李哲
- 作品数：27 被引量：137H指数：6
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国际科技合作与交流专项项目吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 梅花鹿IFN-β1基因的克隆与分子进化分析被引量：3
- 2014年
- 根据GenBank中牛干扰素-β1（IFN-β1）基因序列（E00137）,设计并合成了1对引物,以梅花鹿肝脏组织DNA为模板,采用PCR技术扩增梅花鹿IFN-β1全基因,并克隆、测序。结果表明：梅花鹿IFN-β1基因全长561 bp,编码186个氨基酸,含有6个与二硫键形成有关的半胱氨酸,3个糖基化位点,成熟蛋白含有4个α螺旋,3个β折叠区,7个β转角。序列比较分析发现,梅花鹿IFN-β1基因序列与GenBank发表的23种IFN-β1基因核苷酸序列同源性为3.2%~91.1%,氨基酸序列同源性为21.9%~79.7%。梅花鹿与其他23种动物的IFN-β1基因序列分析和系统进化树分析表明,IFN-β1基因存在种属特异性。梅花鹿INF-β1基因的成功克隆,为进一步研究梅花鹿INF-β1基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。
- 苏凤艳李哲刘存发宗颖曾范利王全凯
- 关键词：梅花鹿分子进化
- 微滴数字PCR技术在多拷贝木聚糖酶酿酒酵母工程菌筛选中的应用被引量：4
- 2018年
- 为获得高产木聚糖酶酿酒酵母工程菌,利用rDNA整合法构建木聚糖酶酿酒酵母整合表达载体,实现木聚糖酶基因的多拷贝表达,并利用微滴数字聚合酶链式反应技术对转化子拷贝数进行检测,分析木聚糖酶基因拷贝数与酶活力之间的关系。结果表明:利用rDNA整合法获得了10株不同拷贝数木聚糖酶酿酒酵母工程菌,对其酶活力进行测定,发现当拷贝数小于9时,菌株产酶能力随拷贝数增加而增强,9拷贝数时菌株产酶能力最强,酶活力为308 U/m L,超过9拷贝,产酶能力降低。
- 兰雪张斯童李哲常浩孙旸王刚陈欢王春凤陈光
- 关键词：多拷贝酿酒酵母木聚糖酶
- 光合叶面积对人参全氮、全磷和全钾含量变化的研究
- 2012年
- 为了深入了解不同生育期多茎参人参的全氮、全磷、全钾的吸收利用情况,运用常规的分析方法对不同生育期3、4年多茎参人参的全氮、全磷、全钾的含量变化研究中发现,不管是全氮,全磷,还是全钾,展叶期到花期这个时期他们都是呈现下降的趋势。全氮含量3年多茎参高于4年多茎参,绿果期全氮含量最低,红果期全氮含量达最高值;全磷含量在花期最低;枯萎期全钾含量最高。通过对各主要养分的测定分析,发现在不同的生育期多茎参人参中各养分形态及含量的吸收和利用呈现规律性变化。
- 张燕娣李哲许永华张秀丽刘显娇张连学
- 关键词：不同生育期人参营养成分
- 人参与西洋参脂溶性成分的GC-MS分析被引量：12
- 2011年
- 采用索氏提取法提取人参和西洋参中的脂溶性成分,并用GC-MS法分析鉴定人参和西洋参的脂溶性成分及其相对含量。结果共鉴定出41种脂溶性成分,主要为醇类、酯类及脂肪酸类化合物。人参和西洋参的脂溶性成分含量最高的均为(Z)-9-十七烯-4,6-二炔-8-醇,但在人参中甾醇类和脂肪酸类化合物含量明显高于西洋参。该方法快捷可靠,为人参和西洋参的鉴别及药理作用的研究提供重要的指标。
- 张秀丽赵岩沈宏图张燕娣李哲张连学
- 关键词：人参西洋参脂溶性成分GC-MS
- 梅花鹿IFN-α基因的克隆与原核表达研究被引量：3
- 2015年
- 为研究梅花鹿IFN-α的抗病毒功能和分子机制,根据GenBank中牛IFN-α基因序列(A00145),设计并合成1对引物,以梅花鹿肝脏组织DNA为模板,采用PCR技术扩增梅花鹿IFN-α全基因核苷酸序列。序列分析表明梅花鹿IFN-α基因全长570 bp,编码189个氨基酸,其中含18个氨基酸的信号肽和169个氨基酸的成熟多肽,存在1个潜在跨膜区,基因随不同物种发育进化地位表现出种属间的差异性。在此基础上,合成1对引物,扩增梅花鹿IFN-α成熟肽核苷酸序列,构建pET28a-IFNα原核重组表达质粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中。SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,在24 kd左右出现特异性蛋白带,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的34.04%,且表达产物与抗His标签抗体可发生特异性反应。将Ni柱纯化的pET28a-IFNα诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检测表明表达产物具抗病毒活性。研究结果为梅花鹿IFN-α蛋白抗病毒分子机制的研究及抗病毒药物的开发奠定了基础。
- 苏凤艳李哲王晓霞刘存发曾范利宗颖王全凯
- 关键词：梅花鹿原核表达
- 能矿化固定重金属离子的菌LRP3及其应用
- 本发明提供一种能矿化固定重金属离子的菌LRP3及其应用，本发明能矿化固定重金属离子的菌LRP3，为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC NO.13347的拉恩氏菌Rahnella sp.。...
