王桂华
- 作品数：37 被引量：107H指数：6
- 供职机构：成都军区昆明总医院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>
- 无偿献血者献血前5项血清病原学及酶学指标结果的分析
- 2006年
- 王桂华杨孝顺安梅戴莹
- 关键词：无偿献血者酶学指标
- 斑点免疫结合法测定卵黄抗体的活性(英文)被引量：1
- 2007年
- 背景:哺乳动物产生的抗体和鸡产生的卵黄抗体在物理、生物活性方面存在差异。卵黄抗体能耐酸耐热,可口服用来防治动物和人类的肠内感染疾病,且对发展常规的诊断免疫实验有益。传统的ELISA法检测卵黄抗体比斑点免疫结合法费时。目的:应用斑点免疫结合法检测卵黄抗体的稳定性。设计:开放性实验。单位:解放军成都军区昆明总医院输血科。材料:实验于2006-01/06在解放军成都军区昆明总医院完成。选取30周龄的白色莱杭母鸡2只,以HLA-A*0201α链作为抗原,纯化抗原的总蛋白浓度0.04g/L,相对分子质量为32000(自行制备);硝酸纤维素膜(进口分装);脱脂奶粉(安怡产品,批号20051220);DAB(博士德公司);辛酸(上海星火化工厂生产);硫酸铵(汕头市光华化学厂生产)。方法:①抗原HLA-A*0201α链以总蛋白浓度0.04g/L纯化后,进行鸡卵黄抗体的纯化,采用SDS-PAGE电泳检测卵黄抗体的纯化结果。②1μL抗原被点样在硝酸纤维素膜的中心,于37℃孵箱中烤干,浸于1mL的PBST中,37℃孵箱90r/min封闭振荡15min,重新更换1mL的PBST,加入一抗卵黄抗体,终浓度为10mg/L。在37℃孵箱振荡30min后,硝酸纤维素膜用PBST洗3次。加入二抗标记HRP的鼠抗鸡卵黄抗体,孵育30min后,硝酸纤维素膜用PBST洗3次,通过用DAB试剂孵育来显色。阳性反应产生一个深棕色的斑点,表明卵黄抗体具有较好的活性;斑点变浅表明失去部分活性;斑点消失表明失去全部活性。根据斑点的灰度值变化对照标准样品,可计算卵黄抗体剩余的百分活性。③卵黄抗体用磷酸盐缓冲液调整为1,0.1,0.01g/L3种蛋白浓度,室温下放置4个月,每个月分别从各种浓度的样品中取10μg,采用斑点免疫结合法检测卵黄抗体室温稳定性。④卵黄抗体分别置于7个EP管,100μL/管,编号1～7。1～3号管用1mol/L的HCL分别调整pH值为5,3,2;4～6号管用1mol/L的NaOH分别调整pH值为9,11,12;7号管的
- 阮光萍安梅王桂华叶蕾邓淑芬
- 关键词：免疫球蛋白类
- 冰冻单采血小板与冷沉淀联合输注在外科手术中的应用被引量：4
- 2009年
- 目的:研究冰冻单采血小板与冷沉淀联合输注在外科手术输血治疗中的止血疗效。方法:选择输血量大于2000ml的外科手术患者随机分组,将冰冻单采血小板或冷沉淀单独输注者与联合输注者作了对比观察。观察指标(输注前与输注后1～2h):①凝血酶时间(TT);②凝血酶原时间(PT);③活化部分凝血活酶时间(APTT);④纤维蛋白原(Fbg);⑤血小板计数PLT;⑥24h内有效止血率;⑦平均止血时间。结果:3组患者组内比较输注后1～2h比输前的TT、PT及APTT显著缩短,Fbg及ALT显著增加(P<0.05或P<0.01);联合输注组与单采血小板对照组比较,TT、PT、24h止血率及平均止血时间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与冷沉淀对照组比较,TT、PT、APTT、PLT、24h止血有效率及平均止血时间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);2个对照组比较Fbg及ALT差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:在外科手术患者输血治疗中,联合输注组比冰冻单采血小板组及冷沉淀单独输注组具有更为显著的止血效果。
- 杨孝顺朱鸿杰王桂华阮光萍徐东萍
- 关键词：血小板输血出血止血
- 顺铂对人肺腺癌细胞SLC-89作用的机理探讨被引量：6
- 2003年
