胡小龙
- 作品数：17 被引量：18H指数：3
- 供职机构：上海市公安局更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律电子电信更多>>
- 适配体在毒品毒物分析中的应用
- 2015年
- 适配体是体外合成的能与蛋白质、其他小分子物质、有机离子等等各种配体特异结合单链DNA/RNA,是由SELEX(体外指数富集配体系统进化技术)技术筛选得到,适配体具有对靶标的高特异性和亲和性、合适的化学稳定性、无免疫原性和毒副作用的优点。利用适配体的这些优越性是得适配体可以作为生物识别分子元件应用于传感器及分析试纸中,进而可以快速高效的检测毒物毒品。为了大大提高办案的效率,为维护法治、打击犯罪提供更好的技术支持,通过介绍了一种基于适配体(aptamer)为识别元件的高选择、高灵敏、快速的毒物毒品检验方法。
- 孙美琪曹芳琦胡小龙张玉荣陆鑫蔚李茂盛曾立波
- 关键词：适配体SELEX
- SELEX技术筛选甲基苯丙胺适配子被引量：2
- 2014年
- 目的利用SELEX筛选甲基苯丙胺适配子,并初步鉴定获得甲基苯丙胺的适配子。方法体外合成全长为76 bp的随机ssDNA文库,以甲基苯丙胺完全抗原偶联到溴化氰活化琼脂糖上,作为固相靶分子对随机ssDNA文库进行SELEX筛选。利用SPR测定适配子和甲基苯丙胺的结合率和特异性,通过MFOLD分析软件对适配子进行二级结构预测和结合位点分析。结果经过10轮筛选后,甲基苯丙胺适配子的结合率由88.3 RU上升到113.7 RU,表明特异性适配子得到逐步富集。获得的适配子进行测序,得10个序列,二级结构均为茎-环结构,可能是适配子和甲基苯丙胺结合的结构基础。结论本研究使用SELEX技术筛选小分子毒品甲基苯丙胺适配子的方法,获得与甲基苯丙胺特异性结合的适配子序列,揭示了适配子与甲基苯丙胺结合的基本结构,为制备特异性甲基苯丙胺检测试剂盒奠定了基础。
- 陆鑫蔚胡小龙张玉荣孙美琪孙美琪曹芳琦黄琴蓉
- 关键词：甲基苯丙胺适配子SELEXSPR
- 定量检测毒品的蛋白芯片的研发被引量：3
- 2012年
- 目的利用蛋白芯片技术建立一种快速、高通量的毒品定量检测方法。方法采用硝酸纤维膜作为蛋白芯片的基片,将多种毒品和蛋白偶联物抗原包被在芯片基片上后封闭,不同毒品的单克隆抗体与之结合,再用荧光染料Cy5标记的二抗孵育,样本中如果含有毒品成分,将会与包被的毒品偶联物竞争性地与毒品的抗体相结合,导致最终的荧光信号发生改变,荧光信号的变化与样品中的毒品的浓度相关。通过荧光芯片检测仪CCD可以进行定量分析,最终判断样本中毒品的含量。结果对506例样本进行定性定量检测,与GC-MS仪器比较后总相关性在88%以上,芯片的检测灵敏度比胶体金方法提高10倍,其检测的特异性达到99%。结论蛋白芯片是一种有效、准确的高通量检测毒品含量的方法。
- 曾立波陈连康胡小龙陈复华丁国荣张玉荣张润生梁晨曹芳琦
- 关键词：吗啡甲基苯丙胺蛋白芯片免疫检测
- 新毒品氯胺酮金标单克隆抗体免疫快速检测法的研究和开发
- 曾立波陈连康胡小龙王学生陈亮张明徽房亮张玉荣孔斌丛林张润生严松茂梁晨倪春芳汪蓉
- 本课题建立了氯胺酮完全抗原的合成和制备方法。建立了具有分泌抗氯胺酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株，包括抗原免疫动物、脾细胞和骨髓瘤细胞的融合、抗体纯化，研制出能分泌高效价抗氯胺酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株，建立了规范的胶体金制备...
- 关键词：
- 关键词：胶体金
- 唾液中乙醇含量现场快速检测试剂的研究
- 曾立波陈连康胡小龙王学生陈亮张明微房亮张玉荣孔斌丛林张润生梁晨倪春芳严松茂汪蓉
- 该课题根据酶学显色反应的原理和唾液与血液中乙醇的含量一致性的实验依据，研发出一种快速检测唾液中乙醇含量的试剂条。本试剂条设计了五个酒后驾车处罚的有效浓度含量的标准定量色卡颜色。如，0.20mg/ml－0.80mg/ml乙...
