杨广民
- 作品数：84 被引量：331H指数：10
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- 微囊化转基因细胞小鼠腹腔移植的实验研究
- 目的:探讨微囊化转基因细胞用于异体细胞移植治疗的可能性。方法:使用静电液滴技术制备海藻酸钠-壳聚糖微胶囊,包埋转入癌胚抗原部分基因的人成纤维样骨髓基质细胞,进行实验小鼠腹腔移植。结果:微囊化人源细胞移植到小鼠腹腔3个月内...
- 熊伟谭岩徐立方艳秋段秀梅宋燕杨广民
- 文献传递
- 慢性乙型病毒性肝炎及其相关肝硬化、肝癌患者肝组织中TLR4、TGF-β_1及CCL20的表达及意义被引量：13
- 2016年
- 目的通过检测慢性乙型病毒性肝炎(CHB)及其相关肝硬化、肝细胞癌(HCC)患者肝组织中TLR4、TGF-β1、CCL20表达的变化,探讨TLR4、TGF-β1、CCL20是否与CHB迁延不愈有关,以及是否参与CHB相关的肝硬化和HCC发生、发展的可能机制。方法选取临床标本,分为4个组,包括正常对照组、CHB组、肝硬化组、HCC组。分别为3例健康人、15例CHB患者、7例肝硬化患者、25例HCC患者肝组织标本,共有石蜡切片150张,采用免疫组织化学方法检测TLR4、TGF-β1、CCL20在各组中的表达。用免疫荧光双标法分别检测TLR4与TGF-β1在CHB、肝硬化、HCC患者肝组织标本上的共表达;TLR4与CCL20在CHB、肝硬化、HCC患者肝组织标本上的共表达。结果免疫组化结果显示,TLR4、TGF-β1、CCL20在CHB组、肝硬化组、HCC组肝组织中的表达均明显高于正常对照组(P<0.05),HCC组与CHB组的表达差异有统计学意义(P<0.01),其中肝硬化组与HCC组的差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光双标结果显示TLR4与TGF-β1和CCL20均共定位于肝细胞胞浆和胞膜上。结论 HBV感染可上调CHB及与其相关的肝硬化、HCC患者肝组织中TLR4、TGF-β1、CCL20的表达,且TLR4、TGF-β1、CCL20在HCC患者肝组织中的表达明显高于CHB患者。
- 魏卓杨广民陈晶
- 关键词：TOLL样受体4乙型病毒性肝炎
- 多肿瘤标志物联合检测在恶性肿瘤诊断中的价值分析被引量：15
- 2009年
- 目的探讨联合检测多肿瘤标志物在恶性肿瘤临床诊断中的应用价值。方法应用多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)测定902例恶性肿瘤患者和248例健康体检者血清十二种肿瘤标志物水平。结果恶性肿瘤组的阳性率显著高于健康体检组,灵敏度是70.5%,特异性为92.3%。结论运用蛋白芯片技术联合检测多种肿瘤标志物可以提高恶性肿瘤的诊断敏感性,同时也可作为肿瘤普查的手段之一。
- 王玉芳李首庆杨广民马寅芙魏兵兵
- 关键词：肿瘤标志物
- 重组质粒pchIL-18-MAGE转染树突状细胞疫苗体外杀伤肝癌细胞的研究被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨重组质粒pch IL-18-MAGE转染DC细胞在体外对肝癌细胞的杀伤作用。方法:构建共表达质粒pchIL-18-MAGE,体外培养树突状细胞,将以上重组质粒转染树突状细胞。RT-PCR和Western blot方法验证IL-18和MAGE-1基因在转染DC中的表达。应用流式细胞术检测转染后DC细胞的表型变化。以转染重组质粒DC刺激的淋巴细胞作为效应细胞,单纯淋巴细胞和未经转染DC刺激的淋巴细胞为对照,检测其对肝癌靶细胞的体外杀伤作用。ELISA法检测INF-γ的分泌。结果:pchIL-18-MAGE转染后DC细胞高表达CD83、CD1a、CD86、CD80、HLA-DR等抗原,表现为成熟DC表型特征。共表达质粒转染的DC细胞诱导的CTL对肝癌细胞杀伤作用最强(P<0.05)。结论:pchIL-18-MAGE转染DC细胞对MAGE+肝癌细胞杀伤作用明显。
- 刁斌斌李首庆马寅芙杨广民
- 关键词：树突状细胞MAGE-1IL-18
- 恩度联合FOLFOX方案治疗老年晚期胃癌的疗效被引量：9
