王希成
- 作品数：25 被引量：45H指数：5
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- 相关领域：生物学理学自然科学总论农业科学更多>>
- 氨基酰化酶Ⅰ的必需半胱氨酸巯基被引量：7
- 1991年
- 本文用DTNB和IAM修饰了猪肾氨基酰化酶Ⅰ的半胱氨酸巯基,用Koshland和邹承鲁作图法定量处理的结果都表明,酶分子中有二个巯基为酶的必需巯基。
- 周海梦王希成
- 关键词：氨基酰化酶必需基团化学修饰
- 双亚基精氨酸激酶的结构分析与偶联正、负协同效应探讨
- 2009年
- 精氨酸激酶是无脊椎动物体内能量代谢的关键酶,催化高能磷酸基团在ATP与磷酸精氨酸之间的可逆性交换。该酶主要分布在肌肉、大脑及神经等易兴奋组织中。
- 吴晓爱叶盛郭淑元闫武鹏王希成饶子和
- 关键词：精氨酸激酶晶体结构
- 氨基酰化酶在低浓度脲溶液中的失活并非解聚所致
- 1994年
- 氨基酰化酶(Aminoacylasc,EC3.5.1.14)是一个含金属锌离子的二聚体酶,亚基分子量约为43 000.Zn^(2+)位于每个亚基的活性部位上,且为酶的活性所必需,过去的研究结果表明锌离子对酶活性部位结构有一定的稳定作用,最近报道的氨基酸序列表明,该酶分子中有16个色氨酸残基和18个酪氨酸残基.
- 王希成张彤王洪睿周海梦
- 关键词：氨基酰化酶解聚失活
- 一种热稳定的人胎盘源促细胞生长因子被引量：5
- 1996年
- 胎盘细胞中含有丰富的生物学活性物质.通过在 90℃温度下酸性介质抽提、乙醇沉淀、DE-52阴离子交换层析、高效液相色谱层析,从人胎盘组织中分离纯化得到一种热稳定的小分子量促细胞生长因子.该物质对人羊膜细胞、小鼠成纤维细胞、小鼠骨髓瘤细胞等多种细胞有较高的刺激生长活性.这种物质被称为人胎盘源促细胞生长因子Ⅰ(Human Placental Growth Factor-I,简称HPGF-1),它是一种分子量为1900的肽类物质,是由一条含有10个氨基酸残基的肽链和非肽部分组成的化合物.肽链部分的分子量为1195,其氨基酸组成已被测定,N-末端残基为 Phe.非肽部分的分子量为692. 该因子的等电点为6.8.
- 方云南王希成周海梦罗利群
- 关键词：人胎盘
- 虫荧光素酶N末端缺失
- 1999年
- 目的是通过虫荧光素酶Ｎ末端氨基酸的缺失，研究缺失对酶活性的影响。采用聚合酶链式反应的方法，构建虫荧光素酶Ｎ－末端缺失７，８，９个氨基酸残基的突变体，导入大肠杆菌ＤＨ５α菌株中直接得到表达，再分离纯化粗酶，并检测酶活。结果表明，Ｎ末端缺失７个氨基酸的突变体几乎没有活性（小于天然活性的０．５％），Ｎ末端缺失８个以上氨基酸残基的突变体则完全丧失活性。由于Ｎ末端缺失６个氨基酸的突变体保持了７７％的酶活性，因而萤火虫荧光素酶Ｎ末端第７个氨基酸与酶的催化活性密切相关。
- 王希成黄威何琳于江涛周海梦
- 关键词：荧光素酶活性PCR
- 氨基酰化酶在脲溶液中变性时构象变化速度与失活速度的比较被引量：2
- 1994年
- 应用了邹氏不可逆抑制动力学的方法,在变性剂存在的条件下,连续监测酶催化的底物反应过程,测定了氨基酰化酶在不同浓度脲溶液中失活的速度常数,并考察了底物的存在对酶失活的保护作用。同时,还比较了氨基酰化酶在不同浓度脲溶液中变性时失活和构象变化的速度。1mol/L,2mol/L脲变性时失活速度常数为为1.62×10^(-2)S^(-1)和2.05×10^(-2)S^(-1),但是酶分子的整体构象尚未发生明显变化。3mol/L脲变性时,失活速度常数为2.56×10^(-2)S^(-1),而变性速度常数为3.72×10^(-3)S^(-1)。失活速度比构象变化速度快大约一个数量级。在4mol/L,5mol/L,6mol/L脲溶液中变性时,酶分子快速失活,而其构象变化速度常数分别为5.27×10^(-3)S^(-1)。5.47×10^(-3)S^(-1),5.56×10^(-3)S^(-1)。可见,在相同浓度的脲溶液中,氨基酰化酶的失活速度明显快于酶分子整体构象变化的速度。上述结果表明,含有辅基金属离子Zn^(2+)的氨基酰化酶的活性部位较酶分子的整体结构也具有一定的柔性。
- 王洪睿王希成王希成张彤
- 关键词：氨基酰化酶失活构象
- 肌酸激酶脲变性时的活性部位构象变化
- 1993年
- 肌酸激酶(ATP:Creatine phosphocransferase EC 2,7,3,2)在盐酸胍、脲、SDS 溶液中去折叠时,构象变化与失活的比较研究,许多作者已经有过详细报道.这些实验结果表明,酶分子的整体构象尚未发生明显变化时,酶的活性已经全部或大部分丧失.比较同浓度变性剂中酶的失活速度和构象变化速度时,发现酶的失活速度快于整个分子的构象变化速度.同样的现象也存在于核糖核酸酶和 D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶.基于大量实验事实的基础,邹承鲁提出了酶分子活性部位构象的柔性,以及这种柔性是催化活力所必需的理论。
- 阴勇王希成周海梦
- 关键词：肌酸激酶脲变性活性部位
- 双亚基精氨酸激酶的结构分析与偶联正、负协同效应探讨
- 吴晓爱叶盛郭淑元闫武鹏王希成饶子和
- 关键词：精氨酸激酶晶体结构
- DTNB对人肌肌酸激酶不可逆抑制作用的研究被引量：3
- 1991年
- 本文研究了DTNB对人肌肌酸激酶的不可逆抑制作用.研究结果表明,与兔肌肌酸激酶不同,人肌肌酸激酶分子中有四个可反应SH.用邹承鲁作图法定量处理结果表明,在这四个可反应的SH中,有一个快反应SH,两个慢反应SH且这两个慢反应SH是酶的必需基团,此外还有一个反应很慢的SH.用邹承鲁提出的在抑制剂存在条件下,酶活性不可逆改变动力学方法,测定了一系列动力学常数,并对DTNB的作用机制进行了探讨.
- 张小红王希成侯立向周海梦
- 关键词：肌酸激酶DTNB
- 全文增补中
- 平面阴离子对肌酸激酶活性的抑制动力学研究
- 1992年
- 本文将邹氏不可逆改变动力学理论与方法运用于平面阴离子对双底物的肌酸激酶的慢可逆抑制作用的研究中,根据理论分析和实验结果,推导并简化了动力学方程,定量地测定了抑制作用的微观动力学常数,探讨了平面阴离子对肌酸激酶的抑制作用机制。
- 张艳陈培榕邹晓明王希成王希成
- 关键词：肌酸激酶活性
