杨畅
- 作品数：9 被引量：6H指数：2
- 供职机构：贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省省长基金贵州省科技厅国际合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- rmhTRAIL联合BK通道阻滞剂诱导K562/A02凋亡作用的研究
- ＜正＞目的:肿瘤坏死因子相关配体是TNF超家族成员,为Ⅱ型跨膜蛋白,能与其受体结合,启动细胞内的信号转导,激活Caspase级联反应诱导细胞凋亡。其特点是在抗肿瘤方面具有选择性杀伤肿瘤细胞同时不对正常细胞产生杀伤作用。在...
- 李燕王季石马丹杨畅王娅婷陈珵
- 文献传递
- HO-1基因表达对伊马替尼耐药的慢性髓系白血病细胞增殖的影响被引量：3
- 2011年
- 目的通过氯高血红素（Heroin）诱导伊马替尼耐药慢性髓系白血病（CML）细胞株K562／A02．IM中血红素加氧酶-1（HO-1）基因表达，探讨HO-1基因对伊马替尼耐药CML细胞增殖的影响，为治疗CML多药耐药及新药的开发提供思路和实验依据。方法采用RT—PCR法检测20例CML伊马替尼耐药患者骨髓细胞中HO-1基因的表达，半定量RT—PCR法和Westernblot法分别检测不同剂量Hemin处理K562／A02-IM细胞不同时间后HO-1的表达，通过AnnexinV／H双染色法检测细胞凋亡情况，采用MTT法检测Hemin诱导及锌原卟啉抑制HO-1表达与细胞存活率的关系。结果RT—PCR结果显示耐药患者骨髓细胞中HO-1基因阳性表达，半定量RT—PCR和Westernblot法显示，不同浓度的Heroin（0、10、20及40μmol／L）处理K562／AO2-IM细胞16h后，HO-1的表达量随Heroin浓度的升高而增加，存在剂量依赖关系，而20μmol／LHeroin分别处理K562／AO2-IM细胞0、8、16、24h后，HO-1的表达量在处理16h组最高。AnnexinV／PI法检测显示，0、10、20及40pmlol／LHemin作用于K562／AO2-IM细胞16h后细胞凋亡率分别为（17．61±0．01）％、（12．13±0．11）％、（7．94±0．03）％和（4．62±0．15）％，其抗凋亡的作用呈剂量依赖性；20pmol／LHemin作用K562／A02-IM细胞8、16及24h的细胞凋亡率分别为（14．72±0．05）％、（8．15±0．07）％和（16．37±0．13）％。MTT法检测显示与对照组相比，Hemin诱导K562／AO2-IM细胞HO-1基因表达促进了细胞的增殖，且作用存在剂量依赖关系；而锌原卟啉抑制HO-1的表达，促进了细胞的凋亡（P〈0．05）。结论CML伊马替尼耐药患者骨髓细胞HO-1基因阳性表达，HO-1是一种可诱导表达型基因，具有抗细胞凋亡及促进细胞增殖的作用，抑制HO-1表达可能成为治疗CML耐药的新方法。
- 王季石柴柏胜方琴何颖颖陈珵杨畅
- 关键词：血红素加氧酶-1伊马替尼耐药
- AMN107联合血红素加氧酶-1抑制剂诱导慢性髓系白血病细胞凋亡被引量：1
- 2012年
- 运用AMN107(尼洛替尼)联合血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)作用于慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞,研究其对CML细胞增殖的影响并探讨其作用机制。采用MTT法和台盼蓝染色法检测AMN107(10μmol/L)及ZnPPⅨ(10μmol/L)单独或联合处理不同时间的细胞增殖率;半定量RT-PCR法和Westernblot法检测空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞HO-1的表达;AnnexinⅤ/PI双染色法检测处理48 h时各组细胞凋亡情况。结果表明:联合用药对细胞的抑制作用最强,且呈时间依赖性;联合用药组HO-1的表达量最低;空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞凋亡率分别为(11.38±0.02)%、(17.44±0.08)%、(39.81±0.07)%和(56.46±0.19)%。结论:第二代酪氨酸激酶抑制剂AMN107具有诱导CML细胞凋亡的作用;抑制HO-1表达能加强AMN107对CML细胞的杀伤作用,这为临床进一步提高CML的疗效提供实验依据。
- 陈珵王季石杨畅于艳艳李燕马丹方琴
- 关键词：血红素加氧酶-1K562细胞慢性髓系白血病细胞凋亡
- 雷帕霉素逆转CML同源细胞株K562/A02对尼洛替尼耐药
- 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）特异性抑制剂雷帕霉素（rapamycin,RAPA）联合第二代酪氨酸激酶抑制剂尼洛替尼（nilotinib,AMN1...
- 杨畅王季石方琴李燕陈珵马丹王娅婷
- 文献传递
- 苯乙基异硫氰酸酯对HL-60细胞增殖、诱导凋亡及HO-1表达的影响作用
- 目的:异硫氰酸酯(ITCs)是十字花科及其近缘植物白菜花菜科中大量存在的硫苷的酶解产物,具有抗癌防癌、抗菌、抗血小板聚集、降血脂血糖等生物学活性。β-苯乙基异硫氰酸酯(PEITC)是ITCs中的典型代表药物。有研究表明P...
