谢言
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝癌细胞上清液对成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白、环氧合酶-2和肝细胞生长因子的影响
- 2014年
- 目的观察小鼠肝癌细胞上清液对成纤维细胞增殖及表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响。方法制备小鼠成纤维细胞,并分别用普通培养液、小鼠肝癌细胞上清液的条件培养液及含转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的培养液培养成纤维细胞。采用MTT法检测3种培养液培养的成纤维细胞的增殖活力;RT-PCR和免疫组织化学法检测3种培养液培养的成纤维细胞中α-SMA、COX-2、HGF基因mRNA的转录水平及蛋白的表达情况。结果条件培养液及含TGF-β1的培养液对成纤维细胞的增殖均有促进作用,但条件培养液的促进作用更强。普通培养液培养的成纤维细胞在第5天时α-SMA基因mRNA的转录水平最高,含TGF-β1的培养液及条件培养液培养的成纤维细胞在第3天时α-SMA基因mRNA的转录水平最高,且明显高于普通培养液在第5天时的转录水平,第3天以后转录水平稳定;普通培养液培养的成纤维细胞中无COX-2和HGF转录;条件培养液及含TGF-β1的培养液培养的成纤维细胞在第5天时COX-2和HGF基因mRNA的转录水平最高,第5天后无明显下降。不同培养液培养的成纤维细胞中α-SMA蛋白在胞浆、胞膜均有不同程度的表达;普通培养液培养的成纤维细胞中COX-2和HGF蛋白不表达,而含TGF-β1的培养液及条件培养液培养的成纤维细胞中COX-2和HGF蛋白为阳性表达,表达部位均为胞浆。结论小鼠肝癌细胞上清液能有效、稳定地将成纤维细胞激活为稳定表达COX-2和HGF的肌成纤维细胞,其有望成为在细胞移植中促进移植细胞存活及血管重建的细胞。
- 杜文俊李德卫谢言
- 关键词：成纤维细胞肌成纤维细胞Α-平滑肌肌动蛋白环氧合酶-2肝细胞生长因子
- 肌成纤维细胞促进小鼠胚胎肝干细胞的增殖和分化
- 2014年
- 移植细胞的增殖和分化需要微环境支持。作为最重要的微环境成分,肌成纤维细胞在肿瘤的生长过程中发挥着重要作用。该实验Hepa1-6肿瘤细胞上清液在体外激活成纤维细胞分化为肌成纤维细胞,探讨肌成纤维细胞上清对小鼠胚胎肝干细胞(embryonic hepatic stem cells,EHSCs)HP14.5增殖和分化的影响。实验将EHSCs HP14.5分为三组:DMEM培养液处理组(DMEM组)、成纤维细胞上清液处理组(CMFb组)及肌成纤维细胞上清液处理组(CMAFb组)。MTT法绘制三组HP14.5细胞生长曲线图,免疫荧光法及Real-time PCR法检分别测白蛋白(albumin,ALB)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)的蛋白及mRNA表达情况,PAS染色法检测糖原合成状况。MTT法检测显示,CMAFb组胚胎肝干细胞增殖明显速度较其他两组快。免疫荧光染色及Real-time PCR结果显示,HP14.5培养5 d后,CMAFb组ALB和CK18的蛋白及mRNA表达水平以及糖原合成水平显著高于CMFb组及DMEM组,而AFP蛋白和mRNA表达水平明显降低。该实验表明,Hepa1-6激活的成纤维细胞能促进胚胎干肝细胞的增殖以及分化为有功能的成熟肝细胞。
- 谢言杜文俊李德卫
- 关键词：肌成纤维细胞白蛋白细胞角蛋白18甲胎蛋白
- Hepa1-6介导成纤维细胞促进胚胎肝细胞的增殖和分化
- 目的:肌成纤维细胞上清液配置成的条件培养基，处理胚胎肝干细胞，诱导其增殖分化。探讨激活后的成纤维细胞是否可以促进胚胎肝细胞分化为有功能的成熟肝细胞，拟为激活的成纤维细胞与胚胎肝细胞联合移植提供理论依据。 方法:用Hep...
- 谢言
- 关键词：肌成纤维细胞白蛋白细胞角蛋白18甲胎蛋白
