李双月
- 作品数：47 被引量：76H指数：5
- 供职机构：大连医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤的修复作用被引量：7
- 2018年
- 背景:目前对于脊髓损伤的治疗方法有限,治疗效果不佳,探索新的治疗方法显得至关重要。目的:观察尾静脉注射骨髓间充质干细胞对大鼠脊髓损伤的治疗效果。方法:采用全骨髓贴壁法进行体外分离、培养和纯化骨髓间充质干细胞,通过细胞形态学观察、表面标记物检测进行鉴定。将30只SD大鼠随机分为正常组、脊髓损伤组和骨髓间充质干细胞移植组,每组10只。利用动脉瘤夹钳夹闭大鼠第10胸椎的脊髓制备脊髓损伤模型,脊髓损伤模型建立10 min后尾静脉注射0.2 mL骨髓间充质干细胞单细胞悬液(2×10~6个细胞)。移植后0,10,20,30 d分别进行运动功能评分,并于移植后30 d,分离脊髓组织进行苏木精-伊红染色和透射电镜观察。结果与结论:(1)骨髓间充质干细胞在镜下呈长梭形或成纤维细胞样,CD44、CD90阳性表达率均大于90%,CD45的表达不足2%,证实得到的细胞即为骨髓间充质干细胞;(2)移植后20,30 d,骨髓间充质干细胞移植组大鼠运动功能评分显著高于脊髓损伤组(P<0.05);(3)脊髓损伤组大鼠脊髓组织结构破坏,血管破裂损伤,神经元细胞肿胀变性,并有炎症细胞浸润。骨髓间充质干细胞移植后,脊髓神经元数量明显增多,细胞膜完整,细胞核仁清晰可见;(4)脊髓损伤组大鼠脊髓轴突肿胀、髓鞘脱失,神经轴索出现变性和坏死。骨髓间充质干细胞移植后,大鼠脊髓轴突结构明显修复,部分脱失的髓鞘恢复,厚度均一;(5)结果表明,骨髓间充质干细胞尾静脉移植对大鼠脊髓损伤有明显的治疗作用,可能与其修复脊髓组织结构、保护轴突和髓鞘结构完整有关。
- 孙经淞周雪颖曲淑贤李双月
- 关键词：骨髓间质干细胞移植脊髓损伤
- 一种扩增造血干细胞的方法
- 本发明涉及一种扩增造血干细胞的方法，包括单个核细胞的分离、微囊化单个核细胞的制备和培养；造血干细胞的扩增。本发明不但能实现造血干细胞的有效扩增，还能进行规模化培养，在血液生物学和临床应用研究中将发挥重要作用。
- 马小军李双月王为于炜婷
- 文献传递
- 等级护理模式下老年人对养老机构服务的体验及影响因素分析被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨大连市养老机构中对分级护理项目执行的不足之处,分析影响入住的老年人对服务体验的影响因素,从而为养老机构更好地服务于老年人提供参考依据.方法 采取整群抽样的方法选取大连市养老机构入住的144名老年人进行调查,调查工具采用一般资料及等级护理老年人对养老机构服务体验调查表,分析老年人的服务体验现状及影响因素.结果 等级护理老年人对26项护理分级项目内容执行的体验中,认为执行最差项目是为老人梳头,执行最佳的项目是组织文娱活动.老人护理服务质量体验总分平均为（25.93-6.59）分,具体条目中满意程度最差的2项是“心理护理”（2.48±1.22）分和“疾病的健康宣教”（2.14±0.25）分,满意程度最好的2项是“养老护理员的责任心”（1.51 ±0.63）分和“服务时说话的态度和表情”（1.63±0.66）分.多元逐步回归分析表明,影响老年人护理服务质量体验的因素主要为是否有慢性病史、性别、经济和社会支持状况,P＜0.05,差异有统计学意义.结论 养老机构的管理人员应侧重对老人个人卫生等服务项目进行监督管理,加强养老护理员在心理护理和疾病的健康宣教服务质量方面的培训.养老护理员在为老人提供服务时应针对不同的性别、有无慢性病史和社会支持情况进行针对性护理.
- 陶巍巍沙丽艳贾雪琴王莉李双月
- 关键词：老年人养老机构等级护理影响因素
- 罗曼鹤鸡骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的建立鸡骨髓间充质干细胞（BMSCs）的分离培养和鉴定体系。方法从1～14天龄罗曼鹤鸡骨髓中分离骨髓细胞，差速贴壁法纯化、扩增BMSCs。倒置显微镜下观察细胞形态特征，MTY法绘制生长曲线，流式细胞仪检测细胞标志物，并分别进行成骨、成脂诱导分化能力检测。结果分离培养的细胞呈成纤维细胞样或长梭形，生长状态良好；CD29阳性表达率为92．10％，CD34阳性表达率仅为0．80％；经成骨诱导分化，出现明显的钙化结节，茜素红染色阳性；经成脂诱导分化，油红O染色阳性，细胞内出现明显的脂质小滴。结论建立了操作简单、高效的鸡BMSCs分离培养和鉴定体系，为鸡BMSCs的进一步研究和应用提供了良好的基础。
- 李双星朴丰源戚媛刘晓辉李亚晨刘爽李双月
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性及优势被引量：6
- 2014年
- 背景:骨髓来源的间充质干细胞含量极低,体外纯化、扩增活性好、分化潜能高的骨髓间充质干细胞,对进一步研究至关重要。目的:进一步验证全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化骨髓间充质干细胞的生物学特性、表型及多向分化潜能。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞标记物表达,分别进行成骨、成脂诱导分化。结果与结论:成功纯化、扩增了高细胞活性、高分化潜能的骨髓间充质干细胞。所得细胞呈成纤维细胞样;表达CD29、CD90,不表达CD45;成骨、成脂诱导分化后,茜素红染色、油红O染色阳性。证实全骨髓贴壁法操作简单、对细胞活性损伤小,可以得到高纯度、高活性、高分化潜能、生物学形态和特征稳定的骨髓间充质干细胞。
- 李双月戚媛陈若琳王哲敏刘爽朴丰源
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞成骨诱导国家自然科学基金
- 微囊三维培养对造血干/祖细胞生物学特性的影响
- ＜正＞目的：探讨微囊三维培养对于造血干/祖细胞生物学特性及造血重建能力的影响。方法：分离健康孕妇足月产脐带血单个核细胞,分别通过二维和三维培养进行扩增。通过 MTT 法测定扩增细胞的生长曲线;流式细胞术检测扩增细胞表面抗...
