李靖贻
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰与慢性疼痛的基因治疗
- 2009年
- RNA干扰（RNA interference，RNAi）是1998年Fire等首次发现并命名的，是由双链RNA（dsRNA）分子在细胞内特异性诱导与之同源mRNA降解或翻译抑制，导致基因沉默的现象，是一种典型的转录后基因沉默（post—transcriptional gene silencing，PrrGs）。RNAi最主要的功能特点是其可以调节和关闭基因的表达，进而调控细胞的各种高级生命活动。RNAi技术已经成为模式生物、基因功能、基因治疗等研究领域中最有力的工具，
- 程智刚潘冰冰王云姣于鹏李靖贻白念岳郭曲练
- 关键词：RNA干扰基因治疗慢性疼痛转录后基因沉默RNAI技术RNA降解
- DREAM短发卡质粒载体的构建和沉默C6细胞DREAM基因
- ＜正＞目的:构建表达下游调控元件的拮抗分子（DREAM）基因序列特异性的短发卡RNA（shRNA）质粒载体,检测其对C6细胞DREAM基因的干扰作用,为研究DREAM基因功能提供有力工具。方法:为了构建pRNAT-U6....
- 程智刚王云姣白念岳于鹏李靖贻贺正华杨胜辉郭曲练
- 文献传递
- 携带dream基因shRNA的慢病毒载体的构建及其对CCI大鼠的镇痛作用
- ＜正＞目的:构建含dream基因有效shRNA的慢病毒载体,利用RNA干扰技术抑制dream基因表达,开展对神经病理性疼痛基因治疗的实验研究。方法:将靶向大鼠dream基因的shRNA重组到慢病毒穿梭质粒中,将重组质粒p...
- 王云姣程智刚于鹏李靖贻白念岳贺正华杨胜辉郭曲练
- 文献传递
- 携带DREAM基因shRNA的慢病毒载体的构建及其对坐骨神经缩窄损伤大鼠的镇痛作用被引量：5
- 2009年
- 目的:构建含下游调控元件的拮抗分子(downstream regulatory element antagonistic modulator,DREAM)基因有效短发夹RNA(shRNA)的慢病毒载体,利用RNA干扰技术抑制DREAM基因表达,开展对神经病理性疼痛基因治疗的实验研究。方法:将靶向大鼠DREAM基因的shRNA重组到慢病毒穿梭质粒中,将重组质粒pKCSHR-puro/GFP-DREAM和慢病毒包装系统共转染293T细胞包装成慢病毒,收集病毒上清并进行载体病毒滴度的测定。将纯种健康清洁级成年雄性SD大鼠36只随机分为6组:正常对照组(N)、假手术组(S),根据干预手段的不同将大鼠坐骨神经缩窄损伤(chronic constriction injury of sci-atic nerve,CCI)模型组分为4组:CCI(C0)组,CCI疼痛模型建立后不给任何干预措施,生理盐水对照(C1)组,空白载体对照(C2)组,LV-shRNADREAM慢病毒载体治疗(C3)组。该3组大鼠于CCI后第7天分别于蛛网膜下腔注射生理盐水、空白载体、LV-shRNADREAM慢病毒载体。观察各组大鼠术后3,7,10,14,21 d的疼痛行为学的改变。实验结束取腰段脊髓荧光显微镜检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达,Realtime-PCR测定DREAM基因的mRNA含量、Western印迹测定DREAM蛋白含量。结果:测序分析证实载体构建成功,成功进行慢病毒包装,得到病毒液滴度为1.0×108IFU/mL慢病毒载体。鞘内注射LV-shRNADREAM慢病毒载体后,CCI大鼠热痛阈和机械痛阈的异常明显得到改善(P<0.01),腰段脊髓神经细胞DREAM基因mRNA和DREAM蛋白的表达均显著降低(P<0.01)。结论:成功构建了携带大鼠DREAM基因有效shRNA的慢病毒载体,慢病毒携带的短发夹干扰RNA能干扰脊髓中DREAM的表达,为神经病理性疼痛的治疗提供了实验基础。
- 王云姣程智刚于鹏李靖贻白念岳贺正华杨胜辉郭曲练
- 关键词：神经病理性疼痛慢病毒载体