- 关键词：
- 关键词：唾液
- 特异性可卡因核酸适体测试条的研制被引量：2
- 2014年
- 目的筛选识别可卡因的特异性核酸适体,制备可卡因核酸适体测试条(盒)。方法通过SELEX技术筛选可卡因核酸适体,制备胶体金标记可卡因完全抗原(COC-BSA),制作可卡因层析测试条,并对方法特异性、灵敏度、准确性等性能指标进行考察和验证。结果甲基苯丙胺等64种药品和毒品采用本文研制的可卡因测试条检测,结果均为阴性,无交叉反应;检测可卡因最低浓度在5ng/mL,比胶体金单克隆抗体方法检测高5倍;将测试条密封45℃烘烤1个月后,检测结果与未烘烤过的测试条检测结果一致;与GC/MS检测结果对照,准确性为100%。结论本文研制的可卡因核酸适体检测试条,性能稳定,特异性良好,灵敏性和准确性均可达到实际检测的要求,在毒品、毒物的检测中具有广阔的应用前景。
- 曾立波胡小龙张玉荣丁国荣张润生朱凯梁晨曹芳琦
- 关键词：法医毒物分析核酸适体可卡因胶体金单克隆抗体
- FluMag-SELEX技术体外筛选识别氯胺酮的DNA适体被引量：4
- 2014年
- 目的利用FluMag-SELEX技术筛选出能特异性识别氯胺酮的DNA适体。方法体外合成78bp的随机ssDNA文库,氯胺酮作为靶分子,表面修饰甲苯磺酰基的磁珠作为固相载体筛选特异性识别氯胺酮的适体。经过13轮筛选后进行DNA克隆测序,并进行一、二级结构分析。通过对荧光强度的分析检测适体的亲和性、特异性和Kd值。结果获得2条ssDNA适体Apt#4和Apt#8,能够特异性地与靶分子氯胺酮结合,Kd值分别为0.59和0.66μmol/L。二级结构预测以茎环和G-四聚体为主,茎结构可能是适体结构稳定的基础,环和G-四聚体结构可能是与氯胺酮特异性结合的关键。结论 FluMag-SELEX技术可以较好地提高适体的筛选效率,得到能特异性识别氯胺酮的DNA适体,有望用于氯胺酮的快速检测。
- 孙美琪曹芳琦胡小龙张玉荣陆鑫蔚曾立波
- 关键词：分子生物学氯胺酮
- 吗啡免疫荧光层析快速定量方法的建立被引量：6
- 2018年
- 目的建立一种高灵敏度的检测方法对生物样本(血液、唾液和尿液)中吗啡进行快速定量。方法采用免疫层析试纸条的反应模式,以稀土元素铕荧光纳米颗粒为标记物,与吗啡单克隆抗体共价偶联,将吗啡抗原和羊抗鼠抗体包被于硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,通过竞争性免疫抑制反应原理,结合干式免疫荧光检测仪用于生物样本中吗啡的快速定量。结果通过优化试验条件后制备得到免疫层析试纸条检测,线性范围在3~3 000 ng·m L^(-1);精密度和准确度吗啡质控品试验的RSD<10%;与苯丙胺、甲基苯丙胺和氯胺酮等常见毒品和药品均无交叉反应;试纸条在37℃,7 d的加速试验中,性能没有明显降低。结论本实验初步建立的吗啡免疫荧光层析试纸条定量检测方法具有良好的线性范围和精密度,具有良好的特异性和稳定性。本方法可以快速便捷的对生物样本中吗啡进行定量检测,便于在基层单位推广使用。
- 刘佳胡小龙胡小龙张玉荣卢建忠
- 关键词：吗啡法医毒物分析
- 毒品快速检测技术-胶体金标记苯丙胺单克隆抗体免疫快速检测板的研究
- 曾立波陈连康胡小龙王学生陈亮张明徽房亮张玉荣孔斌丛林张润生臧晓春倪春芳严松茂刘琦王跨陡汪蓉王威龚飞君吴忠平梁晨叶海英田枫
- 该课题旨在建立一种一种简便快速、准确可靠、价廉、特别适用现场和基层单位的毒品检测新方法。建立了完全抗原的合成和制备方法和具有分泌抗吗啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株；建立了规范的胶体金制备和标记包被方法；研发出胶体金标记吗啡单...
- 关键词：
- 关键词：胶体金
- 胶体金标记氟乙酰胺单克隆抗体快速免疫检测板的研究(第一期工程完全抗原的研究)
- 曾立波陈连康胡小龙王学生陈亮张明徽房亮张玉荣孔斌丛林张润生臧晓春倪春芳严松茂刘琦王跨陡汪蓉王威龚飞君吴忠平梁晨叶海英田枫
- 该课题研究简便快速、准确可靠、价格便宜且能在现场正确检测氟乙酰胺及代谢物的新方法。采用保持氟乙酰胺的相应结构特征，并在氟乙酰胺的胺基上引入手臂基团“A”，再通过手臂“A” 起到类似桥的功能与大分子血蓝蛋白（KLH）载体偶...
- 关键词：
- 关键词：氟乙酰胺分子免疫