- 2012年
- 晚期胃癌的治疗以铂类和氟脲嘧啶为基础化疗方案,奥沙利铂（OXP）/氟脲嘧啶（5FU）/亚叶酸钙（CF）治疗晚期胃癌有效率为45%左右,mTTP 6个月,中位生存期（MS）10个月左右,1年生存率40%,但是对老年胃癌的临床研究不多。本文应用ED联合FOLFOX方案治疗老年晚期胃癌患者。
- 郭洪斌史鹏高峰杨广民孙亚东
- 关键词：恩度FOLFOX方案胃癌
- 诊断急性胰腺炎的生化检测指标评析被引量：22
- 2013年
- 目的通过检测血淀粉酶(S-Amy)、胰脂肪酶(LPS)、C反应蛋白(CRP)及尿淀粉酶(U-Amy)、尿胰蛋白酶原激活肽(TAP)5项生化指标,探讨急性胰腺炎(AP)早期诊断及病情评估的有效指标。方法将541例急腹症患者分为AP组和非AP组,其中AP组分为轻症AP(MAP)和重症AP(SAP),同时选取80例健康体检者作为正常对照组,于患者入院后6h内采集静脉血并留取新鲜尿液,对各组5项生化指标进行检测和分析。S-Amy、U-Amy、LPS采用速率法,TAP、CRP采用ELISA法。结果 S-Amy、U-Amy和TAP水平在AP组最高,非AP组次之,正常对照组最低,各组之间差异均具有统计学意义(P<0.01)。AP组LPS水平较非AP组及正常对照组显著增高(P<0.01)。AP组与非AP组CRP水平均较正常对照组增高(P<0.01),但AP组CRP水平与非AP组比较无显著差异。SAP组U-Amy、TAP及CRP水平显著高于MAP组(P<0.01),而S-Amy、LPS水平在这两组间无显著差异(P>0.05)。LPS用于AP早期诊断的敏感度为92.1%、特异度为91.6%,显著高于S-Amy、U-Amy、TAP及CRP。结论血、尿淀粉酶、LPS指标对于AP的早期诊断具有重要意义,TAP和CRP有助于评估病变的严重程度、观察疗效及评估预后。
- 刘柏林龚杰方艳秋杨广民魏雁虹
- 关键词：胰脂肪酶淀粉酶胰蛋白酶原激活肽C反应蛋白急性胰腺炎
- 强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞和CD28CD40的检测及临床意义被引量：3
- 2007年
- 目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血淋巴细胞中数量的变化和共刺激分子CD28CD40外周血淋巴细胞上的表达的临床意义。方法采用流式细胞术检测60例AS患者和30例健康对照者外周血淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19相对数量,检测CD28、CD40L在CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞上和CD40在CD19+B细胞上的表达情况。结果AS患者CD3+、CD3+CD4+、CD19+细胞较正常对照组显著增高(P<0.05),CD3+CD8+T细胞较正常对照组降低(P<0.05);AS患者CD28、CD40L在CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞上和CD40在CD19+B细胞上的表达都较正常对照组显著增高(P<0.05)。结论强直性脊柱炎(AS)外周血淋巴细胞中数量变化及共刺激分子CD28、CD40表达情况与AS患者免疫功能紊乱和发病机制密切相关。
- 杨广民王玉芳马寅芙李首庆谭岩
- 关键词：强直性脊柱炎淋巴细胞CD28CD40FCM
- 人α1微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2013年
- 目的构建人α1微球蛋白（α1-MG）基因的原核表达质粒，在大肠杆菌中表达、纯化，为制备仅。一MG诊断试剂中原料抗体、标准品及质控品奠定基础。方法从人胚胎肝脏中提取总RNA，利用反转录聚合酶链反应技术扩增α1-MG基因。然后克隆至PQE30表达载体，转化大肠杆菌M15中进行表达，并经镍固定金属亲和层析进行纯化，蛋白质印迹进行免疫学鉴定。结果获得了与Genebank报道一致的仪。一MG基因片段，成功构建了成熟人α1-MG的原核表达载体PQE30-α1-MG，质粒转化大肠杆菌并经1mmol／L异丙基硫代半乳糖诱导5h后，可表达相对分子质量约25000的外源蛋白，表达的α1-MG大部分在包涵体中，并可经镍固定金属亲和层析纯化，纯化有效率95％以上，BCA法测定纯化的α1-MG蛋白含量为25mg／L。蛋白质印迹表明，该蛋白可与抗人仅．一MG天然抗体反应。结论通过基因工程方法可获得高效表达的重组α1-MG蛋白，该蛋白具备同天然仅。一MG相同的生物学特性，为下一步进行α1-MG相关研究及应用奠定基础。