- 李明堂张欢焉莉赵兴敏李哲冷粟吴迪
- 梅花鹿干扰素-β1在MDBK细胞中表达及抗牛病毒性腹泻病毒活性检测被引量：1
- 2016年
- 为真核表达梅花鹿干扰素β1(IFN-β1)并检测其抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)活性,本研究以梅花鹿肝脏基因组为模板,通过PCR扩增出IFN-β1的编码区序列,克隆于真核表达载体pVAX1中,构建重组真核表达质粒pVAX1-IFNβ1,并转染MDBK细胞进行表达。结果显示,将pVAX1-IFNβ1转染MDBK细胞后经western blot和间接免疫荧光法检测和鉴定证实,转染的重组质粒能够在MDBK细胞中正确表达目的蛋白,表达的重组蛋白约为25 ku。此外,采用细胞病变抑制法检测表明转染后重组细胞表达的IFN-β1具有抗BVDV活性。本研究为梅花鹿IFN-β1蛋白抗病毒分子机制的研究及抗病毒药物的开发奠定了基础。
- 刘千辉李哲苏凤艳曾范利王全凯
- 关键词：梅花鹿真核表达
- 水貂白细胞介素-2基因的克隆与生物学信息分析被引量：2
- 2016年
- 根据GenBank中狐白细胞介素-2（IL-2）基因序列（AJ621188），设计合成1对引物，以水貂脾脏组织RNA为模板，采用RT—PCR技术扩增水貂IL-2基因。序列分析表明：水貂IL-2基因长468bp，编码155个氨基酸，其中含21个氨基酸的信号肽和134个氨基酸的成熟多肽。IL-2蛋白分子质量为17．84ku，等电点为4.65，含有4个与二硫键形成有关的半胱氨酸，1个糖基化位点，成熟肽含有3个仪螺旋，5个B折叠区，9个B转角。同源性分析发现，水貂IL-2基因序列与GenBanK发表的21种IL-2基因核苷酸序列同源性为2．9％，88．5％，氨基酸序列同源性为5．2％-80．6％。水貂与GeneBank中21种动物的IL-2基因序列分析和系统进化树分析表明，IL-2基因存在种属特异性。水貂IL-2基因的成功克隆，为进一步研究水貂IL-2基因生物学活性和应用奠定基础。
- 曾范利刘畅李艳芝苏凤艳李哲宗颖
- 关键词：水貂IL-2基因克隆
- 人参茎叶对鹌鹑生长、免疫器官指数和血液生化指标的影响被引量：13
- 2017年
- 【目的】研究人参茎叶超微粉对鹌鹑生长性能、免疫器官指数和血液生化指标的影响。【方法】选取体质量相近、健康的1日龄鹌鹑250只,随机分为5组,每组5个重复,每重复10只,Ⅰ组为日粮对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ组为抗生素对照组,在基础日粮中添加诺氟沙星(10mg/kg);Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为人参茎叶超微粉添加组,分别在基础日粮中添加0.5%,1.0%和2.0%(质量分数)的人参茎叶超微粉,比较5组鹌鹑的生长性能、免疫器官指数和血液生化指标。【结果】与对照Ⅰ组相比,Ⅲ和Ⅳ组鹌鹑平均日增质量显著升高(P<0.05);Ⅳ组料肉比显著降低,饲料转化率显著提高(P<0.05)。试验20d时,Ⅴ组鹌鹑法氏囊指数和Ⅳ组鹌鹑脾脏指数均显著高于对照Ⅰ组(P<0.05);与对照Ⅱ组相比,各试验组鹌鹑免疫器官指数差异不显著(P>0.05)。试验50d时,Ⅳ组鹌鹑脾脏指数和试验组鹌鹑胸腺指数均显著高于对照Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05)。Ⅲ组鹌鹑血液中LDLC、TCHE含量与ALT活性显著高于对照Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05);Ⅳ组鹌鹑血液中GLU含量显著高于对照Ⅰ组(P<0.05),LDLC、TCHE含量与ALT、AST和ALP活性显著高于对照Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05);Ⅴ组鹌鹑血液中ALB、LDLC含量显著高于对照Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ和Ⅴ组鹌鹑血液中TBIL含量极显著高于对照Ⅰ和Ⅱ组(P<0.01);各组间TP、HDLC和TG含量差异不显著(P>0.05)。【结论】人参茎叶超微粉可促进鹌鹑的生长性能,改善鹌鹑的部分血液生化指标,促进鹌鹑免疫器官的发育,且以质量分数1%添加剂量效果最佳。
- 李俊峰刘千辉苏凤艳李哲宗颖
- 关键词：人参茎叶鹌鹑血液生化指标免疫器官指数
- 不同海拔高度对人参总皂苷含量的影响被引量：19
- 2011年
- 目的:研究人参总皂苷含量随海拔的变化趋势,为人参药材的道地性开发和人参适宜栽培区域的划分提供科学的依据。方法:采集不同海拔、不同年生人参,采用索氏提取法提取人参根中的人参总皂苷,并用比色法测定人参总皂苷含量。结果:人参总皂苷的含量随着年生的增长而增加;在集安、珲春及抚松地区,人参总皂苷的含量随海拔升高而升高;在长白高海拔地区,人参总皂苷的含量随海拔的升高而降低;在同海拔地区,集安地区人参总皂苷含量明显高于抚松地区。结论:海拔400～952m人参总皂苷含量较高,是人参栽培的适宜海拔高度。
- 张秀丽赵岩张燕娣李哲陈文学张连学
- 关键词：人参人参总皂苷海拔比色法
