探针在结核病实验室诊断中的应用进展 被引量:1 1997年 朱诗应关键词:核酸探针 DNA探针 TUBERCULOSIS 结核病 斑点杂交 全染色 庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达 1999年 任浩 朱分禄 朱诗应 宋燕斌 戚中田关键词:庚型肝炎病毒 RT-PCR 昆虫细胞