聂荣鑫
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 沙冬青CBL1蛋白纯化及性质研究被引量：4
- 2011年
- CBL是近年来发现的一类钙信号转导蛋白,CBL-CIPK组成的信号通路在植物应答生物和非生物刺激中发挥重要作用。其中CBL1和相应的CIPK在低钾,渗透压,干旱,机械损伤,及冻伤等环境胁迫中发挥重要作用。通过对沙冬青CBL1表面带电氨基酸定点突变,表面赖氨酸甲基化后电荷消除证明了沙冬青CBL1(AmCBL1)在钙离子存在下的非特异性聚集是由于分子间的电荷相互作用引起,三体蛋白很可能是沙冬青CBL1蛋白发挥功能的单位。通过甲基化可以得到聚合状态均一的蛋白,为CBL1晶体生长奠定了基础。
- 丁志强尚桂军李娜聂荣鑫赵子华仓怀兴
- 关键词：沙冬青环境胁迫点突变
- 浸入式毛细管空间蛋白质结晶室
- 本发明涉及一种具有全方位减震功能的浸入式毛细管空间蛋白质结晶装置。该结晶装置包括毛细管蛋白质溶液池和多孔沉淀剂溶液池，蛋白质溶液池为有机或无机材质的玻璃毛细管，两种液池之间通过由含琼脂糖0.5％至2％的水溶胶凝胶化制成的...
- 仓怀兴马建华段秉亚张贺桥聂荣鑫尚桂军李娜侯佑贞
- 文献传递
- 空间毛细管式蛋白质结晶室样品加载技术研究
- 2013年
- 采用X-射线衍射技术研究蛋白质分子结构与功能的必要前提是获得高质量的蛋白质晶体.空间微重力环境是生长优质蛋白质晶体的理想场所.蛋白质样品的加载工艺对于空间蛋白质结晶实验的成效具有重要影响.针对为神舟八号飞船空间实验新研制的毛细管式空间蛋白质结晶室,结合样品加载基本流程,对加载工艺和伴随的气泡缺陷问题进行了系统和深入分析,确定了针头形状、毛细管封口质量和硅化效果、样品加载工具以及毛细管夹持方式等影响因素,并获得了实验测试验证.在此基础上,通过改进毛细管烧制工艺和样品加载工具,研制和使用专用毛细管夹具等措施,简化了蛋白质样品加载工艺,消除了气泡缺陷,提高了加载效率.新工艺的实施保证了空间实验任务的顺利完成.
- 李娜张贺桥尚桂军聂荣鑫马建华仓怀兴
- 关键词：微重力气泡
- 拟南芥AtCBL9蛋白的原核表达纯化及其晶体生长研究
- 2011年
- 将拟南芥AtCBL9基因构建入原核表达载体pET-22b(+),在大肠杆菌中得到大量表达,用亲和层析和分子筛排阻层析2种方法对表达蛋白进行纯化。SDS-PAGE和动态光散射分析结果显示,AtCBL9蛋白在体外主要以单体和二体形式存在,单体和二体为同一蛋白,并具有较高的纯度。从单体蛋白中筛选出了微晶,为AtCBL9晶体生长优化及其最终结果解析和功能阐明奠定了基础。
- 赵子华赵田欣丁志强尚桂军聂荣鑫李娜
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化晶体生长
- 动态光散射在FOF1-ATPase制备过程中的应用被引量：1
- 2011年
- 采用超声波破碎茵体、DEAE阴离子柱和Superdex200分子筛柱联用法得到较纯的F0F1-ATPase全酶,并得到SDS-PAGE电泳和动态光散射检测确认。动态光散射检测显示,FOF1-ATPase分子团尺寸随温度升高而增加,不同于普通胶体和单亚基蛋白,判断与FOF1-ATPase的多亚基结构有关。研究表明,动态光散射技术是检测蛋白质均一性和稳定性的有效手段。
- 李娜聂荣鑫尚桂军仓怀兴
- 关键词：动态光散射温度
- SZ—8飞船用蛋白质结晶装置的研制
- 2012年
- 空间的微重力环境有助于改善蛋白质晶体的生长质量。为解析高分辨率的蛋白质分子结构和进一步的理性药物设计提供帮助。为利用德国提供的空间生物培养箱在我国的SZ—8飞船上实施空间蛋白质结晶实验,研制了新型实验装置。新装置具有120个结晶室单元,重0.11 kg,体积10-4m3,单个结晶室蛋白液用量可少至1μL。对汽相扩散和液-液扩散蛋白质结晶方法通用,而且不需要电力供应,没有运动部件。经火箭发射和飞船返回的力学环境模拟测试以及实际结晶实验验证,表明装置安全可靠,满足使用需求。
- 李娜尚桂军张贺桥段秉亚聂荣鑫马建华仓怀兴
- 关键词：蛋白质结晶微重力
- 神舟八号飞船空间蛋白质结晶实验被引量：5
- 2012年
- 利用德国空间生物实验装置和自主研制的结晶室,在中国神舟八号飞船上进行了14种蛋白质的结晶实验,实验持续16.5d;同时使用相同结晶室在地面开展比对实验。结果表明:12种蛋白质在空间析出晶体,地面有11种;空间析出的6种蛋白质晶体可用于X-射线衍射实验,收得4种晶体的8套同步辐射衍射数据;地面有5种蛋白质晶体可用于X-射线衍射,收得3种晶体的5套同步辐射衍射数据,其中1套不完整。鸡蛋清溶菌酶空间晶体的初步衍射最高分辨率为1.16魡,地面晶体的为1.23魡。痢疾杆菌二磷酸四腺苷空间晶体初步衍射最高分辨率为1.75魡,地面晶体的为1.49魡,但是1颗空间晶体的晶型发生改变。衣原体蛋白酶样活化因子空间晶体的初步衍射最高分辨率为2.31魡,地面晶体未得到衍射数据。加拿大的17β-羟化类固醇脱氢酶复合物空间晶体的初步衍射最高分辨率为2.30魡,地面晶体未得到完整衍射数据。自主研制的结晶室的浸入式毛细管结构为国际上首次采用,具有无源和通用的优点,对汽相扩散结晶法具有良好的自然对流抑制效果。
- 仓怀兴张贺桥韩毅李娜尚桂军聂荣鑫马建华
- 关键词：蛋白质神舟八号飞船微重力
- 福氏志贺痢疾杆菌硫胺素单磷酸激酶(ThiL)表达纯化及晶体生长研究被引量：1
- 2010年
- 硫胺素单磷酸激酶(ThiL)在ATP存在下催化硫胺素单磷酸(TMP)形成硫胺素焦磷酸(TPP)和ADP,硫胺素焦磷酸就是维生素B1的活性形式。硫胺素单磷酸激酶属于一个小的ATP结合蛋白超家族成员。将来源于福氏志贺痢疾杆菌2a(301株)ThiL基因构建入pET-22b(+)表达载体,在大肠杆菌中得到高效表达,经过两步纯化,得到高纯度蛋白,用于晶体生长,经过对其晶体生长条件进行摸索和优化,得到了能用于X-射线衍射的单晶,为其结构解析、催化机理研究和药物设计提供了基础。
- 尚桂军丁志强赵子华聂荣鑫高伟仓怀兴