- 目的 观察顺铂对SLC 89细胞增殖生长、端粒酶活性、细胞周期、p5 3、bcl 2及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响 ,探讨顺铂抗癌作用的机理。方法 以不同浓度的顺铂作用于培养的SLC 89细胞 72h ,运用MTT法测定细胞增殖 ,端粒酶重复序列扩增—酶联免疫吸附法 (TRAP ELISA)检测细胞端粒酶活性以及流式细胞术观察细胞周期的变化和p5 3、bcl 2及PCNA的表达。结果 顺铂能显著抑制SLC 89细胞的生长 ,IC50 为 18.47mg/L。顺铂能以浓度依赖方式下调SLC 89细胞端粒酶活性 ,减少S期细胞而阻滞细胞于G0 /G1期 ,降低bcl 2和PCNA的表达 ,同时诱导 p5 3的表达。 结论 顺铂能显著抑制SLC 89细胞生长增殖、改变细胞周期分布、降低端粒酶活性及bcl 2与PCNA的表达 ,并诱导 p5 3的表达 ,这可能是顺铂抗癌作用的重要机理。
- 庞荣清刘春生潘兴华张步振王桂华吴秀琴陈志龙
- 关键词：顺铂腺癌细胞增殖细胞核抗原PCNA端粒酶
- 高脂血成功采集血小板1例
- 2003年
- 近年来,随着成分输血的普遍开展,机采血小板用于治疗血小板减少症等相关疾病越来越多。由于机采血小板具有含量高、效果好、混入红细胞少、一般勿需配血等优点,同时,由于从单个献血者采集,减少了白细胞相关抗原引起的免疫反应和传播病毒性疾病的可能。笔者在用百特CS-3000Plues血细胞分离机采集血小板的过程中,遇到1例高脂血献血者,经适当处理后成功采集,现报道如下。
- 杨晓顺邓淑芬安梅周和其代莹王桂华
- 关键词：高脂血血小板单采成分输血血小板减少症
- 自体血回输在骨科手术患者术中的应用效果分析被引量：1
- 2007年
- 目的探讨利用自体血回收机在骨科手术患者术中回输自体血的临床疗效，以期能减少异体血的用量。方法骨科择期手术患者，术中使用自体血回收机回收洗涤红细胞适时回输，平均回收自体血800～1000ml。术中均未用异体血。结果患者手术顺利，但术后少数患者发生低凝状态，输入异体血。结论术中自体血回输能减少异体血输入量，但须适当补充新鲜血浆和凝血因子。
- 安梅李春晓麻伟青叶蕾王桂华
- 关键词：血液回收自体输血骨科手术
- HLA肽四聚体制备改良与特异CTL检测应用的研究
- 阮光萍马骊王小宁安梅姚翔杨晓顺王桂华吕耀邓淑芬叶蕾
- 目前研究T细胞的识别、活化与频数分布是现代免疫学基础研究与应用研究的热点问题。细胞毒性T淋巴细胞（CTL）是T细胞中一群具有重要意义的细胞，在T细胞免疫应答中发挥重要作用。CTL主要识别存在于靶细胞（如病毒感染细胞或肿瘤...
- 关键词：
- 关键词：卵黄抗体
- 全自动加样仪酶标仪微量酸碱法检测献血员血红蛋白
- 2004年
- 目的 :寻找检测献血员血红蛋白的新方法。方法 :在酸碱法的基础上采用全自动加样仪酶标仪微量法检测血红蛋白 ,并将HICN血红蛋白标准品碱化后测吸收光谱 ,绘制标准曲线。结果 :酸碱法样本及HICN标准品碱化后吸收光谱一致 ,标准曲线线性好。结论 :全自动加样仪酶标仪微量酸碱法检测献血员血红蛋白使操作实现微量化、批量化、自动化 ,简单、快速。
- 桑胜云安梅王桂华杨晓顺戴莹
- 关键词：献血员血红蛋白HICN法
- 一种从骨髓中分离胚胎样干细胞的技术方法
- 2012年
- 目的建立从成体骨髓中分离胚胎样干细胞的技术方法。方法采用密度梯度离心法从成体骨髓中分离单个核细胞,运用胚胎干细胞扩增用的无血清knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中扩增培养,光学显微镜下观察细胞形态特征,分别采用免疫荧光染色和RT-PCR方法鉴定多潜能干细胞标志的表达。结果采用无血清培养基在明胶包被过的培养瓶中培养的方法,可从成体骨髓中分离到贴壁生长的细胞,这些细胞与传统方法分离到的间充质干细胞相比体积更小、形态纤细均一,传代后均匀分布生长,不易老化,而且这些细胞弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2。结论采用扩增胚胎干细胞的技术方法可以从成体骨髓中分离到表达部分多潜能干细胞标志的胚胎样干细胞。
- 张永云庞荣清何洁赵晶瞿良王桂华潘兴华张成
- 关键词：多潜能干细胞骨髓
- 自体输血在妇产科手术患者中的应用体会
- 2005年
- 自体输血是减少血液浪费和保障输血安全的重要手段。本文总结了本院43例妇产科手术患者应用急性血液稀释法自体输血(AHD)的一些经验和体会。
- 安梅杨孝顺叶蕾邓淑芬王桂华
- 关键词：自体输血输血安全