- 魏雁虹耿辉宋帅孟莹杨广民
- 关键词：Α1微球蛋白重组蛋白反转录聚合酶链式反应蛋白质印迹
- 联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗体外抗肝癌作用的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的该研究构建重组基因疫苗pcDNA-MAGE-1和pcDNA-hIL-18;探讨联合应用基因疫苗体外抗肝癌免疫治疗的作用。方法基因疫苗分组免疫实验小鼠,在体外验证疫苗免疫后的小鼠脾细胞对MAGE-1阳性和阴性肝癌细胞株的杀伤作用;分别以不同剂量的pcDNA-hIL-18与pcDNA-MAGE-1组合测定免疫鼠脾细胞杀伤率,验证产生高杀伤效应的最佳的pcDNA-hIL-18浓度。结果重组基因疫苗免疫组小鼠脾细胞对两种MAGE-1阳性肿瘤细胞(SMMC-7721、BEL-7402)均有明显的杀伤作用,其杀伤效应与生理盐水组(空白对照),空质粒pcDNA3组(阴性对照)相比差异具有显著性(P<0.01);重组基因疫苗免疫后的小鼠脾细胞对MAGE-1阴性肿瘤细胞(QQY-7701)有一定的杀伤作用,与空白对照及阴性对照免疫组相比差异有显著性(P<0.05);pcDNA-hIL-18+pcDNA-MAGE-1组以(50+100)μg剂量免疫小鼠的脾细胞杀伤效应最高,与pcDNA-MAGE-1和pcDNA-hIL-18组相比差异有显著性(P<0.01)。结论联合应用MAGE-1与IL-18基因疫苗对MAGE-1阳性肿瘤细胞有明显的杀伤作用。
- 杨广民段秀梅李首庆马寅芙谭岩
- 关键词：基因疫苗MAGE-1IL-18肝癌细胞
- 再生障碍性贫血患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞及Foxp3的变化及临床意义被引量：14
- 2009年
- 目的:探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)及Foxp3的表达及临床意义。方法:25例AA病人,其中含非重型再障(nSAA)18例、重型再障(SAA)7例,采用四色流式细胞检测技术分析AA患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+T细胞、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞百分比及绝对计数,并进一步分析AA患者PBMC的CD4+CD25+、CD4+CD25low及CD4+CD25highT细胞中Foxp3+T细胞的百分比,同时利用RT-PCR方法检测PBMC中Foxp3mRNA表达水平,并与29例正常对照组的上述指标进行比较。结果:与正常对照组相比,SAA患者及nSAA患者PBMC中CD4+T细胞、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+百分比及绝对计数减低(P<0.05),并且SAA组明显低于nSAA组(P<0.001);AA患者CD4+CD25+、CD4+CD25low及CD4+CD25highT细胞中Foxp3的表达较正常对照组减低(P<0.05);AA患者PBMC中Foxp3 mRNA表达水平与正常对照组没有明显差别(P>0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞减低可能与AA的发病有关,SAA的Treg表达低于nSAA,为其作为AA病情变化的判断指标提供进一步的依据。
- 王雪野韩梅杨广民肖中平付堃李凌君封韬
- 关键词：再生障碍性贫血调节性T细胞FOXP3