- 王娅婷王季石李燕马丹杨畅陈珵
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- 体外诱导K562细胞尼洛替尼耐药及其机制的初步探讨
- 目的：体外建立对尼洛替尼(nilotinib,AMN107)耐药的白血病细胞株K562-rn,并初步探讨其耐药机制。方法：以药物浓度递增的方法诱导人白血病细胞株K562对AMN107产生耐药性,MTT法确定其耐药倍数。流...
- 王季石杨畅万琴陈珵杨远胡秀英
- 关键词：尼洛替尼耐药机制流式细胞术
- 文献传递
- 尼洛替尼诱导K562/A02细胞凋亡及对HO-1基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究尼洛替尼(nilotinib,AMN107)诱导K562/A02细胞凋亡及对血红素加氧酶-1(HO-1)基因表达的影响。方法采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562/A02细胞中的BCR-ABL融合基因;用不同浓度的AMN107分别处理K562/A02细胞24 h后,通过实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测BCR-ABL融合基因mRNA的表达水平;采用MTT法观察细胞增殖变化;通过An-nexin V/PI双染色法检测细胞凋亡和细胞周期;采用RT-PCR法和Western Blot法检测HO-1基因的表达。结果 FISH法分析结果显示,K562/A02细胞BCR-ABL融合基因阳性细胞占细胞总数98%;RQ-PCR法检测结果显示,0,5,10,20μmol.L-1AMN107作用于K562/A02细胞24 h后BCR-ABL融合基因表达随AMN107浓度增加而逐渐下降;MTT法和Annexin V/PI法显示与对照组相比,细胞存活率随AMN107浓度升高而下降,凋亡率逐渐增加;细胞周期分析显示,经AMN107处理的细胞,G0/G1期和S期细胞明显减少,细胞阻滞在G2/M期;RT-PCR法和Western blot法均检测到HO-1基因表达随AMN107浓度升高而降低。结论 AMN107可抑制BCR-ABL融合基因和HO-1基因表达,从而诱导慢性粒细胞白血病(CML)耐药细胞的凋亡,说明HO-1是CML细胞生长以及BCR-ABL基因存在的一个相关因子,HO-1基因是克服慢性粒细胞白血病耐药的一个潜在靶向。
- 柴柏胜方琴王季石陈珵杨畅
- 关键词：血红素加氧酶-1尼洛替尼K562/A02BCR-ABL慢性粒细胞白血病
- 体外诱导K562细胞尼洛替尼耐药及其机制的初步探讨被引量：3
- 2012年
- 目的体外建立对尼洛替尼（nilotinib）耐药的白血病细胞株，并初步探讨其耐药机制。方法以尼洛替尼浓度递增的方法诱导人白血病细胞系K562细胞对其产生耐药株，命名为K562-RN，MTr法确定其耐药倍数。流式细胞术检测细胞凋亡。采用荧光原位杂交（FISH）法检测K562-RN细胞中bcr-abl融合基因表达。实时荧光定量PCR（RQ—PCR）和Westernblot法检测bcr-abl、HO-1、mdrl、Bcl-2和caspase-3mRNA和相关蛋白在耐药和敏感细胞中的表达。结果成功建立了针对尼洛替尼耐药的人白血病细胞株K562-RN。尼洛替尼对K562、K562-RN细胞的半数抑制浓度（IC50值）分别为（12．320±1．720）μmol／L和（24．742±2．310）μmol／L，K562-RN细胞相对于K562细胞的耐药倍数为2．01倍，且对阿霉素、高三尖杉酯碱、鬼臼乙叉甙和伊马替尼具有不同程度的交叉耐药性。在不同浓度尼洛替尼诱导下，K562-RN细胞凋亡率均较K562细胞明显下降。FISH法分析结果显示K562-RN细胞中bcr—abl融合基因阳性率为92％。K562一RN细胞中bcr—ab1、HO-1mRNA及其相应蛋白高表达，而促凋亡基因caspase-3mRNA及蛋白呈低表达，与K562细胞相比表达水平差异有统计学意义（P〈0．05），多药耐药基因mdrl及其编码蛋白P—gP在K562-RN细胞中呈高表达。结论通过药物浓度递增法成功建立了对尼洛替尼耐药的人白血病细胞株K552一RN，初步探讨了其耐药机制可能与bcr-abl、HO-1及mdrl高表达，同时下调caspase-3mRNA及其蛋白的表达有关。
- 王季石杨畅方琴韦四喜陈埕杨远王娅婷胡秀英马丹
- 关键词：尼洛替尼K562细胞抗药性HO-1
- 尼洛替尼联合HO-1抑制剂诱导慢粒细胞凋亡
- ＜正＞目的:尼洛替尼（AMN170,nilotinib）是根据第一代酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼的结构进行改造的第二代酪氨酸激酶抑制剂,具有亲脂性及溶解度良好的特征,对BCR-ABL的抑制作用为伊马替尼的10～30倍。HO-...
- 陈珵王季石方琴杨远杨畅
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