- 王华李双月王为郭昕刘银霞王立生马小军
- 文献传递
- 微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响
- 2009年
- [目的]利用基因芯片技术研究微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响。[方法]将新鲜分离的人脐血细胞在生理条件下进行微囊化包封、培养7 d后,对其进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、cRNA探针生物素标记、与基因芯片杂交、扫描杂交信号,最后进行芯片数据处理和生物学信息分析。[结果]基因芯片筛选结果显示,与平面培养对照组相比,微囊化培养脐血细胞中差异表达2倍及以上的造血相关基因有32个,其中19个表达上调,13个表达下调。[结论]微囊微环境影响脐血细胞造血相关基因的表达。
- 李双月王为王秋艳孙志杰吕国军郭昕朴丰源马小军
- 关键词：脐血细胞基因表达培养环境
- BDE47对Neuro-2a细胞毒性效应及作用机制被引量：2
- 2016年
- 探讨2,2',4,4'-四溴联苯醚(2,2',4,4'-tetrabromodiphenylether,BDE 47)对神经细胞Neuro-2a的毒性影响及机制。将Neuro-2a细胞暴露于浓度为6.25、12.5、25、50、100μmol·L-1的BDE 47,采用MTT法检测细胞存活率、荧光探针DCFH-DA检测细胞活性氧生成量、吖啶橙检测溶酶体膜通透性、罗丹明123检测细胞线粒体膜电位、Annexin V-FITC检测细胞凋亡、Western blot检测组织蛋白酶B(Cathespin B)表达。结果显示,与对照组相比,12.5、25、50、100μmol·L^(-1)BDE 47显著降低Neuro-2a细胞存活率和细胞线粒体膜电位(P<0.05);6.25、12.5、25、50、100μmol·L^(-1)BDE 47显著诱导活性氧含量升高(P<0.05),增加Neuro-2a细胞溶酶体膜通透性(P<0.05),诱导Neuro-2a细胞凋亡(P<0.05),升高Cathespin B蛋白表达(P<0.05)。结果表明,BDE 47可能通过介导溶酶体-活性氧-线粒体环路,诱导Neuro-2a细胞凋亡。
- 李振伟刘畅李春娜邵静李亚晨李双月刘晓晖韩璐
- 关键词：BDE神经毒性溶酶体线粒体活性氧凋亡
- 三邻甲苯磷酸酯对大鼠C6星形胶质细胞的氧化损伤和细胞周期阻滞作用被引量：5
- 2016年
- 三邻甲苯磷酸酯(tri-o-cresyl phosphate,TOCP)是一种有机磷酸酯类化合物,具神经毒性作用。研究表明星形胶质细胞是有机磷化合物(organophosphorus compounds,OPs)神经毒性作用的靶点之一。为了探讨TOCP对星形胶质细胞的毒性作用,采用大鼠C6星形胶质细胞分别经0.1、0.3、1.0和3.0 mmol·L-1TOCP染毒处理24 h,应用MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)活力分析法检测细胞活力,在电子相差显微镜下观察细胞形态,二硫代二硝基苯甲酸(DNTB)比色法测定谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,流式细胞仪检测分析细胞周期。结果显示,经TOCP处理24 h后,大鼠C6星形胶质细胞存活率降低,LDH释放增加,细胞形态也发生了明显的变化。GSH含量和GSH-Px活性降低,G1期细胞数量也逐渐增加。上述结果表明,TOCP对星形胶质细胞具有毒性作用,引起氧化损伤和细胞周期阻滞。
- 刘晓晖李双月刘琦朴丰源邵静李亚晨薛鹏
- 关键词：三邻甲苯磷酸酯星形胶质细胞细胞毒性细胞周期阻滞
- 三邻甲苯磷酸酯暴露对鸡脊髓组织基因谱的影响
- 2014年
- 目的从三邻甲苯磷酸酯(tri-orhto-cresyl phosphate,TOCP)暴露鸡的脊髓组织中筛选有机磷致迟发性神经病(organophosphorus ester induced delayed neuropathy,OPIDN)的相关基因,为进一步探讨OPIDN的发病机制提供目的基因谱。方法罗曼鹤母鸡(Roman hens)随机分为TOCP组、先给苯甲基磺酰氟(phenylmethanesul fonyl fluoride,PMSF)再给TOCP的PMSF前干预组、生理盐水对照组,每组4只。染毒5 d处死实验鸡,低温取脊髓,依次提取总RNA、纯化、转录合成cRNA探针、标记生物素、基因芯片杂交、扫描杂交信号、最后进行基因芯片处理和分析。结果 TOCP组与对照组相比有显著差异,并与PMSF前干预组无显著差异的基因有520个,其中表达差异在3倍以上基因有36个。结论从TOCP暴露鸡脊髓组织中筛选出520个OPIDN相关基因,其中36个基因可能为OPIDN密切相关基因。
- 李双月朴丰源
- 关键词：基因谱脊髓
